糖原染色的原理與操作方法是什么：（1）原理：過(guò)碘酸將血細(xì)胞內(nèi)的糖原氧化，生成醛基。醛基與雪夫液中的無(wú)色品紅結(jié)合，形成紫色化合物，定位于細(xì)胞質(zhì)中。（2）操作方法：干燥涂片，滴加甲醛固定液固定10分鐘，流水沖洗，晾干。滴加過(guò)碘酸溶液作用20分鐘，流水沖洗，晾干。滴加雪夫液作用60分鐘，流水沖洗，晾干。滴加甲基綠溶液復(fù)染10分鐘，流水沖洗，晾干鏡檢。細(xì)胞的組織化學(xué)方法，是研究細(xì)胞成分常用的方法之一。它是利用化學(xué)試劑與細(xì)胞內(nèi)的某些物質(zhì)進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)，從而在細(xì)胞局部形成有色沉淀物，再通過(guò)顯微鏡對(duì)組織內(nèi)的生物化學(xué)成分進(jìn)行定性、定位、定量研究。冷凍切片染色效果不佳,成熟時(shí)間2個(gè)月,染色時(shí)間一般15-20分鐘。北京如何使用糖原染色試劑盒平均價(jià)格

糖原染色是病理學(xué)中常規(guī)的染色方法之一，McManus在1946年較先使用高碘酸-雪夫技術(shù)顯示黏蛋白，該法常用來(lái)顯示糖原和其他多糖，該染色試劑盒不僅能夠顯示糖原，還能顯示中性黏液性物質(zhì)和某些酸性物質(zhì)以及軟骨、垂體、霉菌、色素、淀粉樣物質(zhì)、基底膜等。過(guò)碘酸(又稱高碘酸)是一種強(qiáng)氧化劑，它能氧化糖類及有關(guān)物質(zhì)中的1，2-乙二醇基，使之變?yōu)槎?，醛不Schiff試劑能結(jié)合成一種品紅化合物，產(chǎn)生紫紅色。由于高碘酸還可氧化細(xì)胞內(nèi)其他物質(zhì)，使用時(shí)應(yīng)注意選擇好高碘酸濃度和氧化時(shí)間，使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于過(guò)氧化，這是很關(guān)鍵的步驟。PAS技術(shù)是很少可檢測(cè)不同種類的黏液物質(zhì)(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法，但PAS技術(shù)卻不能區(qū)別黏蛋白和糖原。若要冸確鑒別黏液物質(zhì)(如黏蛋白或糖原)，需加入糖原消化步驟。大多數(shù)情冴下可用α–淀粉酶或麥芽淀粉酶來(lái)催化糖原的糖苷鍵水解，形成水溶性的雙糖-麥芽糖，在應(yīng)用PAS技術(shù)之前將糖原從組織切片上除去。人類的唾液被認(rèn)為是消化糖原的一種有效手段，但是出于安全以及缺乏標(biāo)冸唾液的考慮，不主張應(yīng)用唾液福建哪家生產(chǎn)糖原染色試劑盒平均價(jià)格糖原在肝臟及心肌疾患及某些的病變中分布和量都有一定改變。

注意事項(xiàng)：染色時(shí)：①染色時(shí)必須嚴(yán)格按照染色操作說(shuō)明書進(jìn)行染色。②在染色過(guò)程中，前一個(gè)染液浸染完成后，在進(jìn)行下一個(gè)染液的步驟之前，必須徹底充分水洗，使前一個(gè)染液沖洗干凈后再進(jìn)行下一步驟。③每次滴加染液前，務(wù)必吸干組織上多余的水分，避免多余的水把染液稀釋了，造成染色不佳。④在滴加染液時(shí)，務(wù)必使染液完全覆蓋組織，但不能溢出圈外，避免浪費(fèi)試劑。在染色時(shí)，用有色鉛筆在組織周圍劃一個(gè)圈，這樣在滴加染液時(shí)就不會(huì)使染液溢出。

