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惟精環(huán)境:科技賦能,守護(hù)綠水青山
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“自動(dòng)?化監(jiān)測(cè)技術(shù)在水質(zhì)檢測(cè)中的實(shí)施與應(yīng)用”在《科學(xué)家》發(fā)表
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PCR儀的基本原理類(lèi)似于DNA的天然復(fù)制過(guò)程,其特異性依賴(lài)于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成:1、模板DNA的變性:模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時(shí)間后,使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結(jié)合,為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備;2、模板DNA與引物的退火(復(fù)性):模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后,溫度降至55℃左右,引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合;3、引物的延伸:DNA模板--引物結(jié)合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP為反應(yīng)原料,靶序列為模板,按堿基配對(duì)與半保留復(fù)制原理,合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過(guò)程,就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈",而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個(gè)循環(huán)需2~4分鐘,2~3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬(wàn)倍(Plateau)。到達(dá)平臺(tái)期所需循環(huán)次數(shù)取決于樣品中模板的拷貝。在此同時(shí)認(rèn)識(shí)到蛋白質(zhì)是接受RNA的遺傳信息而合成的。50年代Zamecnik等在形態(tài)學(xué)和分離的亞細(xì)胞組分實(shí)驗(yàn)中已發(fā)現(xiàn)微粒體(microsome)是細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)合成的部位。 普通PCR儀主要應(yīng)用于科研、教學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、檢驗(yàn)、檢疫等。上海力康實(shí)驗(yàn)室PCR儀生產(chǎn)廠(chǎng)家
1993年,美國(guó)科學(xué)家Mulis眾望所歸地獲得了諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng),他所取得的成就是發(fā)明了PCR技術(shù)。PCR,中文譯為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng),其實(shí)是一種DNA的快速擴(kuò)增技術(shù),其擴(kuò)增效率之高就象核裂變的“鏈?zhǔn)椒磻?yīng)”那樣。PCR技術(shù)通過(guò)兩個(gè)短的稱(chēng)為引物的DNA小片段和一種耐熱的酶的作用,可以在3個(gè)小時(shí)內(nèi)把特定的DNA量提高1000萬(wàn)倍。這種技術(shù)一問(wèn)世,立刻引起了分子生物學(xué)研究的一場(chǎng)**,人們利用這種轟動(dòng)全世界的技術(shù)很快就把微觀(guān)領(lǐng)域的生物學(xué)研究地往前推了一步??梢赃@么說(shuō),PCR技術(shù)使分子生物學(xué)研究一下子獲得了突破,而且隨著PCR技術(shù)的日趨完善,PCR在人類(lèi)社會(huì)生活中的應(yīng)用也越來(lái)越。比如說(shuō)在“DNA指紋”中我們提到,科學(xué)家們只需要一根頭發(fā)甚至一個(gè)細(xì)胞就可以完成DNA指紋的鑒定工作,這里實(shí)際上就要采用PCR技術(shù),因?yàn)橐粋€(gè)細(xì)胞中的DNA含量實(shí)在太少了,人們根本不可能檢測(cè)到它的指紋;有了PCR技術(shù)就好辦了,通過(guò)PCR技術(shù)把這個(gè)細(xì)胞中的DN斷擴(kuò)增1000萬(wàn)倍,這樣DNA量就足夠作指紋鑒定了。