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普陀區(qū)阿爾茲海默癥疾病動(dòng)物模型建模

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-08-12

該模型能夠幫助我們研究pirb基因在免疫系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)的功能以及下游的調(diào)節(jié)機(jī)制。本發(fā)明的另一目的在于提供上述小鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法。本發(fā)明所采用的第一種技術(shù)方案是:pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型,包括確定pirb基因的待敲入的特異性靶位點(diǎn)grna1和grna2,將pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的內(nèi)含子1內(nèi),所述grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如。本發(fā)明所采用的第二種技術(shù)方案為:pirb基因敲入的小鼠動(dòng)物模型的構(gòu)建方法,具體按照以下步驟實(shí)施:步驟1、基于crispr/cas9技術(shù)構(gòu)建針對(duì)c57bl/6j小鼠rosa26基因的特異性grna1和grna2,grna1的基因序列如seqid**所示,grna2的基因序列如;步驟2、構(gòu)建“cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya”基因盒打靶載體,將打靶載體進(jìn)行線性化處理;步驟3、步驟2中將含有l(wèi)oxp位點(diǎn)打靶載體、步驟1中有活性的grna1和grna2與cas9蛋白共同注射進(jìn)入**小鼠受精卵中,獲得f0代小鼠;步驟4、將步驟3中性成熟的陽(yáng)性f0小鼠分別與野生型鼠交配繁一代,獲得f1代雜合子小鼠,通過(guò)pcr、測(cè)序和southern雜交確定動(dòng)物基因型;步驟5、將步驟4獲得的f1代雜合子小鼠近交獲得f2代純合子小鼠。疾病動(dòng)物模型建模好做嗎?普陀區(qū)阿爾茲海默癥疾病動(dòng)物模型建模

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誘發(fā)性**模型的原理是利用外源性致*因素引起細(xì)胞遺傳特性異常而呈現(xiàn)出異常生長(zhǎng)和高增殖活性,形成**。致*因素主要有化學(xué)性、物理性及生物性致*物,而化學(xué)性致*物(chemicalcarcinogens)**常見,已確知的多達(dá)一千余種,用于誘發(fā)實(shí)驗(yàn)性**的種類亦很多,如苯并薩,申基膽菌、聯(lián)苯胺、亞硝胺類、黃曲霉***類。各種致癢物的致*強(qiáng)度、致*譜等特性相差較大,同一種致*物經(jīng)不同途徑給藥所致**部位或類型可有很大差異。有些化學(xué)性致*物具有明顯的親***或組織特性。因此,實(shí)驗(yàn)工作中應(yīng)根據(jù)需要選用適當(dāng)致*物和致*途徑,并確定其他影響因素或?qū)嶒?yàn)條件?;驹?利用外源性致*物引起細(xì)胞遺傳特性改變,從而出現(xiàn)異常生長(zhǎng)和高增殖活性細(xì)胞形成**。外源性致*物主要有化學(xué)性、物理性(如放射性物質(zhì))及生物性(如誘發(fā)動(dòng)物**的病毒),其中以化學(xué)性致*物**為常用江蘇阿爾茲海默癥疾病動(dòng)物模型建模大量的遺傳變異可作為研究人類疾病的借鑒。

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pirb的mrna和蛋白表達(dá)水平***增加。在cns,pirb是髓鞘抑制因子nogo-a、mag、omgp的受體,參與神經(jīng)元突起芽發(fā)和生長(zhǎng)錐塌陷,抑制神經(jīng)元軸突再生和突觸可塑性。pirb的細(xì)胞外免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域(d3-d6)介導(dǎo)了pirb與nogoa的結(jié)合。近年來(lái)關(guān)于阿爾茨海默病(alzheimer’sdisease,ad)研究還發(fā)現(xiàn),pirb是aβ42寡聚體的高親和力受體,親和力達(dá)到納摩爾水平。pirb的前兩個(gè)細(xì)胞外免疫球蛋白結(jié)構(gòu)域(d1-d2)介導(dǎo)了aβ42寡聚體和pirb的相互作用,導(dǎo)致絲切蛋白(cofilin)信號(hào)通路****組織化學(xué)染色結(jié)果發(fā)現(xiàn)。

