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干熱滅菌生物指示劑操作流程

來源: 發(fā)布時間:2025-07-09

過氧化氫滅菌生物指示劑的芽孢計數(shù)方法 過氧化氫滅菌生物指示劑芽孢計數(shù)—操作方法?隨機抽取需檢驗批次生物指示劑 4片(支)與相關物品一并放入安全柜中,用酒精棉擦拭外表面,通風15min以上,后續(xù)操作如下:特別提醒:不可將指示劑進行紫外照射,否則會造成計數(shù)結果偏低!?。?01芽孢洗脫 在生物安全柜中,取出生物指示劑載體,分別放置于無菌試管中,向試管中加入 10 mL無菌純化水,于渦旋混勻儀上震蕩2min,轉移至超聲波清洗機中,設置頻率為40KHz,處理15min,將該試管記為10-1。 特別提醒:不要將多片載體放置到一個容器中進行洗脫,載體相互堆疊可能影響洗脫效果,造成計數(shù)結果偏低。過氧化氫低溫滅菌效果存疑?泰林生物指示劑給您答案。干熱滅菌生物指示劑操作流程

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壓力蒸汽滅菌生物指示劑芽孢計數(shù)之熱激活處理、梯度稀釋(106濃度)和培養(yǎng)計數(shù) 將上述10-1試管放置于95℃~100℃恒溫水浴鍋中熱激活15min,熱激活結束后立即放入 0℃~4℃冰水混合浴中迅速冷卻至室溫。 注:根據(jù)生物指示劑總芽孢數(shù)適當調(diào)整稀釋級,建議最終稀釋芽孢數(shù)在30~300cfu/mL。 取最終稀釋的試管,用移液槍吸取1mL菌懸液加入90mm的一次性無菌平皿中,注入15mL ~20mL溫度不超過45 ℃融化的胰酪大豆胨瓊脂培養(yǎng)基(TSA),混勻,每稀釋級至少制備2個平板。等待平板凝固后,倒置于恒溫培養(yǎng)箱中55℃~60℃培養(yǎng)24h~48h,記錄各平板的菌落數(shù),并計算每片(支)生物指示劑的總芽孢數(shù)。供應生物指示劑芽孢數(shù)量泰林生物指示劑的使用簡便,適合各種規(guī)模的實驗室和生產(chǎn)環(huán)境。

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濕熱滅菌生物指示劑的選型 某滅菌程序的滅菌條件為121℃,12min,能否選擇FBio≥12min的生物指示劑? A:?能否選擇FBio≥12min的生物指示劑,需知曉該滅菌程序的FPhy值,即使是相同的滅菌參數(shù),不同設備的FPhy的也可能存在較大差異,如脈動真空滅菌器和水浴滅菌器。建議根據(jù)《歐洲藥典》的要求,選擇物理殺滅時間FPhy將指示劑殺滅到10-1~10-3。 滅菌程序1參數(shù)為:121℃,8min,F(xiàn)Phy值為13min,選擇生物指示劑的D值為1.8min,芽孢數(shù)量為2.0×106cfu/支,可以將指示劑完全殺滅。滅菌程序2參數(shù)為:121℃,10min,F(xiàn)Phy值=15min,能否使用同一批生物指示劑? A:?本批生物指示劑的FBio經(jīng)計算為11.3min,推薦應用于FPhy值在13.1~16.7min之間的滅菌程序。滅菌程序FPhy為13min經(jīng)實驗證實可殺滅該批次生物指示劑;滅菌程序2的參數(shù)為121℃ 10min的殺滅程序符合將指示劑殺滅到10-1~10-3的要求,可以共同使用該批次生物指示劑。Q3

為什么要使用生物指示劑 使用生物指示劑的原因主要基于其獨特的優(yōu)勢和在滅菌效果驗證中的重要性 1. 直接反映微生物殺滅能力 微生物的耐受性差異:不同的微生物對滅菌因子(如高溫、化學消毒劑等)的耐受性不同。生物指示劑通常選用對滅菌因子具有較強抵抗力的特定微生物(如芽孢菌),這些微生物的耐受性接近甚至高于一些致病菌。因此,如果生物指示劑中的微生物被完全殺滅,可以推斷滅菌過程對其他微生物也具有足夠的殺滅能力。 模擬實際滅菌對象:在實際滅菌過程中,待滅菌物品可能攜帶各種微生物,包括一些難以培養(yǎng)或檢測的微生物。生物指示劑提供了一種標準化的微生物樣本,能夠模擬實際滅菌過程中可能存在的微生物情況,從而更準確地評估滅菌效果。 2. 驗證滅菌過程的可靠性 物理參數(shù)的局限性:只依靠物理參數(shù)(如溫度、壓力、時間等)來判斷滅菌效果是不夠的。物理參數(shù)的監(jiān)測只能反映滅菌設備的運行狀態(tài),但無法直接證明微生物是否被完全殺滅。例如,即使溫度和壓力達到設定值,但由于設備故障、物品放置不當或滅菌時間不足等原因,仍可能導致滅菌失敗。生物指示劑能夠直接檢測微生物的存活情況,從而驗證滅菌過程的實際效果。泰林生物指示劑采用高純度芽孢,確保滅菌驗證的準確性。

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環(huán)氧乙烷滅菌生物指示劑芽孢計數(shù)注意事項 1、切勿將生物指示劑進行紫外照射消毒,建議對初級包裝進行擦拭。 2、環(huán)氧乙烷滅菌生物指示劑芽孢計數(shù),建議使用含0.1%聚山梨酯80的無菌純化水進行稀釋。 3、吸取含紙質載體的菌液時,避免纖維堵槍頭,導致移液不準確。 4、建議以單片(支)生物指示劑的形式進行計數(shù),確保每片(支)生物指示劑計數(shù)結果均符合要求。 5、建議使用玻璃珠(4mm-6mm)對紙質載體進行打散處理。 6、芽孢計數(shù)過程中必須進行熱激活處理:溫度80℃-85℃,時間10min。濕熱滅菌參數(shù)達標≠成功!泰林生物驗證才是關鍵保障。TAILIN 生物指示劑系列

泰林生物指示劑的芽孢數(shù)量經(jīng)過嚴格控制,確保每次滅菌驗證的可靠性。干熱滅菌生物指示劑操作流程

生物指示劑D值測定 D值是滅菌驗證的基石,需通過標準方法(存活曲線法)精確測定。 實際應用中需結合Z值、F值等參數(shù),優(yōu)化滅菌工藝。 質量控制包括菌種標準化、設備校準和數(shù)據(jù)追溯,確保結果可靠性。 通過科學測定D值,可確保生物指示劑真實反映滅菌效力,為醫(yī)療、制藥等行業(yè)提供無菌保障。 D值測定方法 1. 存活曲線法(Fractional Negative Method) 適用場景:實驗室標準測定(如ISO 11138、USP要求)。 步驟: 制備生物指示劑: 使用標準菌株(如嗜熱脂肪地芽孢桿菌ATCC 7953),確保初始芽孢量已知(如1×10? CFU/載體)。 設定滅菌條件: 固定溫度/壓力(如121℃蒸汽滅菌),分多組不同時間處理(如2、4、6、8分鐘)。 回收與培養(yǎng): 滅菌后立即用中和劑(如硫代硫酸鈉)終止反應,洗脫芽孢并接種培養(yǎng)。 計數(shù)存活菌落: 統(tǒng)計每組存活菌落數(shù)(CFU),繪制存活曲線(對數(shù)存活量 vs 時間)。干熱滅菌生物指示劑操作流程

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