再比如,在醫(yī)院里檢驗(yàn)血液中的某種病毒,有時(shí)病毒量極少(例如病毒攜帶者),通過(guò)傳統(tǒng)的檢查方法費(fèi)力又費(fèi)時(shí),這時(shí)PCR技術(shù)也許就可以幫上忙??梢韵冗x定這種病毒DNA上的一段DNA,設(shè)計(jì)合適的引物DNA。 高??蒲蠵CR儀銷(xiāo)售電話(huà)臨床診斷、法醫(yī)學(xué)調(diào)查和農(nóng)業(yè)生物技術(shù)研究等領(lǐng)域要求設(shè)備有可靠的性能、靈敏度和標(biāo)準(zhǔn),pcr儀正巧合適。
儀器制冷部件可以在完成擴(kuò)增后降溫至4℃,保存樣品過(guò)夜。缺點(diǎn):管內(nèi)反應(yīng)液溫度比鋁塊顯示溫度滯后;須使用特制且與鋁塊凹孔形狀緊密吻合的薄壁耐熱反應(yīng)管;變溫時(shí)難以快速克服鋁塊的熱容量;壓縮機(jī)制冷啟動(dòng)慢、重量大、滯后時(shí)間長(zhǎng)。2.水浴式PCR儀儀器本身有3個(gè)不同溫度的水浴,用機(jī)械裝置將帶有反應(yīng)管的架子移位和升降溫度,使溫度循環(huán)。優(yōu)點(diǎn):水為傳熱介質(zhì),溫度易恒定,熱容量大;反應(yīng)管形狀無(wú)特殊要求,溫度轉(zhuǎn)換較快擴(kuò)增效果穩(wěn)定;具有較高的運(yùn)行效率,擴(kuò)增產(chǎn)物特異性好。缺點(diǎn):高溫浴不穩(wěn)定,水面需用液體石蠟覆蓋;改變水浴溫度所需時(shí)間較長(zhǎng),不易實(shí)施復(fù)雜程序(如套式PCR)的操作,儀器體積較大;室溫影響溫度下限。3.變溫式流式PCR儀依據(jù)空氣流的動(dòng)力學(xué)原理,以冷熱氣流為介質(zhì)升降溫度。優(yōu)點(diǎn):變溫迅速,擴(kuò)增效果好,適合于微量、快速PCR;反應(yīng)器不受形狀限制,管外無(wú)需涂液體石蠟;測(cè)定管內(nèi)液體溫度作為控溫依據(jù),顯示溫度真實(shí)可靠;易于用微電腦設(shè)定復(fù)雜的變溫程序;易于制成重量較輕的便攜式儀器,適合外出作業(yè)。缺點(diǎn):以室溫為溫度下限,低溫難控制,對(duì)空氣流的動(dòng)力學(xué)要求較高,需精心設(shè)計(jì)才能使各管溫度均勻。
PCR實(shí)驗(yàn)室的空氣流向必須嚴(yán)格按照試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū)標(biāo)本制備區(qū)擴(kuò)增區(qū)擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)空氣壓力逐漸遞減方式進(jìn)行,防止擴(kuò)增產(chǎn)物順空氣氣流進(jìn)入擴(kuò)增前的區(qū)域。風(fēng)速流向不得混亂。為了保證房間內(nèi)的壓差和避免污染,應(yīng)在空調(diào)面板處寫(xiě)清楚送風(fēng)機(jī)和排風(fēng)機(jī)的開(kāi)啟順序和關(guān)閉順序,先后順序不得混亂。空氣潔凈級(jí)別不同的相鄰房間之間的靜壓差應(yīng)大于5帕,潔凈室(區(qū))與室外大氣的靜壓差應(yīng)大于10帕,應(yīng)配備監(jiān)測(cè)靜壓差的設(shè)備,并定期監(jiān)控。一般情況下,試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓,以防外界含核酸氣溶膠的空氣進(jìn)入,造成污染;可以通過(guò)控制進(jìn)風(fēng)風(fēng)量大于排風(fēng)風(fēng)量達(dá)到正壓效果。核酸擴(kuò)增室及產(chǎn)物分析室應(yīng)呈微負(fù)壓,以防含核酸的氣溶膠擴(kuò)散出去污染試劑與樣品,可以通過(guò)控制排風(fēng)風(fēng)量大于進(jìn)風(fēng)風(fēng)量達(dá)到負(fù)壓效果。理想情況下,PCR實(shí)驗(yàn)室緩沖間內(nèi),可設(shè)置正壓,使室內(nèi)空氣不流向室外,室外空氣不流向室內(nèi)。PCR實(shí)驗(yàn)室進(jìn)風(fēng)由原有中央空調(diào)控制的要求將中央空調(diào)風(fēng)口安裝到指定定點(diǎn)。PCR擴(kuò)增過(guò)程中,熒光定量PCR儀通過(guò)熒光信號(hào),對(duì)PCR進(jìn)程進(jìn)行實(shí)時(shí)檢測(cè)。
