Leibovitz’sL-15培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)由磷酸鹽和游離堿基氨基酸組成，代替了傳統(tǒng)的碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)，同時，用半乳糖和**酸鈉代替葡萄糖可以防止酸性代謝副產(chǎn)物的形成，有助于維持培養(yǎng)液PH的穩(wěn)定，適合用于非CO2平衡環(huán)境的細(xì)胞培養(yǎng)。Leibovitz’sL-15培養(yǎng)基適用于猴腎細(xì)胞和HEP-2的培養(yǎng)、原代（如胚胎和成人組織）細(xì)胞分離、多種病毒的培養(yǎng)以及神經(jīng)元的培養(yǎng)等。NEAA（非必須氨基酸），是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天（門）冬酰胺、L-天（門）冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA，能降低細(xì)胞培養(yǎng)時細(xì)胞自身生產(chǎn)非必須氨基酸的副作用，有效促進(jìn)細(xì)胞增殖代謝。酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑，用以持續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)液的酸堿度，在低PH值時酚紅使培養(yǎng)液呈黃色，而較高的PH值時使培養(yǎng)液呈紫色，PH值～，適合細(xì)胞培養(yǎng)。但酚紅也有一些缺點，研究表明酚紅可以模擬固醇類（特別是雌）的作用，因此在用到雌敏感的細(xì)胞時（如乳腺組織），較好使用不含酚紅的培養(yǎng)基。酚紅會干擾流式細(xì)胞分析時候的檢測。此外，一些無血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀平衡。 Dulbecco’s 改良培養(yǎng)基增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及**酸鈉。iclean細(xì)胞培養(yǎng)基全國發(fā)貨

    培養(yǎng)液的滲透壓是一個非常重要的因素,細(xì)胞通?？赡褪?60mOsm/kg～320mOsm/kg。標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)液的滲透壓在此范圍內(nèi)波動。特別注意：向培養(yǎng)液中加入其它物質(zhì)有可能會明顯改變培養(yǎng)液的滲透壓，特別是溶于強(qiáng)酸或強(qiáng)堿中的物質(zhì)。向培養(yǎng)液中添加HEPES時需按以下方法調(diào)節(jié)鈉離子濃度。緩沖系統(tǒng)大多數(shù)細(xì)胞所需pH在-。但是，細(xì)胞培養(yǎng)適pH值隨培養(yǎng)的細(xì)胞種類不同而不同。成纖維細(xì)胞喜歡較高pH(-),而傳代轉(zhuǎn)化細(xì)胞系則需要偏酸pH(-)。由于多數(shù)培養(yǎng)液靠碳酸氫鈉（NaHCO3）與CO2體系進(jìn)行緩沖，因此，氣相中的CO2濃度應(yīng)與培養(yǎng)液中碳酸氫鈉濃度相平衡。如果氣相或培養(yǎng)箱空氣中CO2濃度設(shè)定在5％，培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為；如果CO2濃度維持在10％，培養(yǎng)液中NaHCO3的加入量為。細(xì)胞培養(yǎng)瓶蓋不應(yīng)擰得太緊，以保證氣體交換。HEPES是一種非離子緩沖液，在pH-范圍內(nèi)具有較好的緩沖能力，但是非常昂貴，在高濃度時對一些細(xì)胞可能有毒。HEPES緩沖液可與低水平的碳酸鈉（）共用，以抵消因額外加入HEPES引起的滲透壓增加。在這種培養(yǎng)條件下，細(xì)胞培養(yǎng)瓶的蓋子應(yīng)擰緊，以防止培養(yǎng)液中所需的少量碳酸鹽散入空氣中。大多數(shù)培養(yǎng)液中含有酚紅作為pH指示劑，酸性培養(yǎng)液呈橙黃色，堿性培養(yǎng)液呈深紅色。安徽RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基廠家McCoy’s5A培養(yǎng)基是改良的Basal Medium5A，McCoy’s 5A含有還原型谷胱甘肽、細(xì)菌蛋白胨以及高濃度的葡萄糖。

    細(xì)胞培養(yǎng)基的種類按照細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史，細(xì)胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基、無血清細(xì)胞培養(yǎng)基、限定化學(xué)成分細(xì)胞培養(yǎng)基等幾大種類。（balancedsaltsolution，BSS）BSS主要是由無機(jī)鹽、葡萄糖組成，它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡，保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng)。其主要用于細(xì)胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下（表1-1）。D-Hank's與Hank's的一個主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細(xì)胞膜的重要組成成份，參與細(xì)胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免細(xì)胞結(jié)團(tuán)。此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基礎(chǔ)溶液，前者緩沖能力較弱，適合于密閉培養(yǎng)；后者緩沖能力較強(qiáng)，適合于5%CO2的培養(yǎng)條件。表1-1幾種常用的BSS配方。

