鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項：三維膠原的制備 鼠尾膠原蛋白 型在濃度1mg/ml 以上， pH 左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度 1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于 0.006mol/L 乙酸 中，在成膠過程中需要加入 0.06體積的 0.1mol/L NaOH 來中和。 需要的溶液 （均需要無菌、 預冷） 10mg/L 酚紅用于pH 指示） 0.1mol/LNaOH，0.1mol/L乙酸(一 般不用)，雙蒸水 200ul鼠尾膠原蛋白 型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中，加入 690ul H2O 12ul0.1mol/L NaOH 12ul0.1mol/LNaOH 加到膠原溶液中， 會由于 NaOH 不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的 膠原凝結） 立即混勻。再加入 100ul 10PBS 10培養(yǎng)液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后 pH 左右，如果PBS 或培養(yǎng)液中沒有加 酚紅，初次使用時需要用 pH 試紙測試)。論鼠尾膠原能促進毛細胞貼壁，涂布鼠尾膠原有利于膜片鉗實驗的長時程記錄，并且制作簡便，成本低廉。利用鼠尾膠原將小玻片固定于培養(yǎng)瓶內。正規(guī)鼠尾膠原直銷價

鼠尾膠原實驗應用：鼠尾膠原在原代培養(yǎng)耳蝸血管紋邊緣細胞中的應用。目的：建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細胞的方法。方法:制作鼠尾膠原,并觀察利用自制的鼠尾膠原所培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細胞的效果。結果：自制的鼠尾膠原能正常地培養(yǎng)出大鼠耳蝸邊緣細胞，細胞角蛋白18表達陽性，免疫組織化學結果和掃描電鏡證實所培養(yǎng)的細胞具有典型的分泌上皮細胞特征。結論：成功建立了利用自制鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細胞的方法，并且制作簡便,成本低廉。太原鼠尾膠原開蓋在超凈臺上過夜晾干，也可以在室溫放置1小時后。

鼠尾膠原蛋白等實驗技術應用：干細胞、血管內皮細胞等多種「難伺候」的細胞，以及一些組織在體外培養(yǎng)時，需要在模擬體內環(huán)境的細胞外基質中生長，膠原蛋白和纖粘蛋白正是細胞外基質的主要組成部分，富含 1 型膠原蛋白大鼠尾部也成了實驗室用膠原蛋白的較主要來源。鼠尾取血剪下幾毫米小鼠尾巴、在小鼠尾靜脈上劃一道小口、用注射器抽取的操作都可以得到這種鮮紅的。它可以用于監(jiān)測小鼠血液成分的變化，確認小鼠是否患上了 糖尿病或者某些治好能夠改變小鼠的血糖等。比起心臟和眼部取血，實驗用鼠尾尖取血的取血量較小，但取血之后，小鼠還能繼續(xù)下一步建?；蛘邔嶒灒耆珱]有性命之憂。

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項：將培養(yǎng)器皿在室溫(25 度左右)下 放置 20 分鐘待膠凝固后，轉移到培養(yǎng)箱內。如果配制中使用的是 10PBS， 使用前需要加入適當體積的細胞培養(yǎng)液預平衡。 B．含細胞的三維膠原的制備（以配制 200ul鼠尾膠原蛋白(5mg/ml)加到（如果反過來把12ul 0.1mol/L NaOH 加到膠原溶液中，會由于 NaOH 不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結），立即 混勻。再加入 23ul 10PBS 10培養(yǎng)液，混勻(混勻后pH 左右，如果 PBS 或培養(yǎng)液中沒有加酚紅，初次使用時需要用 pH 試紙測試)。加入 760ul 的細胞懸浮液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。將培養(yǎng)器皿在室溫下放 20分鐘待膠凝固后，加入適當體積的細胞培養(yǎng)液，轉移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 注意事項 型在室溫下pH 中性時可迅速成膠，在操作過程中要 盡量保持低溫。鼠尾肌腱膠原蛋白I（rat tail tendon collagen type I）根據(jù)Birkedal-Hansen方法，經(jīng)過醋酸（HAc）抽提、氯化鈉沉淀、磷酸氫二鈉沉淀等步驟制備所得。鼠尾Ⅰ型膠原：選擇適當?shù)墓切迯筒牧鲜侵魏霉侨睋p的中心環(huán)節(jié)。

鼠尾膠原在心肌細胞氧化損傷中的保護作用：原蛋白具有抗氧化作用,但既往在實驗室主要將鼠尾膠原用于促進細胞貼壁和支架構建,對于其抗氧化作用目前尚無相關研究。目的:探討鼠尾膠原對過氧化氫導致離體心肌細胞氧化損傷的保護作用。方法:將原代培養(yǎng)的SD大鼠乳鼠心肌細胞隨機接種到鋪有鼠尾膠原的培養(yǎng)皿(實驗組)和普通培養(yǎng)皿(對照組)中,并且均用0,10,100μmol/L H2O2誘導。24 h后,以電子顯微鏡觀察各組乳鼠心肌細胞的形態(tài),應用MTT比色法檢測心肌細胞存活率,TUNEL法檢測心肌細胞凋亡形態(tài),流式細胞技術檢測心肌細胞凋亡率,黃嘌呤氧化酶法檢測超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法檢測丙二醛水平,Western-Blot檢測凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表達。建立利用自制的鼠尾膠原培養(yǎng)大鼠耳蝸邊緣細胞的方法。太原鼠尾膠原

鼠尾膠原蛋白 型在濃度1mg/ml 以上， pH 左右時可形成具有一定強度三維膠。正規(guī)鼠尾膠原直銷價

鼠尾膠原蛋白Ⅰ型使用方法及注意事項：三維膠原的制備 鼠尾膠原蛋白 型在濃度1mg/ml 以上， pH 左右時可形成具有一定強度三維膠,建議成膠濃度 1-2mg/ml。膠原蛋白溶解于 0.006mol/L 乙酸 中，在成膠過程中需要加入 0.06體積的 0.1mol/L NaOH 來中和。 需要的溶液 （均需要無菌、 預冷） 10mg/L 酚紅用于pH 指示） 0.1mol/LNaOH，0.1mol/L乙酸(一 般不用)，雙蒸水 200ul鼠尾膠原蛋白 型(5mg/ml)加到置于冰浴的離心管中，加入 690ul H2O 12ul0.1mol/L NaOH 12ul0.1mol/LNaOH 加到膠原溶液中， 會由于 NaOH 不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的 膠原凝結） 立即混勻。再加入 100ul 10PBS 10培養(yǎng)液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中(混勻后 pH 左右，如果PBS 或培養(yǎng)液中沒有加 酚紅，初次使用時需要用 pH 試紙測試)。正規(guī)鼠尾膠原直銷價

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