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河北歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組應(yīng)用

來源: 發(fā)布時間:2021-11-22

空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)包含兩種芯片,分別為組織優(yōu)化芯片(Tissue Optimization)和基因表達(dá)芯片(Library Preparation)。組織優(yōu)化芯片用來摸索組織透化的比較好時間,基因表達(dá)芯片用來進(jìn)行正式樣本的空間轉(zhuǎn)錄組實驗。其中基因表達(dá)芯片上有 4 個捕獲區(qū)域,每個區(qū)域大小為 6.5mm×6.5mm,每個捕獲區(qū)域中有 5000 個帶有特異地址序列的探針簇,稱為 barcoded spots,每個 spot 直徑為 55um,包含數(shù)百萬個用于捕獲的 oligo 探針序列,相鄰兩個 spot 的中心距離為 100um。探針序列的結(jié)構(gòu)為:測序引物結(jié)合序列,16nt 的位置序列,12nt 的 UMI 序列以及 30nt 的 oligo-dT 序列。本次培訓(xùn)班旨在跟廣大科研工作者介紹空間轉(zhuǎn)錄組的研究熱點和方案設(shè)計。河北歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組應(yīng)用

本文利用空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究了在AD小鼠模型中,淀粉樣斑塊周圍直徑為100mm的組織域中發(fā)生的轉(zhuǎn)錄變化。發(fā)現(xiàn)了富含髓鞘和少突膠質(zhì)細(xì)胞基因(OLIGs)的基因共表達(dá)網(wǎng)絡(luò)的早期改變,而斑塊誘導(dǎo)的基因(PIGs)的多細(xì)胞基因共表達(dá)網(wǎng)絡(luò)涉及補(bǔ)體系統(tǒng)、氧化應(yīng)激、溶酶體和炎癥,在疾病的后期非常突出。此外作者通過對小鼠和人腦切片進(jìn)行原位測序(ISS),證實了大多數(shù)觀察到的細(xì)胞水平的變化??臻g轉(zhuǎn)錄組學(xué)分析為探究AD和其他腦部疾病致病特征附近失調(diào)的細(xì)胞網(wǎng)絡(luò)提供了可能。青海歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組有什么用空間轉(zhuǎn)錄組測序結(jié)果為未來人類心臟發(fā)育的研究提供重要的借鑒意義。

單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)的如火如荼,伴隨著空間轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)的蓬勃發(fā)展,可以看到,在現(xiàn)有的高通量檢測技術(shù)領(lǐng)域,這兩種技術(shù)已為科學(xué)研究的發(fā)展提供了前所未有的技術(shù)支撐。從2019年單細(xì)胞多組學(xué)被評為《Nature Methods》年度技術(shù)進(jìn)展,到2020年空間轉(zhuǎn)錄組技術(shù)也被評為年度技術(shù)進(jìn)展,相信在接下來的時間里,單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組和空間轉(zhuǎn)錄組將為生命科學(xué)的發(fā)展做出極其重要的貢獻(xiàn)。單細(xì)胞轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)的特點在于提供詳實的每個細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄表達(dá)信息,但是缺失了來源組織的空間組成信息?,F(xiàn)有商用空間轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)的特點在于提供了完整的組織空間位置信息,但是每個捕獲spot的信息無法達(dá)到單細(xì)胞分辨率(10個左右細(xì)胞)。因此,這兩個技術(shù)的存在是天然互補(bǔ)的,而將兩者的結(jié)合也是水到渠成,完美結(jié)合。

1. 10x Genomics公司提供的Visium空間基因表達(dá)解決方案是目前可選的一個高通量空間轉(zhuǎn)錄組的商業(yè)化解決方案。該解決方案可以輕松地將空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)技術(shù)應(yīng)用到組織切片和染色的標(biāo)準(zhǔn)方法中,從而研究空間分辨率下整個轉(zhuǎn)錄組mRNA的表達(dá)情況,同時在同一組織切片中獲得組織學(xué)相關(guān)信息??臻g轉(zhuǎn)錄組是一項前沿技術(shù),涉及到很多細(xì)節(jié)方面的準(zhǔn)備工作,例如組織類型的選擇、前期預(yù)實驗的設(shè)計、病理區(qū)域的確認(rèn)等一系列內(nèi)容。而且實驗中存在很多不確定性因素,處理不慎容易導(dǎo)致整個項目失敗。空間轉(zhuǎn)錄組細(xì)胞通訊分析方法簡介及實操。

