外泌體在肺病進(jìn)程中的作用:在一些病癥微環(huán)境中,一些病癥細(xì)胞來(lái)源的外泌體能夠誘導(dǎo)CD4+T分化為調(diào)節(jié)性T細(xì)胞,壓制機(jī)體的抗一些病癥免疫反應(yīng);肺病細(xì)胞分泌的外泌體含有miR-21和miR-29a,可在免疫細(xì)胞中結(jié)合并啟動(dòng)TLR8,使TLR介導(dǎo)的NF-κB信號(hào)通路活化,從而導(dǎo)致一些病癥的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。在肺病的侵襲和轉(zhuǎn)移過(guò)程中,細(xì)胞間通訊扮演著重要的角色。據(jù)有關(guān)報(bào)道稱(chēng),NSCLC分泌的外泌體內(nèi)TGFβ和IL10的高表達(dá)與肺病的轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。此外,啟動(dòng)的T細(xì)胞可以通過(guò)調(diào)控Fas信號(hào)通路增加基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP9)的表達(dá),進(jìn)而促進(jìn)肺病的轉(zhuǎn)移。這些機(jī)制有望成為肺病治病的潛在靶點(diǎn)。雖然大多數(shù)外泌體都是促進(jìn)一些病癥的侵襲與轉(zhuǎn)移,但也有報(bào)道稱(chēng),外泌體miR-302b可以通過(guò)壓制TGFβRⅡ來(lái)壓制肺病細(xì)胞的轉(zhuǎn)移與增殖。如純度和回收率低,雜蛋白較多(假陽(yáng)性),顆粒大小不均一,產(chǎn)生難以去除的聚合物外泌體提純?cè)噭┖械奶厣c優(yōu)勢(shì):無(wú)需耗時(shí)的超速離心,過(guò)濾或特殊注射器。貴陽(yáng)正規(guī)外泌體提取試劑哪家好
有研究發(fā)現(xiàn),NSCLC患者肺組織外泌體表面EGFR免疫染色呈陽(yáng)性的占80%,而慢性肺炎組織的外泌體EGFR呈陽(yáng)性的只占2%,因而認(rèn)為外泌體的EGFR蛋白可以用作NSCLC與慢性肺炎鑒別診斷的生物標(biāo)志物。Park等通過(guò)Sys-BodyFlu-id數(shù)據(jù)庫(kù)分析發(fā)現(xiàn)153種特異性胸腔積液外泌體蛋白質(zhì),進(jìn)一步的Westernblotting分析顯示多種特異性胸腔積液外泌體蛋白參與EGFR信號(hào)傳導(dǎo)途徑以促進(jìn)一些病癥的發(fā)生的發(fā)展,因此外泌體蛋白可能作為肺病診斷篩查的生物學(xué)標(biāo)記物。外泌體相關(guān)蛋白質(zhì)與肺病的診斷:近年來(lái)眾多文獻(xiàn)報(bào)道,肺病細(xì)胞分泌的外泌體中富含多種蛋白質(zhì)并促進(jìn)肺病的發(fā)生的發(fā)展,是早期診斷肺病的有效途徑。無(wú)錫正規(guī)外泌體提取試劑服務(wù)電話(huà)外泌體提?。夯诰酆衔锏某恋砑夹g(shù)通常包括將樣本與含聚合物的沉淀溶液混合。
外泌體研究的主要應(yīng)用:外泌體的功能取決于其所來(lái)源的細(xì)胞類(lèi)型,其可參與到機(jī)體免疫應(yīng)答、抗原提呈、細(xì)胞遷移、細(xì)胞分化、一些病癥侵襲等方方面面。有研究表明一些病癥來(lái)源的外泌體參與到一些病癥細(xì)胞與基底細(xì)胞的遺傳信息的交換,從而導(dǎo)致大量新生血管的生成,促進(jìn)了一些病癥的生長(zhǎng)與侵襲。一些病癥。一些病癥轉(zhuǎn)移。來(lái)自白血病干細(xì)胞的外泌體促進(jìn)急性骨髓性白血?。ˋML)細(xì)胞的增殖、遷移和壓制細(xì)胞凋亡。治病靶標(biāo)。利用外泌體遞送小干擾RNA來(lái)沉默KRASG12D,從而特異性高效靶向至胰腺病細(xì)胞,以明顯降低RAS活化、病細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移過(guò)程。免疫。β細(xì)胞將含有蛋白質(zhì)和miRNA的外泌體釋放到細(xì)胞外,并可轉(zhuǎn)移到其他代謝部位或免疫內(nèi)皮細(xì)胞,有利于維持葡萄糖體內(nèi)平衡或造成胰島素抵抗。心血管。外泌體介導(dǎo)miR-155從平滑肌細(xì)胞轉(zhuǎn)移到內(nèi)皮細(xì)胞導(dǎo)致了內(nèi)皮細(xì)胞的損傷促進(jìn)動(dòng)脈硬化。分子標(biāo)記。疾病診斷。在酒精性肝病、NASH、菌類(lèi)性肝炎、藥物性肝損傷和肝細(xì)胞病中發(fā)現(xiàn)循環(huán)EVs的水平上升。預(yù)后標(biāo)志
