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湖北哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒原理

來源: 發(fā)布時間:2022-01-21

建議染色完成后立即進(jìn)行熒光顯微鏡拍照觀察;如果條件限制,請于4°C條件下避光濕潤保存3天之內(nèi)完成拍照。若為細(xì)胞爬片或涂片,可使用抗熒光淬滅封片劑進(jìn)行封片后于4°C條件下保存及拍照檢測。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性,只需溫和的細(xì)胞固定化和透化處理,能夠較好地保護(hù)細(xì)胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細(xì)胞內(nèi)抗原識別位點,操作步驟更加快速、靈敏和準(zhǔn)確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒對如今市場的影響。湖北哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒原理

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EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因為這樣可能會影響細(xì)胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細(xì)胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時,棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長狀態(tài);2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留湖南如何使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒優(yōu)勢有哪些領(lǐng)域需要使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒?

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EdU只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)更容易擴(kuò)散,不需要嚴(yán)格的樣品變性(酸解、熱解、酶解)處理,有效地避免了樣品損傷,有助于在組織、的整體水平上觀測細(xì)胞增殖的真實情況,具有更高的靈敏度和更快的檢測速度。AdrianSalic特別強(qiáng)調(diào):“與傳統(tǒng)的免疫熒光染色不同,EdU反應(yīng)能在幾分鐘內(nèi)完成,且不需要進(jìn)行嚴(yán)格的樣品變性處理,使得組織成像更簡單易行?!奔?xì)胞增殖檢測方法基于EdU與Apollo?熒光染料的完美結(jié)合準(zhǔn)確檢測新合成的DNA,簡單,快速,準(zhǔn)確。這種檢測方法非??焖伲抑恍韬唵蔚膸讉€步驟,因此也適用于高通量篩選試驗,如在藥物篩選中檢測加藥后細(xì)胞的活力

細(xì)胞增殖能力的檢測是評估細(xì)胞活性、基因毒性和抗藥物效果等的基本方法。公認(rèn)的精確的檢測細(xì)胞增殖的方法是直接檢測細(xì)胞中DNA的合成。初使用的通過檢測DNA合成來檢測細(xì)胞增殖的方法是放射性標(biāo)記核苷摻入法,如氚標(biāo)記胸腺嘧啶脫氧核苷([3H]thymidine)摻入法。細(xì)胞活性的細(xì)胞增殖檢測方法,能檢測到細(xì)胞的總體增殖效果,但無法檢測到單個的增殖細(xì)胞。這幾種方法盡管都不是檢測DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine摻入法。上述這些基于細(xì)胞活性或CFDASE的方法可以作為EdU法的補(bǔ)充性檢測方法使用EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒的好處有哪些?

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通過基于EdU與熒光染料的特異性共軛反應(yīng),把熒光集團(tuán)標(biāo)記到新合成的含有EdU的DNA上面,這樣就可以進(jìn)行高效快速的檢測出DNA復(fù)制活性,廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長與發(fā)育、DNA損傷修復(fù)等方面的研究。EdU標(biāo)記(a)將細(xì)胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基;(b)提前將2xEdU標(biāo)記培養(yǎng)基預(yù)熱,然后等體積加入到細(xì)胞原有培養(yǎng)基中,獲得lxEdU溶液,其中EdU的終濃度為10uM;注:1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基,因為這樣可能會影響細(xì)胞增殖的速度;2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配,用量以沒過細(xì)胞為宜;(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細(xì)胞2小時,棄培養(yǎng)基;注:1)培養(yǎng)時間取決于細(xì)胞的增殖速度和生長狀態(tài);2)大多數(shù)**細(xì)胞以及粘附細(xì)胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細(xì)胞兩次,毎次5分鐘,以除去未摻入DNA的EdU殘留。EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒哪家好?上海東寰告訴您!河南咨詢EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒

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與BrdU檢測方法相比,EdU檢測方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU檢測染料只有BrdU抗體大小的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)即可有效檢測,可有效避免樣品損傷,在細(xì)胞和組織水平能更準(zhǔn)確地反映細(xì)胞增殖等現(xiàn)象。細(xì)胞增殖伴隨著多細(xì)胞生物生命體運作的一生,越來越多的研究者們已經(jīng)把目光集中到了細(xì)胞增殖檢測,關(guān)于細(xì)胞增殖檢測的方法也在不斷更新。EdU法檢測試劑盒是Brdu方法的革命性突破。EdU(5-溴-2-脫氧尿嘧啶)試劑盒是一種嘧啶類似物,可以在DNA合成期整合入DNA雙鏈湖北哪家公司提供EdU細(xì)胞增殖檢測試劑盒原理

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