外泌體的分離對(duì)于理解它們的作用機(jī)制和它們在生物醫(yī)學(xué)科學(xué)中的應(yīng)用是至關(guān)重要的。一些實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)成功地利用諸如超離心法、超濾法、層析法、基于聚合物的沉淀法和抗體偶聯(lián)磁珠的親和捕獲等技術(shù)分離外泌體。已有研究表明，密度梯度離心法可以分離出比較純凈的外泌體。1983年外泌體初次于綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞中被發(fā)現(xiàn)，但人們一直認(rèn)為它只是一種細(xì)胞的廢棄物。然而比較近幾年，人們發(fā)現(xiàn)這種微小膜泡中含有細(xì)胞特異的蛋白、脂質(zhì)和核酸，能作為信號(hào)分子傳遞給其他細(xì)胞從而改變其他細(xì)胞的功能。這些發(fā)現(xiàn)點(diǎn)燃了人們對(duì)細(xì)胞分泌膜泡的興趣。比較近的研究發(fā)現(xiàn)外泌體在很多生理病理上起著重要的作用。國自然研究熱點(diǎn)—外泌體研究-南京英瀚斯。安徽推薦的外泌體實(shí)驗(yàn)

外泌體的產(chǎn)生過程為：細(xì)胞膜內(nèi)陷，形成內(nèi)體（endosome），再形成多泡體（multivesicularbodies，MVB），比較后分泌到胞外成為外泌體。外泌體中攜帶有母細(xì)胞的多種蛋白質(zhì)、脂類、DNA和RNA等重要信息。外泌體比較早見于1981年，EGTrams等在體外培養(yǎng)的綿羊紅細(xì)胞上清液中發(fā)現(xiàn)了有膜結(jié)構(gòu)的小囊泡，并命名為exosome。對(duì)于外泌體的作用，當(dāng)時(shí)推測為細(xì)胞排泄廢物的一種方式。1996年GRaposo等發(fā)現(xiàn)類似于B淋巴細(xì)胞的免疫細(xì)胞也會(huì)分泌抗原呈遞外泌體（antigenpresentingvesicle），所分泌的外泌體可以直接刺激效應(yīng)CD4+細(xì)胞的抗**反應(yīng)。2007年HValadi等進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)細(xì)胞之間可以通過外泌體中RNA交換遺傳物質(zhì)。隨著有關(guān)外泌體研究越來越多，研究者發(fā)現(xiàn)它普遍參與了機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原呈遞、細(xì)胞分化、**生長于侵襲等各種生物過程中。安徽比較好的外泌體粒徑分析外泌體在分泌細(xì)胞和受體細(xì)胞間的穿梭介導(dǎo)了細(xì)胞間的生物分子傳遞。

外泌存在于人類的生殖，妊娠和胚胎發(fā)育需要精細(xì)/動(dòng)態(tài)的細(xì)胞間通信。**、羊水、血液和母乳都含有具有假定功能的外泌體。精漿外泌體與精子成熟有關(guān)。分子譜顯示，microRNAslet-7a,let-7b,miR-148a,miR-375和miR-99a富集于來自多個(gè)人類捐贈(zèng)者的精漿來源外泌體中，這些miRNA與白細(xì)胞介素(IL-10和IL-13)的表達(dá)有關(guān)，提高了外泌體在生殖道常駐免疫中發(fā)揮作用的可能性。精漿來源的外泌體也能抑制HIV-1***，可能是通過阻斷HIV早期蛋白轉(zhuǎn)錄***劑(Tat)的招募和HIV-1的后續(xù)轉(zhuǎn)錄。

外泌體中發(fā)現(xiàn)了一種特定的內(nèi)泌體蛋白質(zhì)亞群，表明外泌體發(fā)育過程中存在分選機(jī)制。轉(zhuǎn)運(yùn)所需的內(nèi)體分選復(fù)合物(ESCRT)被普遍 認(rèn)為是調(diào)控和引導(dǎo)特定分子進(jìn)入MVBs腔內(nèi)囊泡的途徑。ESCRT，其4個(gè)主要復(fù)合物(ESCRT0,I,II，和III)負(fù)責(zé)傳遞用于溶酶體降解和蛋白質(zhì)回收的泛素化蛋白。比較近的研究表明，特異性ESCRT家族蛋白的缺失可以改變外泌體的蛋白質(zhì)含量和細(xì)胞釋放外泌體的速率。更有趣的是，ESCRT系統(tǒng)的組件，如TSG101和Alix，被發(fā)現(xiàn)富集于外泌體，因此被用作外泌體鑒定的標(biāo)記物。實(shí)驗(yàn)外包、外泌體檢測服務(wù)、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)外包、分子實(shí)驗(yàn)外包。

外泌體參與了機(jī)體不同的生理和病理過程，并對(duì)細(xì)胞活動(dòng)發(fā)揮重要的調(diào)控作用，如免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、**侵襲等。且外泌體具有細(xì)胞類型特異性，即不同細(xì)胞分泌的外泌體的組成成分和功能不同，這使得外泌體具有成為多種疾病早期診斷標(biāo)志物的潛力。此外，外泌體在作為基因和藥物運(yùn)載、**和**生物學(xué)等方面也已經(jīng)成為研究熱點(diǎn)。外泌體存在于人類或動(dòng)物的各種體液中，如細(xì)胞培養(yǎng)上清、血液、尿液等，我們可以選擇不同的樣本來源進(jìn)行相關(guān)的外泌體研究。不同的實(shí)驗(yàn)樣本采集時(shí)需要注意的地方不一樣，如細(xì)胞培養(yǎng)上清在收集樣本前需換成無外泌體血清或者無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)，以降低背景值的干擾。外泌體(Exosomes)鑒定+外泌體示蹤方法 南京英瀚斯生物。安徽推薦的外泌體實(shí)驗(yàn)

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外泌體和微囊泡的區(qū)別在于其生成的方式不同。從晚期內(nèi)體來源產(chǎn)生的細(xì)胞外囊泡稱為外泌體，從細(xì)胞膜直接出芽產(chǎn)生的細(xì)胞外囊泡稱為微囊泡。二者的大小也有所不同，外泌體的粒子直徑在40~100nm范圍，微囊泡的粒子直徑在100~1,000nm，但有報(bào)道發(fā)現(xiàn)也存在直徑較小的微囊泡，所以無法明確從粒子大小來區(qū)分二者。外泌體是健康細(xì)胞和*細(xì)胞均可釋放的小膜泡，***存在于人體的血液、乳汁、尿液以及唾液等多種體液中，其種類和數(shù)量與機(jī)體的生理狀態(tài)息息相關(guān)。安徽推薦的外泌體實(shí)驗(yàn)