培養(yǎng)基的制備原則和要求：培養(yǎng)基是根據(jù)各類微生物生長繁殖的需要，用人工方法把多種物質(zhì)混合而成的營養(yǎng)物。一般用來分離、培養(yǎng)菌類。常用的培養(yǎng)基有基礎(chǔ)培養(yǎng)基、增菌培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基和厭氧培養(yǎng)基。在制備培養(yǎng)基時，應(yīng)掌握如下原則和要求：(一)培養(yǎng)基必須含有細菌生長繁殖所需要的營養(yǎng)物質(zhì)。所用的化學藥品必須純凈，稱取的份量務(wù)必準確。(二)培養(yǎng)基的酸堿度應(yīng)符合細菌生長要求。按各種培養(yǎng)基要求準確測定調(diào)節(jié)pH值。多數(shù)細菌生長的適宜pH值為7.2～7.6，呈弱堿性。培養(yǎng)基制備器全自動控制程序，確保內(nèi)部溫度均一。湖南自動培養(yǎng)基制備器

在制備培養(yǎng)基的過程中，首先要使用一些玻璃器皿，如試管、三角瓶、培養(yǎng)皿、燒杯和吸管等。這些器皿在使用前都要根據(jù)不同的情況，經(jīng)過一定的處理，洗刷干凈。有的還要進行包裝，經(jīng)過滅菌等準備就緒后，才能使用。新購的玻璃器皿：除去包裝沾染的污垢后，先用熱肥皂水刷洗，流水沖凈，再浸泡于１～２％的工業(yè)鹽酸中數(shù)小時，使游離的堿性物質(zhì)除去，再以流水沖凈。對容量較大的器皿，如大燒瓶、量筒等，洗凈后注入濃鹽酸少許，轉(zhuǎn)動容器使其內(nèi)部表面均沾有鹽酸，數(shù)分鐘后傾去鹽酸，再以流水沖凈，倒置于洗滌架上將水空干，即可使用。湖南大容量 培養(yǎng)基制備器培養(yǎng)基配好后不宜久置，很好現(xiàn)配現(xiàn)用。

血清培養(yǎng)基主要問題：血清含一些對細胞產(chǎn)生毒性的物質(zhì)，如多胺氧化酶，能與來自高度繁殖細胞的多胺反應(yīng)（如精胺、亞精胺）形成有細胞毒性作用的聚精胺。補體、抗體、細菌有毒的等都會影響細胞生長，甚至造成細胞死亡。動物個體不同，血清產(chǎn)地、批號不同，每批質(zhì)量差異甚大，其成分不能保持一致。取材中可能帶入支原體、病毒，對細胞產(chǎn)生潛在影響，可能導致實驗失敗或?qū)嶒灲Y(jié)果不可靠性。大規(guī)模生產(chǎn)中，血清來源越來越困難，價格昂貴，是構(gòu)成動物細胞培養(yǎng)對生產(chǎn)成本的主要部分之一。

實驗室在制作培養(yǎng)基時候的經(jīng)驗總結(jié)：1、培養(yǎng)基pH值的調(diào)正：pH因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中、pH會有所變化，培養(yǎng)基各成分完全溶解后，應(yīng)進行pH的初步調(diào)正。例如，牛肉浸液約可降低pH0.2，而腸浸液pH卻會有明顯的升高。因此，對這個步驟，操作者應(yīng)隨時注意探索經(jīng)驗、以期能掌握培養(yǎng)基的較終pH，保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。pH調(diào)整后，還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘，以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。2、培養(yǎng)基過濾澄清：液體培養(yǎng)基必須澄清，瓊脂培養(yǎng)基也應(yīng)透明無明顯沉淀，因此，須要采用過濾或其它澄清方法以達到此項要求。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法，濾紙應(yīng)折疊成折扇或漏斗形，以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂。平板培養(yǎng)基要除去冷凝水，否則將影響平板分離培養(yǎng)效果。

培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項:１、培養(yǎng)基配方的選定:同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會有某些差別。因此，除所用的是標準方法，應(yīng)嚴格按其規(guī)定進行配制外，一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料，加以比較核對，再依據(jù)自己的使用目的，加以選用，記錄其來源。２、培養(yǎng)基的制備記錄:每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄，包括培養(yǎng)基名稱，配方及其來源，和各種成份的牌號，較終pH值、消毒的溫度和時間制備的日期和制備者等，記錄應(yīng)復制一份，原記錄保存?zhèn)洳?，復制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放、以防發(fā)生混亂。配制培養(yǎng)基的原則：根據(jù)培養(yǎng)目的需要選擇適宜的營養(yǎng)物質(zhì)。中國臺灣培養(yǎng)基制備器供應(yīng)商

培養(yǎng)基制備器小倒管浸滿培養(yǎng)基（不留氣泡）后再加入到盛LST的試管中。湖南自動培養(yǎng)基制備器

培養(yǎng)基制備的九個步驟關(guān)注要點：步驟一：稱取數(shù)量：用1/100的電子天平稱出培養(yǎng)基所需的藥物。首先參照配方計算出配制相應(yīng)培養(yǎng)基需要各成分的數(shù)量，然后用電子天平準確稱取重量。步驟二：培養(yǎng)基溶化：將培養(yǎng)基納入燒杯容器中，加小適量的水，緩慢加水并用玻璃棒小幅度攪拌。倘若培養(yǎng)基中不含瓊脂，則不需要對培養(yǎng)基加熱；相反含有瓊脂，就需要用本生燈/電磁爐加熱煮沸。步驟三：調(diào)培養(yǎng)基pH：雖然培養(yǎng)基中含有緩沖物質(zhì)，可以盡量使培養(yǎng)基的pH值保持在標準范圍內(nèi)，但如果配制的培養(yǎng)基不能要求，則必須進行必要的調(diào)整。如果您有校準過的pH計，則可以使用pH計。步驟四：培養(yǎng)基過濾：如果對配制的培養(yǎng)基沒有特殊要求，這一步可以省略。步驟五：培養(yǎng)基分裝：準備好的培養(yǎng)基根據(jù)用途不同分為燒瓶、試管等容器，分裝試管量大采用自動分液器，分裝試管量小，可以用漏斗分液。確定這批培養(yǎng)基的較終pH值。步驟六：培養(yǎng)基滅菌處理：分裝完成的培養(yǎng)基應(yīng)馬上滅菌。湖南自動培養(yǎng)基制備器