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來源: 發(fā)布時間:2022-08-16

高效液相色譜分離原理離子交換(Ion-exchangeChromatography)IEC是以離子交換劑作為固定相。IEC是基于離子交換樹脂上可電離的離子與流動相中具有相同電荷的溶質(zhì)離子進(jìn)行可逆交換,依據(jù)這些離子以交換劑具有不同的親和力而將它們分離。以陰離子交換劑為例,其交換過程可表示如下:X-(溶劑中)(樹脂-R4NCl-)===(樹脂-R4NX-)Cl-(溶劑中)當(dāng)交換達(dá)平衡時:KX=[-R4NX-][Cl-]/[-R4NCl-][X-]分配系數(shù)為:DX=[-R4NX-]/[X-]=KX[-R4NCl-]/[Cl-][討論:DX與保留值的關(guān)系]凡是在溶劑中能夠電離的物質(zhì)通常都可以用離子交換色譜法來進(jìn)行分離。上海禹重實業(yè)有限公司為您提供液相色譜系統(tǒng),期待為您服務(wù)!寶山區(qū)化學(xué)液相色譜系統(tǒng)咨詢報價

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高效液相色譜的歷史1903年俄國植物化學(xué)家茨維特(Tswett)提出“色譜法”(Chromatography)和“色譜圖”(Chromatogram)的概念。茨維特使用色譜法chromatography來描述他的彩色試驗。1930年以后,相繼出現(xiàn)了紙色譜、離子交換色譜和薄層色譜等液相色譜技術(shù)。1952年,英國學(xué)者M(jìn)artin和Synge基于他們在分配色譜方面的研究工作,提出了關(guān)于氣-液分配色譜的比較完整的理論和方法,把色譜技術(shù)向前推進(jìn)了一大步,這是氣相色譜在此后的十多年間發(fā)展十分迅速的原因。1958年,基于Moore和Stein的工作,離子交換色譜的儀器化導(dǎo)致了氨基酸分析儀的出現(xiàn),這是近代液相色譜的一個重要嘗試,但分離效率尚不理想。1960年中后期,氣相色譜理論和實踐發(fā)展,以及機(jī)械、光學(xué)、電子等技術(shù)上的進(jìn)步,液相色譜又開始活躍。到60年代末期把高壓泵和化學(xué)鍵合固定相用于液相色譜就出現(xiàn)了HPLC。1970年中期以后,微處理機(jī)技術(shù)用于液相色譜,進(jìn)一步提高了儀器的自動化水平和分析精度。1990年以后,生物工程和生命科學(xué)在國際和國內(nèi)的迅速發(fā)展,為高效液相色譜技術(shù)提出了更多、更新的分離、純化、制備的課題,如人類基因組計劃,蛋白質(zhì)組學(xué)有HPLC作預(yù)分離等。

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高效液相色譜分離原理空間排阻(StericExclusionChromatography)空間排阻色譜法以凝膠(gel)為固定相。它類似于分子篩的作用,但凝膠的孔徑比分子篩要大得多,一般為數(shù)納米到數(shù)百納米。溶質(zhì)在兩相之間不是靠其相互作用力的不同來進(jìn)行分離,而是按分子大小進(jìn)行分離。分離只與凝膠的孔徑分布和溶質(zhì)的流動力學(xué)體積或分子大小有關(guān)。試樣進(jìn)入色譜柱后,隨流動相在凝膠外部間隙以及孔穴旁流過。在試樣中一些太大的分子不能進(jìn)入膠孔而受到排阻,因此就直接通過柱子,首先在色譜圖上出現(xiàn),一些很小的分子可以進(jìn)入所有膠孔并滲透到顆粒中,這些組分在柱上的保留值比較大,在色譜圖上***出現(xiàn)。液相色譜系統(tǒng),就選上海禹重實業(yè)有限公司,用戶的信賴之選,有需求可以來電咨詢!嘉定區(qū)化學(xué)分離液相色譜系統(tǒng)

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高效液相色譜梯度洗脫類似于GC中的程序升溫。已成為現(xiàn)代高效液相色譜中不可缺少的部分。梯度洗提,就是載液中含有兩種(或更多)不同極性的溶劑,在分離過程中按一定的程序連續(xù)改變載液中溶劑的配比和極性,通過載液中極性的變化來改變被分離組分的分離因素,以提離效果。梯度洗提可以分為兩種:a.低壓梯度(也叫外梯度):在常壓下,預(yù)先按一定程序?qū)煞N或多種不同極性的溶劑混合后,再用一臺高壓泵輸入色譜柱。b.高壓梯度(或稱內(nèi)梯度系統(tǒng)):利用兩臺高壓輸液泵,將兩種不同極性的溶劑按設(shè)定的比例送入梯度混合室,混合后,進(jìn)入色譜柱。寶山區(qū)化學(xué)液相色譜系統(tǒng)咨詢報價

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