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醫(yī)療檢測用數(shù)字ELISA快速檢測

來源: 發(fā)布時(shí)間:2025-07-12

芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,每個(gè)生物/醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測;

單分子的檢測原理:由Simoa數(shù)字免疫分析法實(shí)現(xiàn)的超靈敏度已在先前討論過。簡而言之,類似免疫分析中的酶-底物反應(yīng)是在相對較大的反應(yīng)體積(50-100μL)中進(jìn)行的,在信號生成步驟中稀釋了產(chǎn)物分子。信號分子的擴(kuò)散和稀釋將靈敏度限制在皮摩爾范圍內(nèi)。相比之下,Simoa通過將單獨(dú)標(biāo)記的免疫復(fù)合物和底物限制在飛升大小的孔中,從而限制了熒光產(chǎn)物分子從酶-底物反應(yīng)中的擴(kuò)散。當(dāng)單一酶標(biāo)簽催化底物轉(zhuǎn)化為熒光產(chǎn)物時(shí),產(chǎn)生的熒光團(tuán)被限制在孔中,從而在短時(shí)間內(nèi)產(chǎn)生可測量的熒光信號。 數(shù)字化ELISA芯片,幫您數(shù)字化高靈敏檢測,且微量樣本多重指標(biāo)檢測;醫(yī)療檢測用數(shù)字ELISA快速檢測

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陣列芯片原理:從15μLof基質(zhì)中的500,000個(gè)珠子開始。結(jié)果表明,陣列圖像的定量分析大約一半的孔在珠子沉降幾分鐘后被占據(jù)。對于SimoaHD-1分析儀,沉降時(shí)間減少到90秒,分布在三個(gè)儀器處理周期之間。隨著珠子重新沉降到陣列中,儀器對其他操作(密封和成像)進(jìn)行索引,這些操作已經(jīng)加載到陣列上。通常,會檢測25,000-50,000個(gè)珠子。由于Simoa中的測量單位(AEB)是一個(gè)比率,一定珠裝載量的差異不影響數(shù)據(jù)質(zhì)量或在大多的范圍內(nèi)保持精度,前提是存在足夠的珠子數(shù)量以保持在泊松噪聲水平之上。22數(shù)據(jù)質(zhì)量會受到影響,當(dāng)泊松噪聲主導(dǎo)測量誤差時(shí)。這發(fā)生在與背景相關(guān)的正井?dāng)?shù)量降至約50個(gè)珠子以下時(shí),此時(shí)泊松噪聲明顯影響測量的變異系數(shù)(CV)。 陣列單分子數(shù)字ELISA購買靈活芯棄疾JX-8B單分子ELISA檢測產(chǎn)品,微量樣本可同時(shí)測2-4個(gè)指標(biāo);!

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   芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA產(chǎn)品每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測SiMoA通過將單個(gè)酶產(chǎn)生的熒光團(tuán)限制在極小范圍內(nèi),從而能夠檢測到非常低濃度的酶標(biāo)記物體積(~50fL),導(dǎo)致熒光產(chǎn)物分子的局部高濃度。為了在免疫測定中實(shí)現(xiàn)這種定位,在第二步中,將珠子加載到一個(gè)陣列為離散的微升大小的孔(圖1C)。本研究中使用的2毫米寬陣列有~50,000個(gè)孔,孔徑為μm,孔深為μm。加載后的陣列在含有熒光酶底物液滴的情況下,用橡膠密封圈密封。Rissin等人,第3頁將每個(gè)微球隔離在飛升反應(yīng)室中。具有單一酶的微球標(biāo)記的免疫復(fù)合物在50飛升的反應(yīng)室中產(chǎn)生局部高濃度的熒光產(chǎn)物(圖1D)。通過使用標(biāo)準(zhǔn)顯微鏡光學(xué)系統(tǒng)獲取陣列的時(shí)間變化熒光圖像,可以區(qū)分與單一酶分子相關(guān)的微球(“開啟”孔)和不與酶相關(guān)的微球(“關(guān)閉”孔);顯示了“開啟”和“關(guān)閉”孔的熒光直方圖。成像陣列可以成千上萬的單個(gè)免疫復(fù)合物同時(shí)檢測。通過測定供試品中的蛋白質(zhì)濃度來確定計(jì)算含有珠子和熒光產(chǎn)物的孔數(shù)相對于含有珠子的孔數(shù)。使用SiMoA,濃度是因此,我們稱SiMoA應(yīng)用于檢測單個(gè)免疫復(fù)合物為數(shù)字ELISA。

