在分子生物學(xué)實驗中，PCR技術(shù)是基因擴增的重要工具，而Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 則是結(jié)合了高保真性和便捷性的理想選擇。這種預(yù)混液不僅繼承了Pfu DNA聚合酶的重要的保真性，還通過添加熒光染料，為實驗提供了更直觀的監(jiān)測手段。Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 是一種即用型的2倍濃度預(yù)混液，含有Pfu DNA聚合酶、dNTPs、優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液以及用于實時監(jiān)測的熒光染料。Pfu DNA聚合酶以其高保真性著稱，其3'-5'外切酶活性能夠在DNA合成過程中糾正錯誤摻入的堿基，提高擴增產(chǎn)物的準確性。與普通Taq酶相比，Pfu酶的錯誤率更低，使其成為基因克隆、突變分析和測序準備等高精度實驗的優(yōu)先工具。熒光染料的加入是該預(yù)混液的一大亮點。這種染料能夠在PCR過程中實時監(jiān)測DNA的擴增情況，通過熒光信號的強度變化反映目標基因的擴增程度。實驗人員無需額外添加染料或進行復(fù)雜的后處理，即可直接在PCR儀上觀察擴增曲線，從而實現(xiàn)快速、準確的定量分析。這種設(shè)計不僅節(jié)省了實驗時間，還減少了人為操作帶來的誤差。此外，Pfu Master Mix (2×) (With Dye) 的2倍濃度設(shè)計進一步簡化了實驗操作。實驗人員只需加入模板DNA和引物，即可直接進行反應(yīng)，減少了手動配制反應(yīng)體系的步驟和可能出現(xiàn)的誤差。

產(chǎn)品特點50× ROX Reference Dye的主要成分是高純度的5-ROX甘氨酸，其濃度為25 μM，以50倍濃縮的形式提供。這種染料的熒光強度在PCR過程中保持穩(wěn)定，不會因擴增反應(yīng)而發(fā)生變化，因此可以作為理想的內(nèi)部參考信號。其激發(fā)波長為575 nm，發(fā)射波長為602 nm，與多數(shù)qPCR儀器的光學(xué)系統(tǒng)兼容。此外，ROX Reference Dye具有良好的化學(xué)穩(wěn)定性，能夠在-20℃避光保存長達2年，短期使用時可在4℃保存。這種穩(wěn)定性使其在實驗中能夠提供一致的熒光信號，減少因試劑變質(zhì)導(dǎo)致的實驗誤差。性能優(yōu)勢校正孔間誤差：qPCR實驗中，由于加樣量、孔位置、試管壁厚度等因素，不同孔之間的熒光信號可能存在差異。50× ROX Reference Dye能夠通過校正這些非PCR相關(guān)的變化，顯著提高定量的精確度。提高數(shù)據(jù)重現(xiàn)性：通過使用ROX染料對數(shù)據(jù)進行歸一化處理，實驗人員可以在較少的重復(fù)實驗中獲得更精確的結(jié)果，從而節(jié)省時間和資源。適用于多種儀器：50× ROX Reference Dye兼容多種主流qPCR儀器，如ABI 5700、7000、Recombinant Mouse EGFR/HER1 Protein,His Tag在50 μL的反應(yīng)體系中，建議使用1.5 μL的5× PCR Enhancer（如果需要）和0.5 μL的Phusion DNA Polymerase。

Taq DNA聚合酶：分子生物學(xué)的“明星酶”Taq DNA聚合酶是一種從嗜熱菌Thermus aquaticus中分離得到的耐熱性DNA聚合酶，因其獨特的耐高溫特性和高效的DNA合成能力，成為分子生物學(xué)領(lǐng)域不可或缺的工具。該酶在PCR（聚合酶鏈式反應(yīng)）技術(shù)中發(fā)揮著重要作用，極大地推動了基因擴增、測序和診斷技術(shù)的發(fā)展。Taq DNA聚合酶具有5'→3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性，但缺乏3'→5'外切酶活性，這使得它在DNA合成過程中能夠快速延伸引物，同時在PCR產(chǎn)物的3'端添加一個突出的A堿基，便于后續(xù)的克隆操作。此外，Taq酶的耐熱性使其能夠在PCR的高溫變性步驟中保持穩(wěn)定，從而實現(xiàn)高效的循環(huán)擴增。近年來，科學(xué)家們通過對Taq DNA聚合酶的改造和優(yōu)化，開發(fā)出多種突變體，以滿足不同的實驗需求。例如，Klentaq1突變體具有更高的耐熱性和保真性，適用于長片段PCR擴增。此外，Taq酶的5'外切酶活性還被用于開發(fā)新型的多重PCR檢測技術(shù)，如“MeltArray”技術(shù)，實現(xiàn)了在單次反應(yīng)中檢測多個靶點。Taq DNA聚合酶的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用不僅極大地簡化了DNA擴增的流程，還為基因診斷、遺傳病檢測和個性化醫(yī)療等領(lǐng)域提供了強大的技術(shù)支持。

