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四川HE染色公司

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2025-05-01

HE染色不管怎么操作,始終無(wú)法染色或淡染答:這種情況一般因?yàn)榻M織固定時(shí)采用了酸性甲醛;或者組織在甲醛中浸泡時(shí)間太長(zhǎng);或者久置的甲醛變性分解為甲酸。補(bǔ)救:防患于未然,要么使用新鮮的中性甲醛固定,要么在存放的甲醛中加一點(diǎn)碳酸鈉中和甲酸。對(duì)于已經(jīng)固定的組織可考慮再次固定;對(duì)于已經(jīng)制出的片子,染色前采用5%重鉻酸鉀溶液浸泡半小時(shí)以上,然后自來(lái)水漂洗5min,可改善染色。也可以將切片放入3%硫酸鐵銨溶液中,補(bǔ)充染色媒介,增強(qiáng)蘇木素與組織的親和力(蘇木素染色必須要媒介才能染上,單純的蘇木素與組織的親和力很弱)。HE染色(脫蠟、水化、染色、脫水、封片) - 實(shí)驗(yàn)方法。四川HE染色公司

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HE染色法的話(huà),不能準(zhǔn)確說(shuō)出細(xì)胞器的顏色,實(shí)驗(yàn)記錄或考試時(shí)只能說(shuō)染色效果為 :細(xì)胞核藍(lán)色,胞質(zhì)、肌纖維、膠原纖維和紅細(xì)胞呈深淺不一的紅色?;蛘咴敿?xì)說(shuō)明如下:細(xì)胞核被蘇木精染成鮮明的藍(lán)色,軟骨基質(zhì)、鈣鹽顆粒呈深藍(lán)色,粘液呈灰藍(lán)色。細(xì)胞漿被伊紅染成深淺不同的粉紅色至桃紅色,胞漿內(nèi)嗜酸性顆粒呈反光強(qiáng)的鮮紅色。膠原纖維呈淡粉紅色,彈力纖維呈亮粉紅色,紅血球呈橘紅色,蛋白性液體呈粉紅色。蘇木精染液為堿性 ,主要使細(xì)胞核內(nèi)的染色質(zhì)與胞質(zhì)內(nèi)的核糖體著紫藍(lán)色 ;伊紅為酸性染料 ,主要使細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞外基質(zhì)中的成分著紅色。天津?qū)I(yè)的HE染色外包關(guān)于HE染色,常用的結(jié)果分析原理。

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HE染色樣本組織固定與切片:首先將組織樣本進(jìn)行常規(guī)的石蠟包埋。在模具中加入液態(tài)石蠟,將待包埋的組織樣本放入石蠟中,確保組織位置規(guī)整。補(bǔ)充少許液態(tài)的石蠟后,進(jìn)行降溫冷凍,使石蠟變?yōu)楣虘B(tài)達(dá)到組織固定的效果,然后使用石蠟切片機(jī)進(jìn)行切片,厚度在4-8um左右。將切完后的組織切片放入載玻片上使用40℃溫水浸泡使組織充分伸展。組織樣本脫蠟:將待測(cè)組織樣本切片放于二甲苯中,充分浸泡10min,浸泡完后更換二甲苯繼續(xù)浸泡10min,目的是使用二甲苯將切片中的石蠟溶解,這樣可以在進(jìn)行染液染色的時(shí)候,染液可以充分進(jìn)入組織種,同時(shí),二甲苯還可以起到透明的作用,使切片更容易觀察。

HE染色分化作用:染色后,用某些特定的溶液將組織過(guò)多結(jié)合的染色劑脫去,這個(gè)過(guò)程稱(chēng)為分化作用,所用的溶液稱(chēng)為分化液。在HE染色中用0.5%鹽酸乙醇作為分化液,因酸能破壞蘇木精的醌型結(jié)構(gòu),使組織與色素分離而褪色。經(jīng)蘇木精染色后,必須用0.5%鹽酸乙醇分化,使細(xì)胞核過(guò)多結(jié)合的蘇木精染料和細(xì)胞漿吸附的蘇木精染料脫去,在進(jìn)行伊紅染色,才能保證細(xì)胞核與細(xì)胞漿染色的分明。因此,在HE染色中分化是極為關(guān)鍵的一步。返藍(lán)作用:分化之后,蘇木精在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),呈紅色,在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài),呈藍(lán)色。組織切片經(jīng)0.5%鹽酸乙醇分化后呈紅色或粉紅色,故分化之后,立即用水出去組織切片上的酸而終止分化,再用弱堿性水(0.2%氨水)使蘇木精染上的細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色,這個(gè)過(guò)程稱(chēng)為返藍(lán)作用或藍(lán)化作用。另外用自來(lái)水浸洗也可使細(xì)胞核返藍(lán),但所需時(shí)間較長(zhǎng)。HE染色小攻略技巧分析。

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HE染色在**染色中的應(yīng)用,小細(xì)胞肺*是肺*中分化程度比較低、惡性程度比較高的一種惡性**,生長(zhǎng)迅速,轉(zhuǎn)移較早,五年存活率*為1%-2%,預(yù)后非常差。其小細(xì)胞肺***細(xì)胞HE染色的特征,主要表現(xiàn)為組織結(jié)構(gòu),包括巢狀、小梁狀、實(shí)性片狀,常有菊形團(tuán)形成,*巢周?chē)牧黾?xì)胞呈柵欄狀排列,*細(xì)胞較小,一般小于三個(gè)靜止的淋巴細(xì)胞,呈圓形、卵圓形或短梭形,胞質(zhì)稀少,胞界不清,核染色質(zhì)呈細(xì)顆粒狀,核仁缺乏或不明顯,核分裂象每十個(gè)高倍視野大于十一個(gè),常見(jiàn)大片狀壞死。專(zhuān)業(yè)的HE染色服務(wù)平臺(tái),南京英瀚斯生物。新疆專(zhuān)業(yè)的HE染色外包

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HE染色原理:易于被堿性或酸性染料著色的性質(zhì)稱(chēng)為嗜堿性(basophilia)和嗜酸性(acidophilia);而對(duì)堿性染料和酸性染料親和力都比較弱的現(xiàn)象稱(chēng)為中性(neutrophilia)。構(gòu)成組織內(nèi)蛋白質(zhì)的氨基酸的種類(lèi)很多,它們有不同的等電點(diǎn)。在普通染色法中,染色液的酸堿度為pH6左右,細(xì)胞內(nèi)的酸性物質(zhì)如細(xì)胞核的染色質(zhì)、腺細(xì)胞和神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及透明軟骨基質(zhì)等均被堿性染料染色,這些物質(zhì)稱(chēng)為嗜堿性。而細(xì)胞質(zhì)中的其它蛋白質(zhì)如紅細(xì)胞中的血紅蛋白、嗜酸粒細(xì)胞的顆粒及膠原纖維和肌纖維等被酸性染料染色,這些物質(zhì)稱(chēng)為嗜酸型。如果改變?nèi)旧旱乃釅A度,pH值升高時(shí),則原來(lái)被酸性染料染色的物質(zhì)可變?yōu)槭葔A性;pH值降低時(shí),原來(lái)被堿性染料染色的物質(zhì)則可變?yōu)槭人嵝?。所以說(shuō)染色液的pH值可以影響染色的反應(yīng)。脫氧核糖核酸(DNA)兩條鏈上的磷酸基向外,帶負(fù)電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵結(jié)合而被染色。蘇木精在堿性溶液中呈藍(lán)色,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。四川HE染色公司

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