CCK8的優(yōu)點：方法方便，不用洗滌細(xì)胞，不需要放射性同位素和有機溶劑；CCK-8快速檢測；CCK-8檢測靈敏度高，細(xì)胞密度低也可以檢測；CCK-8的重復(fù)性優(yōu)于MTT法；CCK-8對細(xì)胞的毒性很小；CCK-8細(xì)胞活性檢測試劑中是1瓶溶液，不需要現(xiàn)用現(xiàn)配，即開即用。CCK8的缺點：相比于與MTT法，CCK8的價格比較昂貴生成的甲瓚物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比。因此可利用這一特性直接進(jìn)行細(xì)胞增殖和毒性分析。用途：***篩選、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定、**藥敏試驗。代謝率低了以后，細(xì)胞呼吸減弱，NAD+產(chǎn)生減少，測出的Formazan也會減少。上海dojindo cck8說明書

沒有做過MTT實驗，但其實原理及目的都是一樣的（反應(yīng)機理不一樣）。都說CCK8簡單點而且數(shù)據(jù)更穩(wěn)定，所以就用了這個試劑盒。CCK8的說明書大家一定要認(rèn)真閱讀，里面很多細(xì)節(jié)的問題都有提到。而且說明書里提供的一些關(guān)于各種細(xì)胞的種板數(shù)都很有參考價值，因為那是反復(fù)驗證過的比較好數(shù)值。但無論如何，做這個試驗一定要摸條件。你就算再懶，這個懶不得，否則你都只是在做無用功。以下言論全部以細(xì)胞毒性試驗為前提，如果你做的是促進(jìn)細(xì)胞生長的***的藥效實驗?zāi)蔷土懋?dāng)別論了。北京cck8 odMTT與CCK8區(qū)別是什么?

CCK-8的原理

所以粗略的可以認(rèn)為生成的甲瓚物的顏色的深淺與活細(xì)胞的數(shù)量成正比。為什么是粗略的呢，因為這里沒有考慮到細(xì)胞代謝水平的高低，有些細(xì)胞在***處理后，可能活細(xì)胞數(shù)不變，但是代謝率低了以后，細(xì)胞呼吸減弱，NAD+產(chǎn)生減少，測出的Formazan也會減少，所以此時怎么算呢（此時我就比較懷戀中性紅了）？當(dāng)然也有解決的辦法，下期給大家介紹。因此可利用這個原理進(jìn)行細(xì)胞增殖和毒性分析，在吸光度為450時檢測讀數(shù)。用途及常用的公

讀數(shù)前可在搖床上溫柔混勻，酶標(biāo)儀在 450nm 波長處檢測每孔的吸光度。

***率（％）= [（對照孔吸光度-實驗孔吸光度）/（對照孔吸光度-空白孔吸光度）]×100=IC50

注意事項

CCK8法檢測細(xì)胞生長情況基于的原理是脫氫酶催化的反應(yīng)，如果實驗處理條件中存在還原劑的影響，應(yīng)事先去除。如果實驗條件中存在還原物質(zhì)，需單獨測定還原物質(zhì)的空白吸光度。如果還原物質(zhì)的吸光度很小，可以忽略不計；但如果吸光度很大，則需要去除培養(yǎng)基，再用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞3次，然后再加入新的 100ul培養(yǎng)基和10ul CCK-8 溶液進(jìn)行檢測。 細(xì)胞毒性測定：這個可以和各個處理因素對細(xì)胞活性和增殖的影響，比如低氧或者什么化學(xué)物品對細(xì)胞的影響上。

CCK-8盒子的選購還記得***次做CCK-8的實驗時研究生二年級的時候，當(dāng)時用的***個盒子是Sigma的，當(dāng)時的Sigma-Aldrich就是Sigma-Aldrich，還不是現(xiàn)在的Millipore-Sigma。那個盒子給了我莫大的鼓勵，因為在那之前做分子克隆一直都不是很順利。這個盒子是我的碩士老板從美國帶回來的，品質(zhì)有保證，***的結(jié)果也是很好的。后面在做CCK-8的實驗時，我們在有選擇的情況下都會買sigma，下圖2是sigma官網(wǎng)的截圖。其實也不貴，只是到貨時間太慢。不同的種板數(shù)對檢測***的IC50影響大嗎？江蘇cck8數(shù)據(jù)作圖

換液的意思是將cck8加在培養(yǎng)基中以換液的形式加在孔板中避免氣泡產(chǎn)生。上海dojindo cck8說明書

。一般情況下，**外一圈的孔只加培養(yǎng)基，不作為測定孔用。在培養(yǎng)基中加入CCK8，培養(yǎng)一定的時間，測定450 nm的吸光度即為空白對照。在做加藥實驗時，還應(yīng)考慮***的吸收，可在加入***的培養(yǎng)基中加入CCK8，培養(yǎng)一定的時間，測定450 nm的吸光度作為空白對照。金屬對CCK-8顯色有影響：當(dāng)終濃度為1mM的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會***5%、15%、90%的顯色反應(yīng)，使靈敏度降級。如果終濃度是10 mM的話，將會*****。懸浮細(xì)胞由于染色比較困難，一般需要增加細(xì)胞數(shù)量和延長培養(yǎng)時間。上海dojindo cck8說明書