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遼寧CD63外泌體慢病毒包裝

來源: 發(fā)布時間:2023-11-19

細胞分泌到細胞外環(huán)境中分別稱為外泌體和微泡的細胞外膜泡是內(nèi)源性和質(zhì)膜起源的不同類型的膜囊泡。這些細胞外囊泡(EVs)表示了細胞間通訊的一個重要模式,作為膜和細胞溶質(zhì)蛋白、脂質(zhì)和RNA細胞之間傳遞的載體。然而,我們對于EV形成的分子機制知識的缺乏以及缺乏干擾貨物包裝或囊泡釋放的方法仍然妨礙了其在體內(nèi)生理相關(guān)性的探索。這篇綜述專注于EV的特性和目前提出的形成、定位和功能的機制。該綜述描述了將外泌體定義為特定的分泌囊泡群體的物理性質(zhì),總結(jié)了其生物學(xué)效應(yīng),特別是免疫系統(tǒng),討論了分泌囊泡可能作為細胞間信使的潛在作用。細胞表面受體表達不同,外泌體對受體細胞的影響可能不同,可能誘導(dǎo)細胞存活,也可能誘導(dǎo)凋亡或免疫調(diào)節(jié)等。遼寧CD63外泌體慢病毒包裝

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肺病細胞來源外泌體(LCC-exosome)可以通過刺激種瘤血管的形成來促進種瘤的生長。據(jù)相關(guān)報道稱,LCC-exosome中的miR-210可以通過調(diào)節(jié)基質(zhì)細胞中酪氨酸受體激酶A3的含量,促進種瘤血管的生成;而LCC-exosome中的miR-23a則可以通過開啟脯氨酰羥化酶及壓制緊密結(jié)合蛋白ZO-1來促進肺病的生血管作用。此外,有研究發(fā)現(xiàn),外泌體中的內(nèi)容物可以觸發(fā)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)。晚期肺病患者血清中外泌體波形蛋白表達增加,促使人正常支氣管上皮細胞出現(xiàn)EMT,從而使肺支氣管正常上皮細胞出現(xiàn)增殖,遷移能力??茖W(xué)家也嘗試利用外泌體的壓制發(fā)病機制功能。血漿提取試劑盒應(yīng)用細胞分泌到細胞外環(huán)境中分別稱為外泌體和微泡的細胞外膜泡。

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事實上,動物實驗表明:在小鼠急性心肌梗塞術(shù)后,注射來源于間充質(zhì)干細胞、心臟祖細胞、胚胎干細胞或心肌源性細胞的外泌體均可改善心臟功能,減輕心臟纖維化,刺激血管生成。例如,心源性細胞外泌體能通過特異性的巨噬細胞極化為急性心肌梗死提供心臟保護作用。心臟再灌注后,CDCexo的輸注降低了大鼠和豬心肌梗死模型的梗死面積,而且CDCexo會減少梗死組織內(nèi)CD68+巨噬細胞數(shù)量,并改變巨噬細胞的極化狀態(tài)。自體CD34+干細胞的移植可以改善缺血組織再灌注后的功能,并降低嚴重肢體缺血患者的截肢率。其作用機制在于:CD34+干細胞分泌的外泌體促進小鼠下肢缺血模型血管生成。雖然臨床前研究的證據(jù)表明干細胞釋放的外泌體可以作為心肌修復(fù)的潛在無細胞治理劑,但是,目前將外泌體完全用作心臟修復(fù)治理劑之前還是有很多重點問題需要解決。

目前市面上開發(fā)的外泌體提取試劑盒,是根據(jù)外泌體表面由類似于細胞膜的脂質(zhì)雙分子層具有一定疏水性這一特性,用試劑捆綁水分子,從而可通過常規(guī)離心收集沉淀獲取外泌體。這種快速提取外泌體的方法雖簡便快捷、樣本需求少、對設(shè)備要求低,但與差速離心方法類似,其分離得到的沉淀包含其他細胞分泌的囊泡,且血清中含有大量血清蛋白分子,成分復(fù)雜,很可能摻雜一些未知的疏水大分子物質(zhì)。Sabapatha等曾根據(jù)來源于胎盤的外泌體表面特異表達這一特性,使用耦合到磁珠的抗抗體,采用磁珠分選方法分離血漿中胎盤來源外泌體。此法可以提取的胎盤外泌體量少,不適用于大規(guī)模提取制備,且免疫磁珠價格昂貴,不利于提取技術(shù)的普及。外泌體作為細胞間信號傳導(dǎo)的通訊工具和作為病等各種疾病的生物標記話題比較熱門。

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基于免疫細胞來源的外泌體能夠介導(dǎo)和調(diào)節(jié)機體對中流的免疫反應(yīng),外泌體在中流免疫zhiliao方面的潛力受到廣fan關(guān)注。其中樹枝狀細胞產(chǎn)生的外泌體包含大量的MHC-多肽復(fù)合物和免疫刺激相關(guān)的分子,能夠激huo相關(guān)的T細胞,介導(dǎo)體內(nèi)抗中流應(yīng)答,在多個臨床試驗中表現(xiàn)出良好的抗中流療效。Morse等考察了樹枝狀細胞外泌體對非小細胞肺ai患者的療效。結(jié)果表明,患者對樹枝狀細胞外泌體耐受性良好,1/3患者表現(xiàn)出了對樹枝狀細胞外泌體的T細胞響應(yīng),2/4患者自然殺傷細胞活性得以激huo。外泌體能向病變細胞輸送功能性物質(zhì),所以有很大潛力作為基因和藥物遞送的載體。外泌體形成過程

神經(jīng)細胞來源的外泌體含有與神經(jīng)退行性疾病相關(guān)的分子。遼寧CD63外泌體慢病毒包裝

目前,提取外泌體的方法主要有超速離心法、PEG沉淀法,但這些方法混有非常多的雜質(zhì),必須慎重分析得到的是否是外泌體。超速離心法存在操作繁雜、回收量不穩(wěn)定,不能用于定量分析、必須使用昂貴的超速離心機、無法進行多樣品分析等問題。因此外泌體研究相對困難,需要盡快開發(fā)操作簡單、可提取高純度外泌體的技術(shù)。因此,日本和光著眼于巨噬細胞的外泌體受體Tim4蛋白,制備Tim4細胞外域與磁珠結(jié)合的“Tim4磁珠”。Tim4通過磷酯酰絲氨酸(PS)法特異性結(jié)合Tim4蛋白和磁珠,再經(jīng)過含有EDTA的洗脫緩沖液進行分離,提取高純度的完整外泌體。遼寧CD63外泌體慢病毒包裝

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