羥基脲(Hydroxyurea)為DNA合成抑制劑，經(jīng)過10mM羥基脲提0min處理的細(xì)胞，綠色熒光陽性的細(xì)胞幾乎完全消失，因此常被用作EdU實(shí)驗(yàn)的陰性對(duì)照。配制好的Click-iTAdditiveSolution請(qǐng)根據(jù)每次用量適當(dāng)分裝后-20℃保存，避免反復(fù)凍融。Click-iTAdditiveSolution融化后有白色物質(zhì)析出為正?，F(xiàn)象，請(qǐng)上下顛倒幾次，待全部溶解后使用。溶液一旦呈現(xiàn)棕色，則說明有效成分降解，不能再使用。皂苷促滲液可以用于全血及含紅細(xì)胞的細(xì)胞懸液，以及其他含多種細(xì)胞類型的混合細(xì)胞懸液的通透。這種促滲液可以在裂解紅細(xì)胞的同時(shí)，維持白細(xì)胞的光散射特性。本試劑盒做動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)可能需要更多的EdU，請(qǐng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求用合適稀釋液稀釋后使用。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的運(yùn)用領(lǐng)域有哪些？福建哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒供應(yīng)商

EdU細(xì)胞增殖分析試劑采用click化學(xué)技術(shù)，可為新合成的DNA檢測(cè)與定量提供比傳統(tǒng)BrdU方法更的替代物。當(dāng)在DNA合成過程中摻入修飾的核苷EdU（5-乙炔基-2-脫氧尿苷）時(shí)，可以通過快速的“click化學(xué)”反應(yīng)檢測(cè)到它，并且對(duì)細(xì)胞的破壞作用小。點(diǎn)擊化學(xué)相比于BrdU具有更簡(jiǎn)便、更快速、更易操作的優(yōu)點(diǎn)。與使用溴脫氧尿苷(BrdU)檢測(cè)法不同，Click-iTEdU檢測(cè)法不是基于抗體，因此并不需要DNA變性以檢測(cè)摻入的核苷。此外，Click-iTEdU可以與R-PE、R-PEtandems和GFP等熒光蛋白復(fù)用提高效力。當(dāng)您平行比較這些方法時(shí)，Click-iTEdU和InvitrogenClick-iTPlusEdU在測(cè)定細(xì)胞增殖方面的優(yōu)勢(shì)是顯而易見的。山東如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒哪家好EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒生產(chǎn)廠家。

EdU染料只有BrdU抗體的1/500，在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散，無需DNA變性（酸解、熱解、酶解等），可有效避免樣品損傷，而且無需抗原抗體反應(yīng)，能在細(xì)胞和組織水平更準(zhǔn)確地反映DNA復(fù)制活性。EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)：EdU（5-Ethynyl-2’-deoxyuridine）是一種胸腺嘧啶核苷類似物，能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶（T）滲入正在復(fù)制的DNA分子中，通過基于EdU與Apollo熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測(cè)細(xì)胞DNA復(fù)制活性，適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究，尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。與BrdU檢測(cè)方法相比，EdU檢測(cè)方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。

EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng)，把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面，這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測(cè)出DNA復(fù)制活性，廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。傳統(tǒng)的免疫熒光染色(BrdU)檢測(cè)方法需要DNA變性、抗原修復(fù)、抗原抗體過夜孵育等復(fù)雜繁瑣的操作步驟。而EdU檢測(cè)方法不需要?jiǎng)×业腄NA變性，只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理，能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識(shí)別位點(diǎn)，操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似，而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散，無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)，可有效避免樣品損傷，而且無需抗原抗體反應(yīng)，能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性。上海東寰告訴您EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒的運(yùn)用方式。

細(xì)胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細(xì)胞固定液，室溫培養(yǎng)30分鐘，棄固定液；(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸，搖床孵育5分鐘，以中和過量的多聚甲醛；(c)棄甘氨酸溶液，每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細(xì)胞通透液，室溫通透10分鐘，棄細(xì)胞通透溶液；(e)每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；該產(chǎn)品是采用成像檢測(cè)方法對(duì)貼壁細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè)，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細(xì)胞可在孵育EdU后進(jìn)行細(xì)胞涂片處理，固定后再采用貼壁細(xì)胞的染色流程進(jìn)行檢測(cè)。也可以應(yīng)用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)。有哪些領(lǐng)域需要使用EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒？江西品質(zhì)好的EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒廠家

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細(xì)胞活性的細(xì)胞增殖檢測(cè)方法，能檢測(cè)到細(xì)胞的總體增殖效果，但無法檢測(cè)到單個(gè)的增殖細(xì)胞。這幾種方法盡管都不是檢測(cè)DNA合成的，但被用于替代[3H]thymidine摻入法。CFDASE法(C0051、C1031)基于細(xì)胞熒光示蹤的原理能檢測(cè)到單個(gè)的增殖細(xì)胞，但由于每增殖一次熒光減弱一半，在熒光顯微鏡下較難區(qū)分熒光減弱一半的細(xì)胞，檢測(cè)靈敏度不是很高，通常適用于流式細(xì)胞儀檢測(cè)。在進(jìn)行科學(xué)研究時(shí)，上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測(cè)方法。福建哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒供應(yīng)商