細(xì)胞培養(yǎng)基的種類按照細(xì)胞培養(yǎng)基的發(fā)展歷史,細(xì)胞培養(yǎng)基大致可分為平衡鹽溶液、天然細(xì)胞培養(yǎng)基、合成細(xì)胞培養(yǎng)基、無血清細(xì)胞培養(yǎng)基、限定化學(xué)成分細(xì)胞培養(yǎng)基等幾大種類。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡,保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng)。其主要用于細(xì)胞的漂洗、配制其他試劑等。幾種常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's與Hank's的一個主要區(qū)別是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因為Ca2+、Mg2+是細(xì)胞膜的重要組成成份,參與細(xì)胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的B...
可在血清含量低時用,適用于克隆化培養(yǎng)。F12適用于CHO細(xì)胞,也是無血清細(xì)胞培養(yǎng)基中常用的基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基。DMEM/F12細(xì)胞培養(yǎng)基將DMEM和F12按照1:1比例混合,混合后營養(yǎng)成份豐富,血清使用量也減少。常作為開發(fā)無血清細(xì)胞培養(yǎng)基時的基礎(chǔ)細(xì)胞培養(yǎng)基。與天然培養(yǎng)基相比,有些天然的未知成分尚無法用已知的化學(xué)成分所替代,因此,細(xì)胞培養(yǎng)中使用合成培養(yǎng)基時必須加入一定量的天然培養(yǎng)基成分,以克服合成培養(yǎng)基的不足。普遍的做法是添加5~10%的血清,這樣才能維持細(xì)胞活力,促進細(xì)胞增殖。針對不同的動物細(xì)胞,現(xiàn)已開發(fā)了多種商業(yè)化、個性化的低血清細(xì)胞培養(yǎng)基配方,營養(yǎng)成份更加豐富,血清使用量可降低至1~3...
RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基已廣泛應(yīng)用于各種正常細(xì)胞和ai細(xì)胞的培養(yǎng),包括HeLa細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、PC12細(xì)胞、PBMC細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和ai細(xì)胞,是使用較廣的培養(yǎng)基之一。 HEPES是一種優(yōu)良的生物緩沖劑,對細(xì)胞無毒性作用,添加HEPES的培養(yǎng)基能夠較長時間保持恒定的PH范圍,可以有效的防止培養(yǎng)液PH波動較大對細(xì)胞生長產(chǎn)生不利的影響??捎糜跓oCO2培養(yǎng)箱。酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑,用以持續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)液的酸堿度,在低PH值時酚紅使培養(yǎng)液呈黃色,而較高的PH值時使培養(yǎng)液呈紫色,PH值~,常適合細(xì)胞培養(yǎng)。但酚紅也有一些缺點,研究表明酚紅可以模擬固醇類...
RPMI-1640培養(yǎng)基常初是為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)專門設(shè)計的,現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于各種正常細(xì)胞和ai細(xì)胞的培養(yǎng),包括HeLa細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、PC12細(xì)胞、PBMC細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和ai細(xì)胞,是使用常為廣的培養(yǎng)基之一。RPMIRPMI1640培養(yǎng)基相比其他培養(yǎng)基之所以具有獨特的效果,是因為其中含有還原劑谷胱甘肽和高濃度的維生素。 L-丙氨酰-L-谷氨??梢源娴饶柕腖-谷氨酰胺,適用于所有的細(xì)胞,幾乎無需適應(yīng),并且可以延長細(xì)胞的培養(yǎng)時間,減少傳代次數(shù),即節(jié)省了時間也節(jié)約了金錢。與添加L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細(xì)胞相比,活性降低得更慢。延滯期略微延長的原因是肽酶的釋放...
RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀(jì)念研究所(RoswellParkMemorialInstitute,RPMI)開發(fā)出來的,RPMI是該研究所開發(fā)的一類細(xì)胞培養(yǎng)基,1640是培養(yǎng)基代號。RPMI-1640是改進型的McCoy‘s5A培養(yǎng)基,使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng),與大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養(yǎng)基是為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)專門設(shè)計的,現(xiàn)在已應(yīng)用于各種正常細(xì)胞培養(yǎng),包括HeLa細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、PC12細(xì)胞、PBMC細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞,是培養(yǎng)基之一。RPMIR...
無血清培養(yǎng)基中通常需要添加一些額外的組分,才能幫助細(xì)胞貼壁生長,包括以下幾大類物質(zhì):1)促貼壁物質(zhì):一般為細(xì)胞外基質(zhì),如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細(xì)胞功能的分化因子,對許多細(xì)胞的繁殖和分化,起著重要作用。纖連蛋白主要促進來自中胚層細(xì)胞的貼壁與分化,這些細(xì)胞包括成纖維細(xì)胞、肉瘤細(xì)胞、粒細(xì)胞、腎上皮細(xì)胞、腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞、CHO細(xì)胞、成肌細(xì)胞等。2)促生長因子:針對不同細(xì)胞添加不同的生長因子。也是刺激細(xì)胞生長、維持細(xì)胞功能的重要物質(zhì),有些是許多細(xì)胞必不可少的,如胰島素。3)酶抑制劑:培養(yǎng)貼壁生長的細(xì)胞,需要用胰酶消化傳代,在無血清培養(yǎng)基中需含酶抑制劑,以終止酶的...
III)細(xì)胞系的大規(guī)模連續(xù)培養(yǎng)。該培養(yǎng)基主要用于培養(yǎng)和維護鱗翅類衍生細(xì)胞系和擴增這些細(xì)胞系的病毒。IPL-41培養(yǎng)基基礎(chǔ)也以用于無血清夜蛾細(xì)胞的桿狀病毒重組蛋白表達。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡,保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng)。其主要用于細(xì)胞的漂洗、配制其他試劑等。目前用于細(xì)胞培養(yǎng)的血清主要是牛血清,培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也用人血清、馬血清等。牛血清對絕大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞都是適合的,但并不排除在培養(yǎng)某種細(xì)胞時使用其他動物血清更合適。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等,這些物質(zhì)對...
任意調(diào)節(jié)葡萄糖的濃度,簡便快捷。高糖型培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于生長快、粘附性低的細(xì)胞、雜交瘤的骨髓瘤細(xì)胞、克隆細(xì)胞、DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞、各種原代病毒寄主細(xì)胞、單一細(xì)胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產(chǎn),例如運用CHO細(xì)胞表述EPO和生產(chǎn)乙肝疫苗。低糖培養(yǎng)基更適宜代謝效用較慢、依賴性貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。HEPES是一種優(yōu)良的海洋生物緩沖劑,對細(xì)胞無毒性效用,添加HEPES的培養(yǎng)基能夠較長時間維持恒定的PH范圍,可以有效性的以防培養(yǎng)液PH波動較大對細(xì)胞生長產(chǎn)生不利于的影響??捎糜跓oCO2培養(yǎng)箱。酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑,用以持續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)液的酸堿度,在低PH值時酚紅使培養(yǎng)液呈黃色,而較高的PH值時使培...
Leibovitz’sL-15培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)由磷酸鹽和游離堿基氨基酸組成,代替了傳統(tǒng)的碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng),同時,用半乳糖和**酸鈉代替葡萄糖可以防止酸性代謝副產(chǎn)物的形成,有助于維持培養(yǎng)液PH的穩(wěn)定,適合用于非CO2平衡環(huán)境的細(xì)胞培養(yǎng)。Leibovitz’sL-15培養(yǎng)基適用于猴腎細(xì)胞和HEP-2的培養(yǎng)、原代(如胚胎和成人組織)細(xì)胞分離、多種病毒的培養(yǎng)以及神經(jīng)元的培養(yǎng)等。NEAA(非必須氨基酸),是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(門)冬酰胺、L-天(門)冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA,能降低細(xì)胞培養(yǎng)時細(xì)胞自身生產(chǎn)非必須氨基酸的副作用,有效...