血友病是一組**為常見(jiàn)的遺傳性凝血障礙,根據(jù)因子缺陷的不同分為甲、乙兩型,(Ⅷ、Ⅸ因子缺陷),也有復(fù)合型血友病,但不常見(jiàn)。甲型血友病發(fā)病率為1/10000,Ⅷ因子基因位于G6PD基因附近,全長(zhǎng)186Kb,大范圍的基因重排(缺失、插入、重復(fù))導(dǎo)致甲型血友病的病例很少,*為Ⅷ因子缺陷的5%,大部分病人表現(xiàn)為單個(gè)或少數(shù)堿基的突變。由于Ⅷ因子基因長(zhǎng)度為186Kb,突變位點(diǎn)多,而且新生突變頻率高,從臨床角度講不能對(duì)每一個(gè)突變都檢測(cè),可對(duì)**為常見(jiàn)的幾種突變類(lèi)型進(jìn)行檢測(cè),主要的檢測(cè)手段是PCR結(jié)合RELP分析。乙型血友病發(fā)病率占血友病的20%,其基因變化及檢測(cè)方法與甲型血友病類(lèi)似。區(qū)別雄性及雌性的物質(zhì)基礎(chǔ)是性染色體,哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育中,雌性表型不需要任何調(diào)節(jié),而雄性表型則由多因素決定,位于Y染色體上的指導(dǎo)雄性性別分ss化的基因命名為睪丸決定因子(TDF)?,F(xiàn)代研究表明,SRY(Sex-determiningregionofYchromosome)基因是TDF基因,位于Y染以體短臂末端。SRY區(qū)缺失易導(dǎo)致46XY核型個(gè)體發(fā)育成女性。進(jìn)行基因檢測(cè)可以檢出SRY基因組的易位及缺失,從而診斷性別發(fā)育異常,這一探索性別異常的研究非常熱門(mén)。另外還有一種46XY核型異常的病人即睪丸女性化,這是用于雄***受體。 PCR儀 也稱(chēng)基因擴(kuò)增儀,是實(shí)驗(yàn)室的一種診斷分析儀器。力康熒光定量PCR儀價(jià)格信息
PCR實(shí)驗(yàn)室在儀器設(shè)備等硬件上要滿(mǎn)足開(kāi)展臨床檢驗(yàn)的條件,包括生物安全柜和PCR儀。上海力康實(shí)驗(yàn)室PCR儀生產(chǎn)廠(chǎng)家
PCR基因擴(kuò)增法在遺傳性疾病產(chǎn)前診斷中的應(yīng)用,遺傳病是由于遺傳物變化而引起的機(jī)體某一功能或缺陷或異常所致的疾病,其根本變化在于遺傳物質(zhì)。地中海貧血(Thalassemia)是一種遺傳性慢性溶血性貧血病,是世界上常見(jiàn)且發(fā)病比高的一種單基因遺傳病。在兩廣、貴州、四川等地發(fā)病率較高,在廣西等地高達(dá)15%。地中海貧血是由于基因突變?cè)斐芍榈鞍椎牟黄胶?,使結(jié)構(gòu)正常的肽鏈合成量減少甚至沒(méi)有合成表現(xiàn)為溶血性貧血。接受累基因種類(lèi)分為α、β、γ等,其中以α、β地貧為常見(jiàn),危害了大。珠蛋白基因簇位于人6號(hào)染色短臂上,有兩個(gè)重復(fù)基因基因位于α1、α2、兩個(gè)α基因及其旁側(cè)序列有很大的同源性,易出現(xiàn)染色體不等交換,導(dǎo)致α基因缺失-α地貧。α地貧基因部分缺失有α1基因部分缺失、α2基因缺失、α1及α2基因同時(shí)缺失及非缺失型地貧??梢詰?yīng)用PCR技術(shù)擴(kuò)增α1、α2基因從而檢測(cè)這些基因是否缺失、突變等,從而對(duì)α型地中海貧血作出診斷。β地中海貧血基因缺陷主要表現(xiàn)為基因序列中單一核苷酸的突變,或少數(shù)堿基的缺失、插入,使正常β珠蛋白肽鏈合成減注或缺失。應(yīng)用位點(diǎn)特異性寡核苷探針(Aso)進(jìn)行PCR產(chǎn)物斑點(diǎn)雜交即可對(duì)其作出診斷。 上海力康實(shí)驗(yàn)室PCR儀生產(chǎn)廠(chǎng)家
力新儀器(上海)有限公司主要經(jīng)營(yíng)范圍是醫(yī)藥健康,擁有一支專(zhuān)業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)和良好的市場(chǎng)口碑。公司自成立以來(lái),以質(zhì)量為發(fā)展,讓匠心彌散在每個(gè)細(xì)節(jié),公司旗下數(shù)字化手術(shù)室,實(shí)驗(yàn)室儀器,新生兒科設(shè)備,ICU重癥產(chǎn)品深受客戶(hù)的喜愛(ài)。公司秉持誠(chéng)信為本的經(jīng)營(yíng)理念,在醫(yī)藥健康深耕多年,以技術(shù)為先導(dǎo),以自主產(chǎn)品為重點(diǎn),發(fā)揮人才優(yōu)勢(shì),打造醫(yī)藥健康良好品牌。力新儀器憑借創(chuàng)新的產(chǎn)品、專(zhuān)業(yè)的服務(wù)、眾多的成功案例積累起來(lái)的聲譽(yù)和口碑,讓企業(yè)發(fā)展再上新高。