來(lái)源于不同的組織的外泌體不僅具有其特異性蛋白分子,而且還包含其行使功能的關(guān)鍵分子。有關(guān)外泌體分泌和攝取及其組成、“運(yùn)載物”和相應(yīng)功能的精確分子機(jī)制近些年剛剛開(kāi)始受到關(guān)注,與外泌體相關(guān)的被pubmed收錄的文章數(shù)量和國(guó)自然基金項(xiàng)目中標(biāo)數(shù)量逐年增長(zhǎng),表明國(guó)內(nèi)外對(duì)外泌體的研究興趣日益增長(zhǎng)。細(xì)胞外囊泡是蛋白質(zhì)、mRNA、miRNA和脂質(zhì)運(yùn)輸來(lái)完成細(xì)胞間通訊通路的重要媒介,根據(jù)它們的大小和發(fā)生分為三類(lèi),包括外泌體、微泡和凋亡小體。其中,外泌體是直徑大約為40-100nm的包裝囊泡,由多種細(xì)胞分泌,內(nèi)含有特定的蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、細(xì)胞因子或遺傳物質(zhì)。形成了一種全新的細(xì)胞間信息傳遞系統(tǒng),影響細(xì)胞的生理狀態(tài)并與多種疾病的發(fā)生與進(jìn)程密切相關(guān)。
用于外泌體提取的體液收集注意事項(xiàng):1、抽血技巧。操作要輕柔迅速。試管可翻轉(zhuǎn)8-10次使樣本與抗凝劑混勻,避免劇烈搖晃?;靹蚝?,將試管固定垂直放置于離心分離器,在頂部記錄抽血的準(zhǔn)確時(shí)間,因?yàn)槌檠c離心之間的時(shí)間間隔可能是一個(gè)影響因素。外泌體在抽血后30分鐘內(nèi)是比較穩(wěn)定的,若時(shí)間過(guò)長(zhǎng)將導(dǎo)致外泌體數(shù)量增加。血小板極易因抽血時(shí)的物理因素而并釋放出外泌體,其中包括接觸、壓力、切力。2、抽血時(shí)間。除了血液黏度,體內(nèi)血液的各項(xiàng)指標(biāo)在1天中變化很大。生理節(jié)律會(huì)對(duì)血小板的產(chǎn)生很大的影響。白細(xì)胞的募集和循環(huán)系統(tǒng)中促炎細(xì)胞和細(xì)胞會(huì)隨時(shí)間變化。大量的具有特殊表面分子的微粒也被證明會(huì)隨時(shí)間變化。目前尚無(wú)設(shè)計(jì)較好的實(shí)驗(yàn)對(duì)證實(shí)不同時(shí)間血液中外泌體的變化,故應(yīng)在相同的時(shí)間采集樣本。目前飲食是否會(huì)對(duì)EV產(chǎn)生影響尚未可知,但是由于脂蛋白可運(yùn)載RNA且食物的攝取可以影響循環(huán)脂蛋白顆粒的類(lèi)型、數(shù)量和作用,故抽血可在較后一次用餐后一段確定的時(shí)間進(jìn)行。近幾年來(lái),市場(chǎng)上已出現(xiàn)各種商業(yè)化的外泌體提取試劑盒。武漢正規(guī)外泌體提取試劑銷(xiāo)售廠(chǎng)家
色譜法。這種方法分離到的外泌體在電鏡下大小均一,但是需要特殊的設(shè)備,應(yīng)用不普遍。貴陽(yáng)正規(guī)外泌體提取試劑哪家好
外泌體(Exosome)是由細(xì)胞分泌而來(lái)的微小囊泡,直徑約為30-200nm,密度在1.13-1.21g/ml,具有杯狀形態(tài)、雙層膜結(jié)構(gòu),天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和細(xì)胞培養(yǎng)基等生物體液中。包括瘤細(xì)胞在內(nèi)幾乎所有類(lèi)型的細(xì)胞(免疫細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、干細(xì)胞),都可以產(chǎn)生并釋放exosome。Exosome內(nèi)含有與細(xì)胞來(lái)源相關(guān)的蛋白質(zhì)rRNA和microRNA,Exosome可通過(guò)細(xì)胞膜受體直接受體細(xì)胞,也可運(yùn)輸?shù)鞍踪|(zhì)、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA,甚至細(xì)胞器進(jìn)入受體細(xì)胞,參與細(xì)胞間通訊。Exosome在免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng)、血管生成、凋亡、凝血和廢物處理等生理過(guò)程發(fā)揮關(guān)鍵作用,不同細(xì)胞來(lái)源的exosome所含有的RNA和蛋白成分不盡相同,可作為多種疾病的早期診斷標(biāo)記物,也能作為靶向藥物的載體進(jìn)行疾病貴陽(yáng)正規(guī)外泌體提取試劑哪家好