門)冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA,能降低細(xì)胞培養(yǎng)時細(xì)胞自身生產(chǎn)非必須氨基酸的副作用,有效促進細(xì)胞增殖代謝。葡萄糖可以根據(jù)研究需要,隨意調(diào)節(jié)葡萄糖的濃度,方便快捷。高糖型培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于生長快、粘附性低的細(xì)胞、雜交瘤的骨髓瘤細(xì)胞、克隆細(xì)胞、DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞、各種原代病毒宿主細(xì)胞、單一細(xì)胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產(chǎn),例如利用CHO細(xì)胞表達EPO和生產(chǎn)乙肝疫苗。低糖培養(yǎng)基更適合代謝作用較慢、依賴性貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。HEPES是一種優(yōu)良的生物緩沖劑,對細(xì)胞無毒性作用,添加HEPES的培養(yǎng)基能夠較長時間保持恒定的PH范圍,可以有效的防止培養(yǎng)液PH波動較大對細(xì)胞生長產(chǎn)生不利的影響...
RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基是改進型的McCoy‘s5A培養(yǎng)基,使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng),與大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養(yǎng)基常初是為淋巴細(xì)胞培養(yǎng)專門設(shè)計的,現(xiàn)在已廣泛應(yīng)用于各種正常細(xì)胞和ai細(xì)胞的培養(yǎng),包括HeLa細(xì)胞、Jurkat細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、PC12細(xì)胞、PBMC細(xì)胞、星形膠質(zhì)細(xì)胞和ai細(xì)胞,是使用常為廣的培養(yǎng)基之一。 RPMI-1640細(xì)胞培養(yǎng)基L-谷氨酰胺(Glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素,但其在溶液中不穩(wěn)定,會自發(fā)降解,不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基,可以根據(jù)研究需要任意調(diào)整L-谷氨酰胺的用量,在使用時添加新鮮...
MEMα是一種改良的MEM培養(yǎng)基,與MEM培養(yǎng)基相比MEMα培養(yǎng)基營養(yǎng)更為豐富,在MEM的基礎(chǔ)上又添加了NEAA、**酸鈉、硫酸鋅、VB12、生物素、抗壞血酸等成分,廣泛應(yīng)用于各種哺乳動物懸浮和貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。不含核苷和脫氧核苷的MEMα培養(yǎng)基常常用作DG44和其他DHFR-缺陷型細(xì)胞的篩選培養(yǎng)基。酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑,用以持續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)液的酸堿度,在低PH值時酚紅使培養(yǎng)液呈黃色,而較高的PH值時使培養(yǎng)液呈紫色,PH值~,**適合細(xì)胞培養(yǎng)。但酚紅也有一些缺點,研究表明酚紅可以模擬固醇類***(特別是雌***)的作用,因此在用到雌***敏感的細(xì)胞時(如乳腺組織),比較...
無血清培養(yǎng)基中通常需要添加一些額外的組分,才能幫助細(xì)胞貼壁生長,包括以下幾大類物質(zhì):1)促貼壁物質(zhì):一般為細(xì)胞外基質(zhì),如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細(xì)胞功能的分化因子,對許多細(xì)胞的繁殖和分化,起著重要作用。纖連蛋白主要促進來自中胚層細(xì)胞的貼壁與分化,這些細(xì)胞包括成纖維細(xì)胞、肉瘤細(xì)胞、粒細(xì)胞、腎上皮細(xì)胞、腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞、CHO細(xì)胞、成肌細(xì)胞等。2)促生長因子:針對不同細(xì)胞添加不同的生長因子。也是刺激細(xì)胞生長、維持細(xì)胞功能的重要物質(zhì),有些是許多細(xì)胞必不可少的,如胰島素。3)酶抑制劑:培養(yǎng)貼壁生長的細(xì)胞,需要用胰酶消化傳代,在無血清培養(yǎng)基中需含酶抑制劑,以終止酶的...