是從側(cè)面展示的壓迫元件插入椎間孔的結(jié)構(gòu)示意圖。圖3是術(shù)后大鼠四肢表現(xiàn)情況。圖4是術(shù)后28天大鼠的雙下肢縮足閾值變化曲線圖。圖5是重復(fù)經(jīng)顱磁刺激對(duì)大鼠背根神經(jīng)壓迫模型的影響。具體實(shí)施方式以下通過(guò)具體的實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案做進(jìn)一步的描述。以下的實(shí)施例是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步說(shuō)明,而不是限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例1、模型的制備1、腹腔注射1%戊巴比妥鈉(40mg/kg)麻醉大鼠(220-250g),背部剃毛,碘伏消毒背部皮膚,俯臥位固定于動(dòng)物手術(shù)臺(tái)上,鋪無(wú)菌巾。2、于大鼠腰4到骶1水平左側(cè)作一2-3cm縱行切口,切開皮膚,鈍性分離椎旁肌至橫突上方,暴露腰4椎間孔,腰5椎間孔(椎旁肌可用自制拉鉤保持分離狀態(tài))。3、將2根***端11為4mm,第二端12為2mm,直徑為,第二端12置于腰4椎間孔及腰5椎間孔外。如圖1和2所示,可以看到腰4錐體1、腰5錐體2、腰6錐體3、l型棒10、腰4神經(jīng)根4和腰5神經(jīng)根5的位置關(guān)系。當(dāng)l型棒10的***端11插入腰4錐體1的腰4椎間孔后,會(huì)對(duì)腰4神經(jīng)根4起到壓迫作用;同樣的,當(dāng)l型棒10的***端11插入腰5錐體2的腰5椎間孔后,會(huì)對(duì)腰5神經(jīng)根5起到壓迫作用。從而達(dá)到模擬腰椎間盤突出壓迫神經(jīng)根的目的,制備得到大鼠慢性背根神經(jīng)壓迫模型確定研究疾病目的了解影響疾病發(fā)生的內(nèi)在與外在因素。

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1、動(dòng)物模型名稱:橄欖油聯(lián)合酒精致肝硬化門脈高壓大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雄性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:5周5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:150g-180g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級(jí)1、實(shí)驗(yàn)方法:橄欖油聯(lián)合酒精誘導(dǎo)。按0.3mL/100g體重,背頸部皮下注射50%CCl4的橄欖油溶液,***注射量加倍(6mL/kg體重),2次/周,皮下注射共13周;造模前4周為10%酒精溶液喂養(yǎng)代替飲水,4周后改為30%酒精溶液灌胃(30%酒精溶液灌胃1mL/100g體重,3次/周)。繼續(xù)正常飼養(yǎng)1個(gè)月。實(shí)驗(yàn)結(jié)束測(cè)量門靜脈血流量(PBF)和腸系膜上動(dòng)脈血流量(SMABF)。處死,取肝臟進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn):門靜脈及腸系膜上動(dòng)脈血流量情況與正常對(duì)照組比較均增加,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義肝組織病理可見肝硬化病理改變。臨床上平時(shí)不易見到的疾病可用動(dòng)物隨時(shí)復(fù)制出來(lái)。崇明區(qū)疾病動(dòng)物模型建模說(shuō)明書

如何定義好的小鼠疾病模型?普陀區(qū)阿爾茲海默癥疾病動(dòng)物模型建模

1、動(dòng)物模型名稱:二甲基苯蒽(DMBA)致乳腺*大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬:SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別:雌性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡:6~8周齡5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重:80~100g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境:SPF級(jí)1、實(shí)驗(yàn)方法:二甲基苯并蒽(DMBA)誘導(dǎo)。大鼠按100mg/kg體重于臀部皮下一次性注射10mg/mL的DMBA溶液1次。正常飼養(yǎng)致24周。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn):模型組大鼠第5對(duì)乳房直徑在各測(cè)定時(shí)間點(diǎn)與正常對(duì)照組比較有***性差異;大鼠注射致*劑后乳腺上皮組織逐漸發(fā)生有規(guī)律的變化,乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞首先發(fā)生上皮增生、不典型增生,并逐漸加重,在第9周時(shí)可見同一大鼠的多個(gè)乳腺出現(xiàn)不同程度的導(dǎo)管上皮增生和不典型增生。第13周開始發(fā)現(xiàn)>3mm的乳腺*,至第24周時(shí)70%的大鼠發(fā)生乳腺*,并可見一只大鼠同時(shí)發(fā)生多個(gè)乳腺*,而同一大鼠的其他乳腺亦呈現(xiàn)出不同程度的上皮細(xì)胞增生和不典型增生,提示處于*發(fā)生的不同進(jìn)展階段。普陀區(qū)阿爾茲海默癥疾病動(dòng)物模型建模

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