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生物檢測技術(shù)斑馬魚

來源: 發(fā)布時間:2024-12-07

當(dāng)各種內(nèi)源性和外源性DNA損害因子誘發(fā)細胞DNA鏈斷裂時,其超螺旋結(jié)構(gòu)受到破壞,在細胞裂解液作用下,細胞膜、核膜等膜結(jié)構(gòu)受到破壞,細胞內(nèi)的蛋白質(zhì)、RNA以及其他成分均擴散到細胞裂解液中,而核DNA因為分子量太大只能留在原位。在中性條件下,DNA可進入凝膠發(fā)生搬遷,而在堿性電解質(zhì)的作用下,DNA發(fā)生解螺旋,損害的DNA斷鏈及片段被釋放出來。因為這些DNA的分子量小且堿變性為單鏈,所以在電泳過程中帶負電荷的DNA會離開核DNA向正極搬遷構(gòu)成“彗星”狀圖像,而未受損害的DNA部分保持球形。DNA受損越嚴(yán)重,發(fā)生的斷鏈和斷片越多,長度也越小,在相同的電泳條件下搬遷的DNA量就愈多,搬遷的距離就愈長。通過測定DNA搬遷部分的光密度或搬遷長度就可以測定單個細胞DNA損害程度,然后確認受試物的作用劑量與DNA損害效應(yīng)的聯(lián)系。彗星試驗檢測低濃度基因毒物具有高靈敏性,研究的細胞不需處于有絲分裂期。一起,這種技術(shù)只需要少數(shù)細胞。斑馬魚試驗成功驗證中藥在體內(nèi)的效果機理。生物檢測技術(shù)斑馬魚

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人們發(fā)現(xiàn),斑馬魚的優(yōu)點十分,比如斑馬魚與人類基因十分相似,其信號傳導(dǎo)通路與人類基本近似,生物結(jié)構(gòu)和生理功能與哺乳動物高度相似,具有個體小、發(fā)育周期短、實驗周期短、費用低、體外受精、透明、單次產(chǎn)卵數(shù)較高以及實驗用藥量小等優(yōu)點,斑馬魚作為模式動物受到運用。之后的歷史上,科學(xué)家們用模式生物斑馬魚開展了許多實驗。1995年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎得主ChristianeNusslein-Volhard致力于識別和分類對決定身體計劃和身體片段形成至關(guān)重要的少量基因,將目光轉(zhuǎn)向魚類,以此發(fā)現(xiàn)的突變。斑馬魚在基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用實驗、視網(wǎng)膜實驗、心臟再生實驗上發(fā)揮著關(guān)鍵作用,目前已建立高尿酸血癥、、抑制血管生成、發(fā)育毒性、睡眠行為等多種模型,并已應(yīng)用于多種藥物篩選評價。斑馬魚新藥篩選和研究平臺斑馬魚毒性測驗實驗。

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斑馬魚由于養(yǎng)殖方便、繁殖周期短、產(chǎn)卵量大、胚胎體外受精、體外發(fā)育、胚體透明,已成為生命科學(xué)研究的新寵。全球范圍內(nèi)有超過1500個斑馬魚實驗室。利用斑馬魚,可以研究生命科學(xué)的基礎(chǔ)問題,揭示胚胎和組織***發(fā)育的分子機理;可以構(gòu)建人類的各種疾病和**模型,建立藥物篩選和***的研究平臺;可以建立毒理學(xué)和水產(chǎn)育種學(xué)模型,研究和解決環(huán)境科學(xué)和農(nóng)業(yè)科學(xué)的重大問題。目前我國有250個以上的實驗室利用斑馬魚開展相關(guān)科學(xué)研究。為進一步加強國內(nèi)斑馬魚研究人員之間的交流,在2011年廣州舉辦的第二屆全國斑馬魚研討會上,包括孟安明院士在內(nèi)的全國斑馬魚研究學(xué)術(shù)集體商定,今后的全國性斑馬魚會議采取“PI大會”和“研究大會”的形式交替隔年舉行,并決定自今年起固定在水生所召開“全國斑馬魚PI大會”。此次舉行的斑馬魚PI大會也作為國家斑馬魚資源中心在水生所揭牌后所召開的一次學(xué)術(shù)慶祝大會。

