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深圳鼠尾膠原

來源: 發(fā)布時間:2023-12-12

利用鼠尾Ⅰ型膠原構(gòu)建與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)相近的仿生骨材料。方法通過醋酸酸解提取鼠尾Ⅰ型膠原蛋白,并重構(gòu)成膠原纖維。然后,將重構(gòu)后的膠原纖維放置在礦化液中模仿骨生物礦化2~6d,通過透射電子顯微鏡和電子衍射觀察骨生物礦化。結(jié)果酸解提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白能夠重構(gòu)成膠原纖維,并且具有特征性的D-Band結(jié)構(gòu)。透射電子顯微鏡和電子衍射顯示:礦化2d后,羥基磷灰石鈣前體滲入膠原纖維,膠原纖維部分礦化;礦化6d后,膠原纖維內(nèi)部完全礦化,形成Ⅰ型膠原蛋白/羥基磷灰石鈣的仿生骨材料。結(jié)論利用酸解法提取的鼠尾Ⅰ型膠原蛋白可以重構(gòu)成膠原纖維,經(jīng)礦化可形成與人類自體骨組織化學(xué)成分和分子結(jié)構(gòu)一致的仿生骨材料。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,并且制作簡便,成本低廉。將尾腱剪斷置于平皿中,生理鹽水浸泡。深圳鼠尾膠原

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生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法,采用酸法與酶法相結(jié)合的工藝,保持恒低溫?zé)o菌的環(huán)境,利用同樣濃度的鹽溶液進(jìn)行兩次鹽析與離心,簡化了提純步驟。所用酸為低濃度酸溶液,并采用檸檬酸替代醋酸進(jìn)行提純。從提取原料到樣品生成過程中,進(jìn)行多次真空冷凍干燥,并經(jīng)進(jìn)一步處理獲得含水率在3%以下的膠原蛋白微粉;較后由滅菌、無菌包裝,成品膠原蛋白粉末的純度在98%以上。本發(fā)明獲得的膠原蛋白降低了蛋白的免疫原性,提高了產(chǎn)率和生物相容性,降低了成本,適用于生物醫(yī)用材料,所得到的膠原蛋白能完整地保留其特有的三股螺旋結(jié)構(gòu)。深圳鼠尾膠原在室溫中攪拌1-3小時直到完全溶解。

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鼠尾膠原蛋白的用途是什么:將尾巴從動物身體切除后,會冷凍起來,并提取尾巴里的筋腱。然后,將筋腱切成小塊,并在離心處理之前添加到由醋酸和水勾兌而成的混合物中。用這種方法,能將膠原蛋白從動物材料中分離出來。在食品加工領(lǐng)域,鼠尾膠原蛋白用于生產(chǎn)明膠并添加到布丁和棉花糖中。它還可以當(dāng)作酸奶,冰淇淋,果醬和奶油芝士等食品的增稠劑使用。在一些低脂肪食品中,它用于模仿全脂食品的感覺和質(zhì)地。它還用于生產(chǎn)膳食保健品,據(jù)說能讓手指甲和皮膚看起來更好。此外,還有基于膠原蛋白的保健品,可用于促進(jìn)關(guān)節(jié)健康。

膠原蛋白的功效與作用:一提起膠原蛋白,女性朋友們眼睛都放光了,因為我們都知道膠原蛋白被稱為我們皮膚的“軟黃金”,層中70%都是膠原蛋白,膠原蛋白含量的多少決定克皮膚的年輕程度!是讓我們皮膚變得有彈性的東西。大部分只知道需要補(bǔ)充膠原蛋白,但是卻不知道什么時候需要補(bǔ)充膠原蛋白,總認(rèn)為自己還年輕不需要補(bǔ)充,其實這是錯誤的觀念,膠原蛋白在女性20歲的時候就已經(jīng)開始流失了,含量逐漸下降,25歲后進(jìn)入流失的高峰期,40歲時的含量不到80歲的一半,所以我們應(yīng)該20歲就開始補(bǔ)充膠原蛋白,以保持皮膚的年輕狀態(tài)。鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗長時程的記錄。

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一種生物醫(yī)用鼠尾膠原蛋白的提取方法:1.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液;在冰水浴中,調(diào)節(jié)pH=6.5,用的3?6mol/L的NaCl溶液緩慢加入上清液中,不斷攪拌至溶液中白色的絮狀物不再析出,4°C沉淀10小時,去除上清液,去除上清液,絮狀溶液高速冷凍離心處理,收集沉淀;2.用0.03?0.06mol/L的檸檬酸再次溶液溶解沉淀物,成透明澄清黏稠溶液,冰水浴中,調(diào)節(jié)PH=6.5;溶液依次通過陽離子交換樹脂、陰離子交換樹脂進(jìn)行脫鹽處理;(8)將脫鹽后的膠原蛋白溶液,-40至-20°C預(yù)凍2?4小時,然后真空冷凍干燥,凍干產(chǎn)品經(jīng)進(jìn)一步處理得到含水率在3%以下的膠原蛋白微粉,滅菌、包裝,得到成品膠原蛋白粉末。成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細(xì)胞的方法,并且制作簡便,成本低廉。深圳鼠尾膠原

鼠尾膠原蛋白還能用于制備三維膠。深圳鼠尾膠原

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用說明:含細(xì)胞的三維膠原的制備(以配制1毫升,1mg/ml三維膠為例):準(zhǔn)備好懸浮于培養(yǎng)液的細(xì)胞,并放置于冰浴中。將200ul鼠尾膠原蛋白I型(5mg/ml)加到12ul0.1mol/LNaOH中(如果反過來把12ul0.1mol/LNaOH加到膠原溶液中,會由于NaOH不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)),立即混勻。再加入23ul10×PBS或10×培養(yǎng)液,混勻(混勻后pH為7左右,如果PBS或培養(yǎng)液中沒有加酚紅,初次使用時需要用pH試紙測試)。加入760ul的細(xì)胞懸浮液,混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫下放置20分鐘待膠凝固后,加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液,轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。論鼠尾膠原能促進(jìn)毛細(xì)胞貼壁,涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄,并且制作簡便,成本低廉。深圳鼠尾膠原

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