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參考的其他高靈敏檢測方法:

兩種更多測試的模擬分析信號放大技術(shù)是免疫PCR和生物條形碼分析。免疫PCR通過將檢測抗體標(biāo)記為DNA分子,然后使用PCR進(jìn)行擴(kuò)增和定量,從而提高靈敏度。生物條形碼分析利用了與DNA“條形碼”標(biāo)記的抗分析物納米顆粒,這些納米顆粒在與捕獲在金微粒上的分析物結(jié)合后,從納米顆粒上脫雜以進(jìn)行定量。這兩種方法相對于傳統(tǒng)免疫分析法的靈敏度提高了10到100倍,但尚未整合到所需的全自動系統(tǒng)中,也未用于多重分析。為了比較大限度地加速藥物發(fā)現(xiàn)、驗(yàn)證新型生物標(biāo)志物并將分子水平診斷引入臨床主流,需要一種具有高效率、高質(zhì)量數(shù)據(jù)和成本效益的穩(wěn)健、多重超靈敏蛋白質(zhì)檢測技術(shù)。 超多重檢測芯片在普查中篩選高特異性標(biāo)記物組合,提升早期診斷準(zhǔn)確性。

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每個(gè)生物實(shí)驗(yàn)室都用得起的單分子免疫檢測

為了證明檢測極低濃度的可能診斷價(jià)值使用數(shù)字ELISA檢測血液中的蛋白質(zhì),對接受治理性前列腺切除術(shù)(RP)的患者血清樣本中的PSA進(jìn)行了測量。PSA是前列腺病的血清生物標(biāo)志物病癥既用作篩查工具,也用于監(jiān)測住院患者的復(fù)發(fā)接受治理性前列腺切除術(shù)28。治理性前列腺切除術(shù)后,絕大多數(shù)PSA被消除,水平低于標(biāo)準(zhǔn)商用檢測方法的檢測限(3pM或0.1ng/mL)。定期監(jiān)測這些患者的PSA恢復(fù)情況可以檢測前列腺病的復(fù)發(fā),但術(shù)后幾年內(nèi)生化復(fù)發(fā)可能不會被發(fā)現(xiàn)。 5)數(shù)字化高敏ELISA芯片試劑盒,微量樣本可同時(shí)測2-4個(gè)指標(biāo);單分子級別數(shù)字ELISA微量樣本

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抗體配對篩選的成本與效率優(yōu)化,抗體篩選芯片通過高密度檢測區(qū)設(shè)計(jì)與微量樣本技術(shù),大幅降低抗體開發(fā)的時(shí)間與物料成本。傳統(tǒng)方法中,49種抗體配對需多次實(shí)驗(yàn),耗時(shí)數(shù)天且消耗數(shù)百微升樣本;而芯片技術(shù)*需1小時(shí)、5μl樣本即可完成初步篩選,成本降低70%以上。其單通道多指標(biāo)并行檢測能力,支持不同反應(yīng)條件(如pH、溫度)的同步測試,快速篩選出比較好配對組合。在**標(biāo)志物抗體開發(fā)中,該芯片可同時(shí)評估親和力、特異性與交叉反應(yīng)性,加速診斷試劑盒的研發(fā)進(jìn)程,尤其適合初創(chuàng)企業(yè)與科研機(jī)構(gòu)的高效篩選需求,推動抗體工程從試錯(cuò)性實(shí)驗(yàn)向精細(xì)化篩選轉(zhuǎn)型。醫(yī)療檢測用數(shù)字ELISA快速檢測

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