【點評原理】關(guān)節(jié)軟骨遭到急性外傷和慢性磨損,出現(xiàn)不同程度的損害,導(dǎo)致關(guān)節(jié)疼、活動受限,乃至功能喪失。關(guān)節(jié)軟骨的修正首要靠軟骨細胞的增殖分化,生產(chǎn)滿足的細胞外基質(zhì)修正軟骨缺損。人軟骨細胞通常是停止的,血管化程度低,營養(yǎng)首要來源于關(guān)節(jié)液和軟骨下骨,修正再生則顯得十分有限,需求外源性的手法來輔佐修正。DXMS破壞軟骨細胞的代謝平衡,引起軟骨細胞的逝世或凋亡,從而引起軟骨損害。斑馬魚的骨骼發(fā)育與其他脊椎動物骨骼發(fā)育進程極其類似,因此,可用于軟骨修正功效點評。斑馬魚的軟骨首要散布于頭部,包括七對咽顱軟骨弓(下頜弓、舌弓及五對鰓弓)和腦顱軟骨。根據(jù)轉(zhuǎn)基因軟骨熒光斑馬魚特性,患有軟骨損害的斑馬魚的軟骨熒光強度會顯著比正常斑馬魚的軟骨熒光強度要暗許多,能夠顯著被觀察到。斑馬魚基因保守性主要體現(xiàn)在與人類和其他脊椎動物基因的相似性上,包括與神經(jīng)系統(tǒng)、代謝系統(tǒng)等相關(guān)基因。

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【斑馬魚高通量技術(shù)】斑馬魚高通量技術(shù),是一種可支持同時間對數(shù)十、上百樣品進行檢測,并以相應(yīng)的數(shù)據(jù)庫支持整個實驗體系高效運轉(zhuǎn)的高可靠性篩選技術(shù)。目前,環(huán)特通過實驗設(shè)計和數(shù)據(jù)分析等重要節(jié)點進行深度優(yōu)化,強勢推出斑馬魚高通量篩選技術(shù)。該技術(shù)可將項目交付周期縮短至10-15天,并衍生出三個梯度的技術(shù)方案。【優(yōu)勢】高效:斑馬魚胚胎發(fā)育速度快,其1天生長相當(dāng)于鼠類8~10天,實驗周期大幅縮短,效率更高。高可靠:基因相似度與人體達87%,與人體對應(yīng)性強,雌魚單次產(chǎn)卵超200枚,樣本量大、個體差異小,結(jié)果更可靠。高性價比:斑馬魚實驗用樣量*為小鼠的1/1000~1/100,加之實驗效率大幅提升后,帶來極具吸引力的成本優(yōu)勢。定制靈活:方案設(shè)計靈活,可定制化程度高,能滿足不同樣品數(shù)量和實驗?zāi)康男枨蟆0唏R魚是什么?斑馬魚試驗的來源及特色?斑馬魚檢測評價報告

斑馬魚實驗環(huán)境毒理學(xué)評價。生物檢測技術(shù)斑馬魚

斑馬魚是功能基因組是科學(xué)研究中比較重要的模式生物之一,已經(jīng)推動了遺傳學(xué)、發(fā)育生物學(xué)、分子細胞生物學(xué)、神經(jīng)科學(xué)和疾病研究等多個領(lǐng)域的研究與應(yīng)用發(fā)展。斑馬魚具有胚胎透明、體外發(fā)育等特點,在受精后48小時內(nèi)基本形成,所有發(fā)育階段的胚胎均可在顯微鏡下操作和觀測,不但可以直接觀察和追蹤基因和細胞在發(fā)育中的行為,而且易于在整體動物模型中研究其調(diào)控機制。斑馬魚個體小,易于低成本地在實驗室大量養(yǎng)殖,遺傳學(xué)和胚胎學(xué)操作比小鼠等哺乳動物模型更易于掌握,適合多種疾病模型的建立。另外,斑馬魚胚胎產(chǎn)量高,可以用高通量方法篩選與基因和細胞功能相關(guān)的小分子化合物。生物檢測技術(shù)斑馬魚

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