高靈敏度與特異性該試劑采用了優(yōu)化的反應(yīng)緩沖體系和抗體修飾的熱啟動Taq DNA聚合酶，能夠顯著提高擴增效率和特異性。即使在低拷貝數(shù)的模板條件下，也能實現(xiàn)穩(wěn)定檢測，例如某些產(chǎn)品可在3 copies/反應(yīng)的水平下實現(xiàn)穩(wěn)定檢出。此外，該試劑還通過添加抑制非特異性擴增的因子，進一步提升了多重反應(yīng)的準確性。2. 高效的多重檢測能力Multiplex Probe qPCR Mix (2×, UDG Plus) 支持在同一反應(yīng)體系中進行多達四重的靶基因檢測。這種多重檢測能力極大地提高了實驗效率，減少了樣本用量和檢測時間，特別適用于需要同時檢測多個基因或病原體的場景。3. 強大的防污染系統(tǒng)試劑中包含的dUTP/UDG系統(tǒng)能夠有效防止PCR產(chǎn)物的氣溶膠污染，從而避免假陽性結(jié)果的出現(xiàn)。UDG酶在室溫下即可發(fā)揮作用，確保實驗數(shù)據(jù)的準確性和可靠性。4. 快速擴增與操作簡便該試劑支持快速擴增程序，可在短時間內(nèi)完成qPCR反應(yīng)，例如某些產(chǎn)品可在35分鐘內(nèi)完成45個循環(huán)。同時，2×預(yù)混液的設(shè)計使得實驗操作更加簡便，只需加入模板、引物和探針即可進行反應(yīng)。牛痘DNA拓撲異構(gòu)酶I是TOPO克隆技術(shù)的關(guān)鍵組分，該技術(shù)允許快速、簡便地將PCR產(chǎn)物克隆到質(zhì)粒載體中。

一、主要特點：免提取與高兼容性Blood Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye)是一種專為血液樣本設(shè)計的高效PCR預(yù)混液，能夠直接從全血或干血斑中擴增DNA，無需進行繁瑣的DNA提取和純化步驟。這種預(yù)混液含有高保真DNA聚合酶（如HemoTaq?或Q5® Hot Start High-Fidelity DNA Polymerase），這些酶經(jīng)過優(yōu)化，能夠耐受血液中的各種抑制劑，包括抗凝劑（如EDTA、肝素、檸檬酸鈉）和濾紙中的化學(xué)物質(zhì)。此外，該預(yù)混液還具備的模板兼容性，能夠從多種抗凝劑保存的血液樣本中直接擴增DNA，適用于人類、小鼠等哺乳動物的全血樣本。二、性能：高保真性與長片段擴增Blood Direct PCR Master Mix (2×) (Without Dye)的優(yōu)勢之一是其高保真性。其DNA聚合酶的保真性高于普通Taq酶，接近Pfu DNA聚合酶，能夠確保擴增產(chǎn)物的準確性。這對于需要高精度的基因克隆和測序?qū)嶒炗葹橹匾?。此外，該預(yù)混液能夠擴增長達5kb甚至更長的DNA片段，適用于多種復(fù)雜的基因組分析。例如，它可以輕松擴增人類基因組中的長片段，如IL-6基因的4882bp片段。Cpf1是一種新發(fā)現(xiàn)的類2/型V CRISPR-Cas DNA內(nèi)切酶，在不同系統(tǒng)中顯示出一系列的活性。Recombinant Cynomolgus TPSAB1 protein,His Tag

將合成的gRNA與Cas9 NLS蛋白混合，形成復(fù)合物。由于Cas9 NLS蛋白兩端都有NLS，有助于復(fù)合物快速進入細胞核。HIV gag peptide (199-207)

SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus)：高效、特異且防污染的qPCR解決方案SYBR Green qPCR Mix (2×, Low ROX, UDG Plus) 是一種為實時熒光定量PCR（qPCR）設(shè)計的即用型預(yù)混液，結(jié)合了SYBR Green I熒光染料、低濃度ROX校正染料以及UDG防污染系統(tǒng)，能夠?qū)崿F(xiàn)高效、特異且防污染的基因定量檢測。產(chǎn)品特點高特異性和靈敏度：采用熱啟動Taq DNA聚合酶，結(jié)合優(yōu)化的反應(yīng)緩沖液，有效減少非特異性擴增，提高檢測靈敏度。低濃度ROX校正：含有低濃度ROX染料，適用于需要低濃度ROX作為校正染料的qPCR儀器，如ABI 7500、ViiA 7、QuantStudio系列等。UDG防污染系統(tǒng)：預(yù)混液中包含UDG酶和dUTP，可在PCR反應(yīng)前降解含尿嘧啶的PCR產(chǎn)物，有效防止交叉污染。操作簡便：2×預(yù)混液設(shè)計，只需加入引物和模板即可進行反應(yīng)，減少了操作步驟和污染風(fēng)險?？焖俜磻?yīng)：優(yōu)化的反應(yīng)體系支持快速qPCR程序，可在短時間內(nèi)完成檢測，提高實驗效率。應(yīng)用場景基因表達分析：用于定量檢測特定基因的表達水平。病原體檢測：快速檢測病毒、細菌等病原體的DNA。SNP分型和拷貝數(shù)變異分析：通過qPCR實現(xiàn)高特異性的基因分型。多重qPCR：可在同一反應(yīng)中同時檢測多個目標基因。HIV gag peptide (199-207)