MEMα是一種改良的MEM培養(yǎng)基,與MEM培養(yǎng)基相比MEMα培養(yǎng)基營養(yǎng)更為豐富,在MEM的基礎(chǔ)上又添加了NEAA、**酸鈉、硫酸鋅、VB12、生物素、抗壞血酸等成分,廣泛應(yīng)用于各種哺乳動物懸浮和貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。不含核苷和脫氧核苷的MEMα培養(yǎng)基常常用作DG44和其他DHFR-缺陷型細(xì)胞的篩選培養(yǎng)基。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺(Alanyl-glutamine,Ala-Glu),又名丙氨酰谷氨酰胺、丙谷二肽,是一種高級細(xì)胞培養(yǎng)添加劑,可直接替代細(xì)胞培養(yǎng)基中的L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細(xì)胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)素,但其在溶液中不穩(wěn)定,會自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸,其...
Leibovitz’sL-15培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)由磷酸鹽和游離堿基氨基酸組成,代替了傳統(tǒng)的碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng),同時,用半乳糖和**酸鈉代替葡萄糖可以防止酸性代謝副產(chǎn)物的形成,有助于維持培養(yǎng)液PH的穩(wěn)定,適合用于非CO2平衡環(huán)境的細(xì)胞培養(yǎng)。Leibovitz’sL-15培養(yǎng)基適用于猴腎細(xì)胞和HEP-2的培養(yǎng)、原代(如胚胎和成人組織)細(xì)胞分離、多種病毒的培養(yǎng)以及神經(jīng)元的培養(yǎng)等。NEAA(非必須氨基酸),是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(門)冬酰胺、L-天(門)冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA,能降低細(xì)胞培養(yǎng)時細(xì)胞自身生產(chǎn)非必須氨基酸的副作用,有效...
Ham’sF-12K培養(yǎng)基是Ham’sF-12營養(yǎng)混合物的Kaighn’s改進型,在Ham’sF-12的基礎(chǔ)上提高了氨基酸和**酸的濃度,降低了葡萄糖的用量,并修改了鹽的成分和含量(Konigsbergs)。Ham’sF-12K培養(yǎng)基**初設(shè)計用于培養(yǎng)原代人肝細(xì)胞以及分化的大鼠和雞的細(xì)胞。針對***的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用,我們提供多種組分的Ham’sF-12K改良培養(yǎng)基。葡萄糖可以根據(jù)研究需要,隨意調(diào)節(jié)葡萄糖的濃度,方便快捷。高糖型培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于生長快、粘附性低的細(xì)胞、雜交瘤的骨髓瘤細(xì)胞、克隆細(xì)胞、DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞、各種原代病毒宿主細(xì)胞、單一細(xì)胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產(chǎn),例如利用CHO細(xì)...
Leibovitz’sL-15培養(yǎng)基的緩沖系統(tǒng)由磷酸鹽和游離堿基氨基酸組成,代替了傳統(tǒng)的碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng),同時,用半乳糖和**酸鈉代替葡萄糖可以防止酸性代謝副產(chǎn)物的形成,有助于維持培養(yǎng)液PH的穩(wěn)定,適合用于非CO2平衡環(huán)境的細(xì)胞培養(yǎng)。Leibovitz’sL-15培養(yǎng)基適用于猴腎細(xì)胞和HEP-2的培養(yǎng)、原代(如胚胎和成人組織)細(xì)胞分離、多種病毒的培養(yǎng)以及神經(jīng)元的培養(yǎng)等。NEAA(非必須氨基酸),是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(門)冬酰胺、L-天(門)冬氨酸、L-脯氨酸、L-絲氨酸和甘氨酸7種NEAA,能降低細(xì)胞培養(yǎng)時細(xì)胞自身生產(chǎn)非必須氨基酸的副作用,有效...
