免疫組織化學(xué)（Immunohisochemistry）檢測(cè)技術(shù)曾被公認(rèn)為病理學(xué)發(fā)展史上的第二個(gè)里程碑，此項(xiàng)技術(shù)發(fā)展到現(xiàn)在，較好充實(shí)了病理學(xué)的內(nèi)容，使病理診斷結(jié)果更精確，將病理學(xué)提高到了形態(tài)和功能相結(jié)合的水平。免疫組織化學(xué)方法的敏感性和特異性直接影響診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性。近兩年來(lái)，在本科同志的配合下，筆者已做免疫組化420例，取得了很好的效果，并且明顯的提高了診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性，支持了對(duì)臨床病人的診療?，F(xiàn)提出以下五點(diǎn)供同道借鑒融享生物專注于病理實(shí)驗(yàn) 免疫熒光,HE染色服務(wù)實(shí)驗(yàn)如果你有需要可以找融享生物。山東免疫學(xué)免疫組化檢測(cè)

免疫膠體金技術(shù)

免疫膠體金技術(shù)是以膠體金這樣一種特殊的金屬顆粒作為標(biāo)記物。膠體金是指金的水溶膠，它能迅速而穩(wěn)定地吸附蛋白，對(duì)蛋白的生物學(xué)活性則沒(méi)有明顯的影響。因此，用膠體金標(biāo)記一抗、二抗或其他能特異性結(jié)合免疫球蛋白的分子（如葡萄球菌A蛋白)等作為探針，就能對(duì)組織或細(xì)胞內(nèi)的抗原進(jìn)行定性、定位，甚至定量研究。由于膠體金有不同大小的顆粒，且膠體金的電子密度高，所以免疫膠體金技術(shù)特別適合于免疫電鏡的單標(biāo)記或多標(biāo)記定位研究。由于膠體金本身呈淡至深紅色，因此也適合進(jìn)行光鏡觀察。如應(yīng)用銀加強(qiáng)的免疫金銀法則更便于光鏡觀察。

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基本原理編輯

抗體和抗原之間的結(jié)合具有高度的特異性，免疫組織化學(xué)正是利用了這一原理。先將組織或細(xì)胞中的某種化學(xué)物質(zhì)提取出來(lái)，以此作為抗原或半抗原，通過(guò)免疫動(dòng)物后獲得特異性的抗體，再以此抗體去探測(cè)組織或細(xì)胞中的同類的抗原物質(zhì)。由于抗原與抗體的復(fù)合物是無(wú)色的，因此還必須借助于組織化學(xué)的方法將抗原抗體結(jié)合的部位顯示出來(lái)，以期達(dá)到對(duì)組織或細(xì)胞中的未知抗原進(jìn)行定性，定位或定量的研究。分類編輯

免疫組織化學(xué)技術(shù)按照標(biāo)記物的種類可分為免疫熒光法、免疫酶法、免疫鐵蛋白法、免疫金法及放射免疫自顯影法等。

免疫熒光方法

是較好早建立的免疫組織化學(xué)技術(shù)。它利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理，先將已知抗體標(biāo)上熒光素，以此作為探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原，在熒光顯微鏡下觀察。當(dāng)抗原抗體復(fù)合物中的熒光素受激發(fā)光的照射后即會(huì)發(fā)出一定波長(zhǎng)的熒光，從而可確定組織中某種抗原的定位，進(jìn)而還可進(jìn)行定量分析。由于免疫熒光技術(shù)特異性強(qiáng)、靈敏度高、快速簡(jiǎn)便，所以在臨床病理診斷、檢驗(yàn)中應(yīng)用較廣。2）免疫酶標(biāo)方法