空間轉(zhuǎn)錄組的一般流程。將準(zhǔn)備好的新鮮冷凍組織切片放置于空間轉(zhuǎn)錄組芯片上。每個細(xì)胞中的RNA分子都包含著基因表達(dá)的信息。組織切片成像,以檢索組織學(xué)信息。這樣就可以看到一個細(xì)胞或一組細(xì)胞在組織中的位置。空間轉(zhuǎn)錄組芯片上含有上千個捕獲的spot,這些捕獲探針的 Poly-T 尾可以結(jié)合RNA分子的 Poly-A 尾。這些陣列的排列順序就像一個棋盤,帶有相同身份條形碼(barcode)的探測位于同一個正方形中。這樣就可以確定每個捕獲探針及其結(jié)合RNA的來源。組織切片固定。該芯片包含一個與組織切片一起成像的視覺可檢測框架。了解R語言基礎(chǔ)語法及數(shù)據(jù)類型,了解空間轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析整體流程。陜西歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組使用

空間轉(zhuǎn)錄組的組學(xué)板塊包括cDNA的合成、擴(kuò)增、接頭連接和測序,記錄切片的轉(zhuǎn)錄本信息和空間位置信息 。河北歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組應(yīng)用

高通量空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)數(shù)據(jù)的處理和分析需要新穎的方法和工具支撐,尤其是在預(yù)處理、scRNA-seq 數(shù)據(jù)的空間重構(gòu)、基于微陣列數(shù)據(jù)的細(xì)胞類型去卷積、空間高變基因的識別、細(xì)胞間相互作用的推導(dǎo)等。scRNA-seq 技術(shù)的進(jìn)步啟發(fā)了利用高分辨率轉(zhuǎn)錄組定量分析與空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)數(shù)據(jù)的互補(bǔ)性質(zhì)的新方法。對于未進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測序的 smFISH 和 ISS 數(shù)據(jù),可通過 scRNA-seq 數(shù)據(jù)估算空間數(shù)據(jù)中未分析的基因的表達(dá)模式。此外,“空間轉(zhuǎn)錄組學(xué)”這一術(shù)語的變體,也用于描述將轉(zhuǎn)錄本定位到細(xì)胞器的技術(shù)(例如 APEX-seq),盡管該技術(shù)沒有記錄任何空間坐標(biāo)。河北歐易生物空間轉(zhuǎn)錄組應(yīng)用

上海歐易生物醫(yī)學(xué)科技有限公司位于聯(lián)航路1188號25幢,擁有一支專業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊。致力于創(chuàng)造***的產(chǎn)品與服務(wù),以誠信、敬業(yè)、進(jìn)取為宗旨,以建歐易生物產(chǎn)品為目標(biāo),努力打造成為同行業(yè)中具有影響力的企業(yè)。我公司擁有強(qiáng)大的技術(shù)實力,多年來一直專注于檢驗檢測服務(wù)。(依法須經(jīng)批準(zhǔn)的項目,經(jīng)相關(guān)部門批準(zhǔn)后方可開展經(jīng)營活動,具體經(jīng)營項目以相關(guān)部門批準(zhǔn)文件或許可證件為準(zhǔn))一般項目:生物醫(yī)藥產(chǎn)品、生化產(chǎn)品的研發(fā),醫(yī)藥中間體、化工原料及產(chǎn)品(除危險品化學(xué)品、監(jiān)控化學(xué)品、易制毒化學(xué)品)的研發(fā)、銷售,儀器儀表的銷售,并提供相關(guān)技術(shù)咨詢、技術(shù)服務(wù),會務(wù)服務(wù),企業(yè)管理咨詢。的發(fā)展和創(chuàng)新,打造高指標(biāo)產(chǎn)品和服務(wù)。自公司成立以來,一直秉承“以質(zhì)量求生存,以信譽(yù)求發(fā)展”的經(jīng)營理念,始終堅持以客戶的需求和滿意為重點,為客戶提供良好的科研服務(wù),科研檢測,學(xué)術(shù)研究,技術(shù)咨詢,從而使公司不斷發(fā)展壯大。

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