基礎(chǔ)細(xì)胞生物學(xué)研究離不開 DMEM 培養(yǎng)基的支持??蒲腥藛T借助 DMEM 培養(yǎng)基,能夠在體外成功培養(yǎng)和長期維持多種細(xì)胞系,深入探究細(xì)胞的各項功能。例如,通過觀察細(xì)胞在 DMEM 培養(yǎng)基中的生長、增殖過程,研究細(xì)胞周期調(diào)控機制;分析細(xì)胞的分化現(xiàn)象,探索細(xì)胞命運決定的分子機理;監(jiān)測細(xì)胞的死亡過程,了解細(xì)胞凋亡、壞死等不同死亡方式的信號通路。DMEM 培養(yǎng)基為解開細(xì)胞生命奧秘提供了關(guān)鍵的研究工具,助力基礎(chǔ)細(xì)胞生物學(xué)研究不斷取得新突破。DMEM 由 Eagle 培養(yǎng)基改良而來,氨基酸、維生素濃度高,為細(xì)胞生長供能助力 。天津細(xì)胞培養(yǎng)基生產(chǎn)產(chǎn)家DMEM,即 Dulbecco 改良的 Eagle 培養(yǎng)基,...
III)細(xì)胞系的大規(guī)模連續(xù)培養(yǎng)。該培養(yǎng)基主要用于培養(yǎng)和維護鱗翅類衍生細(xì)胞系和擴增這些細(xì)胞系的病毒。IPL-41培養(yǎng)基基礎(chǔ)也以用于無血清夜蛾細(xì)胞的桿狀病毒重組蛋白表達。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由無機鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡,保持pH穩(wěn)定及提供簡單的營養(yǎng)。其主要用于細(xì)胞的漂洗、配制其他試劑等。目前用于細(xì)胞培養(yǎng)的血清主要是牛血清,培養(yǎng)某些特殊細(xì)胞也用人血清、馬血清等。牛血清對絕大多數(shù)哺乳動物細(xì)胞都是適合的,但并不排除在培養(yǎng)某種細(xì)胞時使用其他動物血清更合適。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等,這些物質(zhì)對...
無血清培養(yǎng)基中通常需要添加一些額外的組分,才能幫助細(xì)胞貼壁生長,包括以下幾大類物質(zhì):1)促貼壁物質(zhì):一般為細(xì)胞外基質(zhì),如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細(xì)胞功能的分化因子,對許多細(xì)胞的繁殖和分化,起著重要作用。纖連蛋白主要促進來自中胚層細(xì)胞的貼壁與分化,這些細(xì)胞包括成纖維細(xì)胞、肉瘤細(xì)胞、粒細(xì)胞、腎上皮細(xì)胞、腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞、CHO細(xì)胞、成肌細(xì)胞等。2)促生長因子:針對不同細(xì)胞添加不同的生長因子。也是刺激細(xì)胞生長、維持細(xì)胞功能的重要物質(zhì),有些是許多細(xì)胞必不可少的,如胰島素。3)酶抑制劑:培養(yǎng)貼壁生長的細(xì)胞,需要用胰酶消化傳代,在無血清培養(yǎng)基中需含酶抑制劑,以終止酶的...
Dulbecco’s改良培養(yǎng)基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的,與MEM培養(yǎng)基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素的含量增加了4倍,同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子等。DMEM培養(yǎng)基**初設(shè)計葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng)。高糖型培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于生長快、粘附性低的細(xì)胞、雜交瘤的骨髓瘤細(xì)胞、克隆細(xì)胞、DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞、各種原代病毒宿主細(xì)胞、單一細(xì)胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產(chǎn),例如利用CHO細(xì)胞表達EPO和生產(chǎn)乙肝疫苗。低糖培...