    成分說明：貨號L-谷氨酰胺L-丙氨酰-L-谷氨酰葡萄糖HEPES酚紅雙抗HCY-BCM07001★★★HCY-BCM07001A★★★★HCY-BCM07002★★★★HCY-BCM07002A★★★★★HCY-BCM07003★★★HCY-BCM07004★★HCY-BCM07005★★★HCY-BCM07006★★★★HCY-BCM07007★★HCY-BCM07008★★★HCY-BCM07009★★HCY-BCM07010★HCY-BCM07011★★HCY-BCM07012★★★HCY-BCM07013★★HCY-BCM07014★HCY-BCM07015★★HCY-BCM07016★★★HCY-BCM07017★HCY-BCM07018★★HCY-BCM07019★HCY-BCM07020HCY-BCM07021★★HCY-BCM07022★HCY-BCM07023ATCC改良HCY-BCM07024Dutch改良HCY-BCM07025不含葉酸HCY-BCM07026不含蛋氨酸不含葡萄糖不含酚紅HCY-BCM07027SILACRPMI-1640FlexHCY-BCM07028SILACRPMI-1640RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基L-谷氨酰胺（Glutamine）是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素，但其在溶液中不穩(wěn)定，會自發(fā)降解，不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基，可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量，在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細(xì)胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺（Alanyl-glutamine，Ala-Glu），又名丙氨酰谷氨酰胺、丙谷二肽，是一種高級細(xì)胞培養(yǎng)添加劑，可直接替代細(xì)胞培養(yǎng)基中的L-谷氨酰胺。McCoy’s 5A常用于多種類型的原代細(xì)胞的培養(yǎng)，如骨髓、皮膚、牙齦、腎、脾、肺、大鼠胚胎、網(wǎng)膜等。

    Dulbecco’s改良培養(yǎng)基–DMEM（Dulbecco’sModifiedEagleMedium）是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的，與MEM培養(yǎng)基相比，氨基酸的含量增加了2倍，維生素的含量增加了4倍，同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子等。DMEM培養(yǎng)基**初設(shè)計葡萄糖含量為1000mg/L（低糖型），后來又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L（高糖型），現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng)。高糖型培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于生長快、粘附性低的細(xì)胞、雜交瘤的骨髓瘤細(xì)胞、克隆細(xì)胞、DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞、各種原代病毒宿主細(xì)胞、單一細(xì)胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產(chǎn)，例如利用CHO細(xì)胞表達(dá)EPO和生產(chǎn)乙肝疫苗。低糖培養(yǎng)基更適合代謝作用較慢、依賴性貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。不含葡萄糖的培養(yǎng)基可以根據(jù)研究需要，隨意調(diào)節(jié)葡萄糖的濃度，方便快捷。L-谷氨酰胺（Glutamine）是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素，但其在溶液中不穩(wěn)定，會自發(fā)降解，不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基，可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量，在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細(xì)胞的生長。 Ham’s F-12常作為無血清培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)液，在低血清含量下時，特別適合單細(xì)胞培養(yǎng)和克隆化培養(yǎng)。安徽RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基廠家

Leibovitz’s L-15培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)由磷酸鹽和游離堿基氨基酸組成，代替了傳統(tǒng)的碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng)。iclean細(xì)胞培養(yǎng)基全國發(fā)貨

DMEM，即 Dulbecco 改良的 Eagle 培養(yǎng)基，在細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域占據(jù)著極為重要的地位。它源于經(jīng)典的 Eagle 培養(yǎng)基，經(jīng)科學(xué)家 Dulbecco 改良優(yōu)化后，煥發(fā)出全新活力。DMEM 培養(yǎng)基成分豐富，氨基酸濃度是原始 Eagle 培養(yǎng)基的兩倍，還涵蓋了非必需氨基酸，為細(xì)胞蛋白質(zhì)合成筑牢根基。其維生素含量亦是 Eagle 培養(yǎng)基的四倍之多，積極參與細(xì)胞內(nèi)各類代謝反應(yīng)，助力細(xì)胞維持正常生理功能。同時，培養(yǎng)基中包含酸，這一糖酵解途徑的關(guān)鍵物質(zhì)，在細(xì)胞能量供應(yīng)方面發(fā)揮著重要作用，時刻為細(xì)胞的生命活動提供動力支持。iclean細(xì)胞培養(yǎng)基全國發(fā)貨

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