糖原染色用于鑒別淋巴系統(tǒng)細(xì)胞增生的性質(zhì)鑒別紅細(xì)胞系統(tǒng)增生的性質(zhì)[英文縮寫]PAS[參考值]正常人淋巴細(xì)胞PAS反應(yīng)積分正常人幼紅細(xì)胞PAS反應(yīng)積分[臨床意義]惡性淋巴瘤、急慢性淋巴細(xì)胞白血病時(shí)PAS積分升高巨幼細(xì)胞性貧血、溶血性貧血、再障貧血時(shí)幼紅細(xì)胞PAS反應(yīng)多為陰性紅血病、紅白血病、骨髓增生異常綜合征時(shí)幼紅細(xì)胞PAS反應(yīng)積分可40甚至高達(dá)100--200以上用于不典型巨核細(xì)胞與李-斯細(xì)胞的鑒別前者PAS反應(yīng)為強(qiáng)陽(yáng)性后者為陰性或弱陽(yáng)性；用于高雪細(xì)胞和尼曼一匹克細(xì)胞的鑒別前者PAS反應(yīng)為強(qiáng)陽(yáng)性而后者反應(yīng)為陰性或弱性。冷凍切片染色時(shí)間盡量要短。

PAS染色試劑配制及染色方法：1.材料與方1.1實(shí)驗(yàn)材料新鮮小白鼠肝臟、腎臟標(biāo)本各30例，均來(lái)自我室實(shí)驗(yàn)材料。1.2主要試劑1.2.1AAF固定液又稱酒精醋酸福爾馬林混合固定液，其配方：無(wú)水乙醇80mL，冰醋酸5mL、甲醛10mL。1.2.2Carnoy固定液氯仿300mL，冰醋酸100mL，95％酒精600mL。1.2.3過(guò)碘酸溶液0.5g過(guò)碘酸（HIO）溶于100mL蒸餾水或者70％酒精溶液中，或者按如下配方配制：過(guò)碘酸0.8g，95％乙醇70mL，醋酸鈉0.27g，水20mL。待溶解后置于4℃冰箱避光保存。1.2.4無(wú)色品紅液（Schiff氏液）在三角燒內(nèi)加入蒸餾水500mL，煮沸后，在保持微沸的情況下，加入堿性品紅2.5g，并不斷搖動(dòng)約5min（勿使之沸騰），使堿性品紅徹底溶解（溶解液為深紅色）。冷卻到50℃時(shí)，過(guò)濾，加入1N鹽酸50mL，再待冷卻至25℃時(shí)加入偏重亞硫酸鈉2.5g，塞住瓶口，搖動(dòng)容器以充分混合（此時(shí)顏色明顯變淡），然后避光放置或冰箱內(nèi)24h過(guò)碘酸氧化時(shí)間不宜過(guò)久，氧化時(shí)的溫度以18～22℃佳。浙江如何使用糖原染色試劑盒哪里買

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染色的一般原則：因檢測(cè)細(xì)胞的類型、凋亡誘導(dǎo)劑種類、使用的檢測(cè)儀器不同，因而流式檢測(cè)的熒光補(bǔ)償也不同，因此建議每次檢測(cè)均需使用凋亡誘導(dǎo)處理的細(xì)胞做單陽(yáng)對(duì)照，進(jìn)行熒光補(bǔ)償?shù)恼{(diào)節(jié)。標(biāo)記抗體常用熒光素FITC，EGFP激發(fā)光：488nm發(fā)射光：525nm;使用面較廣，價(jià)格便宜。PE激發(fā)光488nm發(fā)射光575nm，此熒光的激發(fā)效率較佳，故此熒光得到的信號(hào)較強(qiáng)；檢測(cè)某些弱表達(dá)的抗原，推薦使用此熒光素。價(jià)格較FITC昂貴。APC激發(fā)光633nm，發(fā)射光660nm，在配有雙激光的流式細(xì)胞儀上，此熒光染料可與7-AAD或PI共同使用來(lái)避開自帶綠色熒光的樣本。流式細(xì)胞儀相關(guān)試劑盒。北京如何使用糖原染色試劑盒平均價(jià)格