Ham’sF-12K培養(yǎng)基是Ham’sF-12營養(yǎng)混合物的Kaighn’s改進型,在Ham’sF-12的基礎(chǔ)上提高了氨基酸和**酸的濃度,降低了葡萄糖的用量,并修改了鹽的成分和含量(Konigsbergs)。Ham’sF-12K培養(yǎng)基**初設(shè)計用于培養(yǎng)原代人肝細(xì)胞以及分化的大鼠和雞的細(xì)胞。針對***的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用,我們提供多種組分的Ham’sF-12K改良培養(yǎng)基。葡萄糖可以根據(jù)研究需要,隨意調(diào)節(jié)葡萄糖的濃度,方便快捷。高糖型培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于生長快、粘附性低的細(xì)胞、雜交瘤的骨髓瘤細(xì)胞、克隆細(xì)胞、DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞、各種原代病毒宿主細(xì)胞、單一細(xì)胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產(chǎn),例如利用CHO細(xì)...
Ham’sF-12營養(yǎng)混合物(Ham’sF-12NutrientMixture)是由Ham在1969年以Ham’sF-10營養(yǎng)混合物為基礎(chǔ)設(shè)計而成的,初用于CHO細(xì)胞的無血清培養(yǎng)。Ham’sF-12常作為無血清培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)液,在低血清含量下時,特別適合單細(xì)胞培養(yǎng)和克隆化培養(yǎng),添加血清后也廣泛應(yīng)用于細(xì)胞和原代細(xì)胞的培養(yǎng),如大鼠肝細(xì)胞、大鼠前列腺上皮細(xì)胞、軟骨細(xì)胞、大鼠成肌細(xì)胞、雞胚胎細(xì)胞等。此外,Ham’sF-12與DMEM等體積混合后,得到的DMEM/F12培養(yǎng)基營養(yǎng)更為豐富,使用更為較廣。NEAA(非必須氨基酸),是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加L-丙氨酸、L-谷氨酸、L-天(門)...
Ham’sF-12K培養(yǎng)基是Ham’sF-12營養(yǎng)混合物的Kaighn’s改進型,在Ham’sF-12的基礎(chǔ)上提高了氨基酸和**酸的濃度,降低了葡萄糖的用量,并修改了鹽的成分和含量(Konigsbergs)。Ham’sF-12K培養(yǎng)基**初設(shè)計用于培養(yǎng)原代人肝細(xì)胞以及分化的大鼠和雞的細(xì)胞。針對***的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用,我們提供多種組分的Ham’sF-12K改良培養(yǎng)基。酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑,用以持續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)液的酸堿度,在低PH值時酚紅使培養(yǎng)液呈黃色,而較高的PH值時使培養(yǎng)液呈紫色,PH值~,**適合細(xì)胞培養(yǎng)。但酚紅也有一些缺點,研究表明酚紅可以模擬固醇類***(特別是雌...
MEMα是一種改良的MEM培養(yǎng)基,與MEM培養(yǎng)基相比MEMα培養(yǎng)基營養(yǎng)更為豐富,在MEM的基礎(chǔ)上又添加了NEAA、**酸鈉、硫酸鋅、VB12、生物素、抗壞血酸等成分,廣泛應(yīng)用于各種哺乳動物懸浮和貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。不含核苷和脫氧核苷的MEMα培養(yǎng)基常常用作DG44和其他DHFR-缺陷型細(xì)胞的篩選培養(yǎng)基。酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑,用以持續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)液的酸堿度,在低PH值時酚紅使培養(yǎng)液呈黃色,而較高的PH值時使培養(yǎng)液呈紫色,PH值~,**適合細(xì)胞培養(yǎng)。但酚紅也有一些缺點,研究表明酚紅可以模擬固醇類***(特別是雌***)的作用,因此在用到雌***敏感的細(xì)胞時(如乳腺組織),比較...