免疫酶標(biāo)方法是繼免疫熒光后，于60年代發(fā)展起來(lái)的技術(shù)?；驹硎窍纫悦笜?biāo)記的抗體與組織或細(xì)胞作用，然后加入酶的底物，生成有色的不溶性產(chǎn)物或具有一定電子密度的顆粒，通過(guò)光鏡或電鏡，對(duì)細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)的各種抗原成分進(jìn)行定位研究。免疫酶標(biāo)技術(shù)是較好常用的技術(shù)。該方法與免疫熒光技術(shù)相比的主要優(yōu)點(diǎn)是：定位準(zhǔn)確，對(duì)比度好，染色標(biāo)本可長(zhǎng)期保存，適合于光、電鏡研究等。免疫酶標(biāo)方法的發(fā)展非常迅速，已經(jīng)衍生出了多種標(biāo)記方法，且隨著方法的不斷改進(jìn)和創(chuàng)新，其特異性和靈敏度都在不斷提高，使用也越來(lái)越方便。在病理診斷中廣為使用的有ABC法、SP三步法、即用型二步法檢測(cè)系統(tǒng)等。

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    ——90年代分子雜交技術(shù)、原位雜交技術(shù)、免疫細(xì)胞化學(xué)分類方法迅速發(fā)展。——2000年各種免疫組化技術(shù)更加成熟，使免疫組化技術(shù)成為當(dāng)今生物醫(yī)學(xué)中形態(tài)、功能代謝綜合研究的一項(xiàng)有力工具。其應(yīng)用范圍深達(dá)醫(yī)學(xué)各個(gè)學(xué)科，是目前生命科學(xué)工作者應(yīng)該掌握的基本技術(shù)之一。免疫組化技術(shù)技術(shù)分類（1）根據(jù)染色方式分成：①貼片染色②漂浮染色（2）根據(jù)Ag—Ab結(jié)合方式分成：①直接法②間接法③多層法（3）按標(biāo)記物的性質(zhì)分成：①免疫熒光技術(shù)（免疫熒光法）②免疫酶技術(shù)（酶標(biāo)抗體法、橋法、PAD法、ABC法）③免疫金屬技術(shù)（免疫鐵蛋白法、免疫金染色法、蛋白A金法）免疫組化技術(shù)標(biāo)記物（1）必要性：組織細(xì)胞內(nèi)Ag—Ab結(jié)合反應(yīng)一般是不可見(jiàn)的，若在鏡下檢測(cè)，則必須具有可視性標(biāo)記物。（2）常用標(biāo)記物①熒光素：較常用的是異硫一氰酸熒光素（Fluoresceinisothiocyanate，F(xiàn)ITC）——熒光顯微鏡下呈綠色熒光四乙基羅達(dá)明（rho—damineRB200）——熒光顯微鏡下發(fā)橙紅色熒光②酶：辣根過(guò)氧化物酶、堿性磷酸酶。③生物素：（Biotin）④鐵蛋白金等：主要應(yīng)用于免疫電鏡。其他：如同位素（因涉及污染和防護(hù)難一般不用）免疫組化技術(shù)應(yīng)用凡是組織細(xì)胞內(nèi)具有抗原性的物質(zhì)。哪里有比較好的免疫組化服務(wù)融享生物。山東免疫學(xué)免疫組化檢測(cè)

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意義編輯

近年來(lái)，隨著免疫組織化學(xué)技術(shù)的發(fā)展和各種特異性抗體的出現(xiàn)，使許多疑難得到了明確診斷。在常規(guī)病理診斷中，5%-10%的病例單靠H.E.染色難以作出明確的形態(tài)學(xué)診斷。尤其是免疫組化在診斷和鑒別診斷中的實(shí)用價(jià)值受到了普遍的認(rèn)可，其在低分化或未分化的鑒別診斷時(shí)，準(zhǔn)確率可達(dá)50%-75%。免疫組織化學(xué)的臨床應(yīng)用主要包括以下幾方面：

⑴惡性的診斷與鑒別診斷；

⑵確定轉(zhuǎn)移性惡性的原發(fā)部位；

⑶對(duì)某類進(jìn)行進(jìn)一步的病理分型；

⑷軟組織的一般需根據(jù)正確的組織學(xué)分類，因其種類多、組織形態(tài)相像，有時(shí)難以區(qū)分其組織來(lái)源，應(yīng)用多種標(biāo)志進(jìn)行免疫組化研究對(duì)軟組織的診斷是不可缺少的；

⑸發(fā)現(xiàn)微小轉(zhuǎn)移灶，有助于臨床方案的確定，包括手術(shù)范圍的確定。

⑹為臨床提供方案的選擇。

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