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來源: 發(fā)布時間:2022-01-06

無血清細胞凍存液:1. 逐滴加入5 - 7 mL的預(yù)熱的培養(yǎng)基到15 mL的離心管中,加入的同時輕輕混勻。2. 室溫(15 - 25°C)以300 x g離心5分鐘。3. 吸出培養(yǎng)基,使細胞沉淀完好無損。使用2 mL血清移液管輕輕將細胞沉淀重懸于1 mL的培養(yǎng)基中。小心保持細胞作為聚集體。4. 將0.5 mL的細胞混合物轉(zhuǎn)移到含有培養(yǎng)基的預(yù)包被的6孔板的培養(yǎng)孔中(例如,每個冷凍管可以鋪板兩個孔)。注意:鋪板多少孔可能需要根據(jù)凍存的細胞聚集體數(shù)量進行調(diào)整。通常在復(fù)蘇后,要比在常規(guī)的傳代鋪板更多的細胞聚集體數(shù)量。將培養(yǎng)板放入37°C培養(yǎng)箱??焖偾昂笞笥业膿u晃培養(yǎng)板數(shù)次,將細胞聚集體分布均勻。24小時內(nèi)不要移動培養(yǎng)板。使細胞產(chǎn)生內(nèi)源性的機械損傷,引起細胞內(nèi)環(huán)境滲透壓。杭州無血清細胞凍存液廠家現(xiàn)貨

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細胞凍存是細胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復(fù)蘇細胞用于實驗。而且適度地保存一定量的細胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細胞被污染或其他意外事件而使細胞丟種,起到了細胞保種的作用。為什么要進行細胞凍存?連續(xù)培養(yǎng)的細胞系容易發(fā)生遺傳漂變,有限細胞系較終會發(fā)生衰老,所有培養(yǎng)的細胞都易受到微生物污染,即使運轉(zhuǎn)情況較好的實驗室也會遇到設(shè)備故障的問題。由于已建立的細胞系是一種寶貴資源,更換細胞系成本高昂,而且耗費時間,因此,十分有必要將細胞冷凍起來長期保存。除此之外,還可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。太原無血清細胞凍存液廠家批發(fā)價無血清細胞凍存液產(chǎn)品性能:不含牛血清,無動物源組分。

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無血清細胞凍存液通用于各種動物細胞株(tumour細胞和常規(guī)細胞),大部分的干細胞,凍存細胞可在-80℃長期保存。不含動物源性蛋白,不含血清成分,可有效減少各類細菌、病毒和支原體等污染,保證凍存細胞的安全。該凍存液含DMSO、葡萄糖等各種細胞營養(yǎng)成分,提高細胞存活率和活力,亦適合于無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞。產(chǎn)品優(yōu)勢:1、無需程序性降溫,可直接將細胞置于-80℃凍存,凍存液無需稀釋。2、細胞可于-80℃長期保存。3、凍存液不含血清等,較大降低細胞污染的可能性。保存方法:冰袋運輸,4℃保存,保質(zhì)期一年。

細胞凍存的注意事項:1、各種細胞對凍存速度的要求也不一樣;上皮細胞和成纖維細胞耐受性可能大些,骨髓干細胞-2~-3℃/分鐘合適;胚胎細胞耐受性較小,不宜太快??傊谝婚_始時,下降速度不能超過-10℃/分鐘。2、用什么防護劑合適和用量多大,要依細胞而定,初代培養(yǎng)細胞用DMSO較好,一般細胞可用甘油;用量以較小為好。有人認為人皮膚上皮細胞貯存在20%-30%甘油中很好。3、原則上細胞在液氮中可貯存多年,但為妥善起見,凍存一年后,應(yīng)再復(fù)蘇培養(yǎng)一次,然后再繼續(xù)凍存。4、將凍存管放入液氮容器或從中取出時,要做好防護工作,以免凍壞。5、注意自身的安全,對于來自人源性或病毒傳染的細胞株應(yīng)特別小心。操作過程中,應(yīng)避免引起氣溶膠的產(chǎn)生,小心有毒性試劑例如DMSO,并避免尖銳物品傷人等。從冰箱里取出細胞冷凍保存管,立即放入37℃振動水浴槽中快速解凍。

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無血清細胞凍存液:解凍解凍后,應(yīng)該立即鋪板在預(yù)先包被好的培養(yǎng)皿中。上述凍存的一管細胞可以成功的鋪板到6孔板的 1 - 2孔。1. 開始之前,提前準(zhǔn)備好以下材料:試管,恢復(fù)至室溫的培養(yǎng)基,預(yù)先包被的培養(yǎng)板,確保整個解凍復(fù)蘇程序可以在較短的時間內(nèi)完成。注意:不要在37°C水浴中加熱培養(yǎng)基。2. 在37°C水浴中快速解凍,持續(xù)溫和的在水中晃動凍存管,直到剩余少量細胞還處于凍存狀態(tài)。3. 水浴中取出凍存管,用70%的酒精或異丙醇擦拭除菌。4. 用2 mL的血清移液管把細胞懸液轉(zhuǎn)移到一個15 mL的錐形試管。注意:用2 mL的血清移液管代替1 mL的頭可以減少細胞聚集體的分解。無血清凍存液用途:細胞保藏中心,無血清細胞凍存液用于細胞株的長期保存。太原正規(guī)無血清細胞凍存液單價

無血清細胞凍存液產(chǎn)品性能:為了避免反復(fù)凍融,傳統(tǒng)的細胞凍存液,分裝成小管后置于-20℃環(huán)境下保存。杭州無血清細胞凍存液廠家現(xiàn)貨

無血清快速細胞凍存液,是一種新型的快速凍存細胞的保護液,可將細胞置于-80^C直接冷凍保存。NM4100內(nèi)含天然抗凍蛋白(Naturalantifrereprotein),不含動物來源的血清成分,能夠有效提高細胞凍存活率和復(fù)蘇活力,減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細胞安全,能夠滿足大部分體外培養(yǎng)細胞的凍存需求。無血清凍存液使用方法:1、收集懸浮細胞或貼壁細胞,離心去除上清培養(yǎng)液。2、加入適量的細胞凍存液,重懸細胞,調(diào)節(jié)密度至1-5x10*↑/mL。3、將加有凍存液的細胞懸液分裝至凍存管中。4、將凍存管直接轉(zhuǎn)移至-80C水箱中冷凍保存。5、儲存條件:2-8C保存,年有效:-20C保存,兩年有效。杭州無血清細胞凍存液廠家現(xiàn)貨

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