在細(xì)胞培養(yǎng)實驗里,DMEM 培養(yǎng)基的使用過程需嚴(yán)謹(jǐn)規(guī)范。收到培養(yǎng)基后,應(yīng)及時存放于 2-8°C 的環(huán)境中,低溫可有效減緩培養(yǎng)基內(nèi)成分的降解速度,確保其營養(yǎng)成分的穩(wěn)定性。在使用前,需將培養(yǎng)基預(yù)熱至 37°C,模擬人體體溫環(huán)境,讓細(xì)胞在適宜溫度下開啟生長旅程。同時,由于 DMEM 培養(yǎng)基多采用碳酸氫鈉緩沖系統(tǒng),需將培養(yǎng)環(huán)境的 CO?濃度維持在 5 - 10%,以此精細(xì)調(diào)控培養(yǎng)基的 pH 值處于 7.2 - 7.4 的生理適宜區(qū)間,為細(xì)胞打造穩(wěn)定且舒適的 “居住空間”,促進細(xì)胞健康生長。RPMI-1640是改進型的McCoy ‘s 5A培養(yǎng)基,使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng)。江西昆蟲細(xì)胞培養(yǎng)基批發(fā)廠DMEM ...
Dulbecco’s改良培養(yǎng)基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的,與MEM培養(yǎng)基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素的含量增加了4倍,同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子等。DMEM培養(yǎng)基**初設(shè)計葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng)。高糖型培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于生長快、粘附性低的細(xì)胞、雜交瘤的骨髓瘤細(xì)胞、克隆細(xì)胞、DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞、各種原代病毒宿主細(xì)胞、單一細(xì)胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產(chǎn),例如利用CHO細(xì)胞表達EPO和生產(chǎn)乙肝疫苗。低糖培...
Dulbecco’s改良培養(yǎng)基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的,與MEM培養(yǎng)基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素的含量增加了4倍,同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子以及**酸鈉。DMEM培養(yǎng)基**初設(shè)計葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng)。針對***的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用,我們提供多種組分的DMEM改良培養(yǎng)基。高糖型培養(yǎng)基普遍應(yīng)用于生長快、粘附性低的細(xì)胞、雜交瘤的骨髓瘤細(xì)胞、克隆細(xì)胞、DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞、各種原代病毒宿主細(xì)胞、單一細(xì)...
細(xì)胞培養(yǎng)基的種類很多,按其來源分為合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基(目前使用的培養(yǎng)基絕大部分是合成培養(yǎng)基),按其物質(zhì)狀態(tài)分為干粉培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基兩類。干粉培養(yǎng)基需由實驗者自己配制并滅菌,液體培養(yǎng)基由專業(yè)商家提供,用戶可直接使用,非常方便。1、合成培養(yǎng)基的主要成分有:氨基酸、碳水化合物、無機鹽、維生素及其它輔助物質(zhì):氨基酸氨基酸是組成蛋白質(zhì)的基本單位。不同種類的細(xì)胞對氨基酸的要求各異,但有幾種氨基酸細(xì)胞自身不能合成,必須依靠培養(yǎng)液提供,這幾種氨基酸稱為必需氨基酸。其中谷氨酰胺是細(xì)胞合成核酸和蛋白質(zhì)必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺時,細(xì)胞生長不良而死亡。因此,各種培養(yǎng)液中都有較大量的谷氨酰胺。但是,由...
Dulbecco’s改良培養(yǎng)基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的,與MEM培養(yǎng)基相比,氨基酸的含量增加了2倍,維生素的含量增加了4倍,同時還增加了非必須氨基酸、微量鐵離子等。DMEM培養(yǎng)基初設(shè)計葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng)。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”,其中,青霉素能夠干擾細(xì)菌細(xì)胞壁的合成,對革蘭陽性菌特別有效;而鏈霉素能夠與細(xì)菌核糖體30S亞單位結(jié)合,抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成,對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效,但對革蘭氏...