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干細(xì)胞培養(yǎng)血小板裂解液如何制備

來源: 發(fā)布時(shí)間:2025-06-11

細(xì)胞培養(yǎng)基制備1.比較好在4°C下解凍ELAREMPrime血小板裂解液過夜或在37°C水浴中解凍1小時(shí)。2.通過將10%ELAREMPrime血小板裂解液添加到基礎(chǔ)培養(yǎng)基(即MEMα、GlutaMAX補(bǔ)充劑、無核苷)和1%的青霉素/鏈霉素作為**終濃度來制備完整的細(xì)胞培養(yǎng)基。3.應(yīng)在完全細(xì)胞培養(yǎng)基中加入肝素以抗凝。我們建議添加肝素的**終濃度為2IU/mLPLSUPPLEMENT(貨號PL-SUP-500)or0.024mg/mLPLSUPPLEMENT-XF(貨號PL-SUP-500-XF).4.完整細(xì)胞培養(yǎng)基可在4°C下儲存,并穩(wěn)定約4周儲存和穩(wěn)定性ELAREMPrime在標(biāo)簽上注明的失效日期之前是穩(wěn)定的。ELAREMPrime在使用前在-20°C(或在-80°C進(jìn)行長期儲存)冷凍儲存時(shí)穩(wěn)定。解凍后,建議將未使用的ELAREMPrime樣品分裝并在-20°C下重新冷凍。應(yīng)避免ELAREMPrime的重復(fù)凍融循環(huán),因?yàn)檫@會導(dǎo)不溶性顆粒形成的增加。使用時(shí),只需預(yù)熱一份完整的細(xì)胞培養(yǎng)基,并將剩余的培養(yǎng)基冷藏在4-8°C。更多關(guān)于Sexton人血小板裂解液的相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢官方代理商上海曼博生物!也歡迎關(guān)注我們的公眾號查看更多技術(shù)文章:Mine-bio血小板裂解液可用于多種細(xì)胞培養(yǎng),如MSC間充質(zhì)干細(xì)胞,角質(zhì)細(xì)胞,成纖維細(xì)胞,內(nèi)皮細(xì)胞等。干細(xì)胞培養(yǎng)血小板裂解液如何制備

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為了排除肝素對于細(xì)胞增長的抑制作用可能與防腐劑(這里采用芐醇作為防腐劑添加到UFH或LMWH中)有關(guān)。我們對不添加防腐劑的肝素進(jìn)行了相同實(shí)驗(yàn),結(jié)果對AT-MSC和BM-MSC細(xì)胞增殖抑制趨勢相同。在隨后的傳代培養(yǎng)到3代中的累積的群體中,兩種肝素UFH和LMWH對MSC增殖的影響也變得明顯,血小板裂解液中肝素濃度較低時(shí)累積細(xì)胞群體倍增指數(shù)(cPD)較高。CFU-F的塑料粘附生長性能是MSCs培養(yǎng)的先決條件,在96孔板中通過有限稀釋的方法結(jié)合泊松統(tǒng)計(jì)進(jìn)行CFU-F試驗(yàn),顯示集落形成率CFU-F在高濃度UFH時(shí)中度降低,而在高濃度Enoxaparin(LMWH)時(shí)明顯降低。這些結(jié)果表明高濃度的LMWH減少了CFU-F的形成,這與已報(bào)道的其他研究結(jié)論一致。


通過BODIPY染色的脂肪滴來反映的成脂分化情況,發(fā)現(xiàn)兩種肝素UFH和LMWH在高濃度時(shí),分化成脂細(xì)胞的百分比明顯降低。同樣的,通過茜素紅染色的磷酸鈣沉淀分析成骨分化情況,高濃度肝素也降低了成骨分化的百分比,特別是在脂肪組織來源的MSCs中,UFH肝素高濃度對成脂和成骨分化誘導(dǎo)的負(fù)面影響較為明顯?;谏鲜鼋Y(jié)果,我們現(xiàn)在知道血小板裂解液中添加的抗凝劑肝素在體外MSCs擴(kuò)增的必要性,在購買血小板裂解液后,用戶應(yīng)結(jié)合自己的實(shí)驗(yàn)條件去合理的選擇合適的肝素濃度,而肝素濃度的選擇應(yīng)該在有效防止含血小板裂解液培養(yǎng)基凝膠形成的基礎(chǔ)上盡量降低,以減少肝素對于MSCs的增殖能力、成纖維細(xì)胞體外集落形成單位(CFU-F)、MSCs體外分化等的影響。更多關(guān)于Sexton血小板裂解液相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!哪個品牌的血小板裂解液質(zhì)量好?

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經(jīng)常有客戶會問道人血小板裂解液中的肝素的使用濃度到底如何抉擇呢?添加培養(yǎng)之前有必要花時(shí)間來優(yōu)化下這個肝素濃度參數(shù)嗎?現(xiàn)在小編通過比較了不同濃度的普通肝素(unfractionatedheparinUFH,分子量3000-30000Da)和低分子肝素(LMWH-分子量2000-12000Da)在hPL培養(yǎng)基中培養(yǎng)MSCs的增殖能力、成纖維細(xì)胞體外集落形成單位(colony-formingunit,CFU-F)、免疫表型和體外分化等情況,給大家作解答。從而幫助大家正確使用血小板裂解液。更多關(guān)于Sexton人血小板裂解液的相關(guān)產(chǎn)品問題,歡迎咨詢上海曼博生物!


人源血小板裂解物是一種能有效支持間充質(zhì)干細(xì)胞等人類細(xì)胞生長的高效細(xì)胞培養(yǎng)補(bǔ)充劑。無沉淀血小板裂解液常見問題

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