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福建咨詢(xún)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2024-11-21

這一類(lèi)細(xì)胞增殖用熒光標(biāo)記采用溫和的點(diǎn)擊實(shí)驗(yàn)方案,準(zhǔn)確且兼容各種抗體實(shí)驗(yàn)方案,整個(gè)實(shí)驗(yàn)可在30分鐘內(nèi)完成,在結(jié)果的數(shù)據(jù)豐富程度方面,堪比多重分析方法。此外,該方法適用于培養(yǎng)的細(xì)胞或組織切片,可用流式細(xì)胞術(shù)分析檢測(cè)EdUFlowCytometryKit594(BCK-FC594-100);可進(jìn)行HCS分析或進(jìn)行細(xì)胞裂解液微孔板檢測(cè)EdUHTSKit594(BCK-HTS594-20);也可適用于培養(yǎng)中的細(xì)胞,或通過(guò)注射方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的小動(dòng)物樣本,進(jìn)行體內(nèi)成像分析InVivoEdUClickKit594(BCK594-IV-IM-M)、流式細(xì)胞檢測(cè)或HCS高通量檢測(cè)。(共有488、555、594、647四種熒光染料可選)。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的重要組成部分。福建咨詢(xún)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理

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但該方法由于有放射性污染并且很難實(shí)現(xiàn)單細(xì)胞檢測(cè)而受到很大的限制,隨后逐漸被基于抗體檢測(cè)的BrdU(bromo-deoxyuridine)法所替代。BrdU法步驟繁多,且需要使用BrdU抗體,影響因素較多,穩(wěn)定性比較差。并且由于BrdU法需要使用抗體,有時(shí)會(huì)和其它目的蛋白基于抗體的檢測(cè)相互產(chǎn)生干擾。EdU法基于EdU摻入和后續(xù)的點(diǎn)擊反應(yīng),無(wú)需使用抗體、操作便捷、檢測(cè)靈敏度高,是一種在BrdU法基礎(chǔ)上升級(jí)換代的新方法,將會(huì)逐步取代BrdU法。MTT法(C0009)、WST-1法(C0035、C0036)、CCK-8法(C0037、C0038、C0039、C0040、C0041、C0042、C0043、C0046)和CellTiter-Lumi?化學(xué)發(fā)光法(C0065、C0068)都是基于細(xì)胞活性的細(xì)胞增殖檢測(cè)方法,能檢測(cè)到細(xì)胞的總體增殖效果,但無(wú)法檢測(cè)到單個(gè)的增殖細(xì)胞。湖北提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒公司EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的特點(diǎn)是什么?上海東寰告訴您。

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EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)和BrdU細(xì)胞增殖檢測(cè)的對(duì)比。小分子化合物AndyFluor?azide與EdU之間的點(diǎn)擊化學(xué)(ClickChemistry)反應(yīng)不需要DNA變性,就可以進(jìn)行高效快速的細(xì)胞增殖檢測(cè)分析,該反應(yīng)不受雙鏈DNA中堿基對(duì)的影響,因此客戶(hù)了BrdU摻入法的弊端。圖2.使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒對(duì)細(xì)胞和組織的染色效果。使用10μMEdU處理A549細(xì)胞2小時(shí),然后分別使用AndyFluor?488azide(綠色,上圖)、AndyFluor?594azide(紅色,中間圖)檢測(cè)細(xì)胞增殖活性,使用DAPI進(jìn)行復(fù)染(藍(lán)色)。腹腔注射EdU到小鼠體內(nèi)(每公斤小鼠注射5mgEdU),分別于0、12、24小時(shí)之后取小鼠腸組織,制成切片用AndyFluor?488azide(綠色,**下圖)檢測(cè)細(xì)胞的增殖情況,使用DAPI進(jìn)行復(fù)染(藍(lán)色)。

EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒BeyoClick?EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒(DAB法)(BeyoClick?EdUCellProliferationKitwithDAB),是一種基于DNA合成過(guò)程中胸腺嘧啶脫氧核苷(thymidine)類(lèi)似物EdU(5-ethynyl-2-deoxyuridine)的摻入,并通過(guò)隨后的點(diǎn)擊反應(yīng)(Clickreaction)使EdU被生物素(Biotin)所標(biāo)記,然后加入的辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記鏈霉親和素(HRP-Streptavidin)與生物素結(jié)合,再然后通過(guò)DAB顯色,從而實(shí)現(xiàn)簡(jiǎn)單、快速、高靈敏地檢測(cè)細(xì)胞增殖的試劑盒。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的發(fā)展前景如何呢?

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該方法無(wú)需DNA變性,無(wú)需抗原修復(fù),無(wú)需抗原抗體反應(yīng),簡(jiǎn)單、靈敏、快速、準(zhǔn)確,適合各種細(xì)胞系的細(xì)胞增殖檢測(cè),尤其適用于各種細(xì)胞系的高通量篩選實(shí)驗(yàn),如在藥物篩選中檢測(cè)加藥后細(xì)胞增殖變化。EdU方法無(wú)需DNA變性,完全適用于各種顯微成像技術(shù),在10X,20X,40X都能得到很好的成像效果。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性操作,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn)。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的原理是什么?上海東寰告訴您。河北正規(guī)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理

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本試劑盒使用便捷、兼容性好。本試劑盒只需常用的多聚甲醛固定和TritonX-100穿透,就可以使疊氮化物探針有效進(jìn)入細(xì)胞并發(fā)生點(diǎn)擊反應(yīng),不會(huì)影響細(xì)胞形態(tài),不會(huì)影響基于抗體的免疫熒光和免疫組化檢測(cè),也不會(huì)影響DNA的熒光染色(如PI染色檢測(cè)細(xì)胞周期、DAPI或Hoechst染料檢測(cè)細(xì)胞核)。而B(niǎo)rdU法為了使大分子的BrdU抗體進(jìn)入細(xì)胞并與DNA上的BrdU結(jié)合,需要對(duì)雙鏈DNA進(jìn)行變性處理(如酸變性、熱變性或者DNase消化等),這種變性可能會(huì)影響細(xì)胞形態(tài),影響后續(xù)的免疫熒光和免疫組化檢測(cè)、DNA的熒光染色等。BrdU法和BeyoClick?EdU法檢測(cè)原理的比較參見(jiàn)圖2。福建咨詢(xún)EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒原理

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