細胞增殖的能力是評價細胞、代謝、生理、病理狀況、細胞活性、基因毒性等的重要指標之一，細胞增殖雖然與多種因素有關(guān)，比如細胞代謝活性、與細胞增殖相關(guān)的蛋白表達、ATP的濃度等等，但是檢測細胞增殖現(xiàn)象的*直接*準確的方法就是用熒光探針直接檢測遺傳物質(zhì)DNA的合成，這種方法是研究細胞增殖、信號通路、DNA修復(fù)及分化等等方向常用的方法。目前，基于DNA的合成原理，人們*初開發(fā)了工具是BrdU染色法,但是這種方法操作耗時長，往往需要過夜處理細胞，操作繁雜，比如需要DNA變性、抗原修復(fù)以及抗原抗體反應(yīng)等操作，后來在BrdU的基礎(chǔ)上，人們開發(fā)出了**性的探針--EdU，這種方法不需要繁雜的操作，節(jié)約時間，且反應(yīng)更靈敏和準確。并且與MTT/WST-1或者CCK-8這種依靠化學顯色法只能得到一個折線圖的方法相比上海東寰告訴您使用EdU細胞增殖檢測試劑盒的便捷性。天津EdU細胞增殖檢測試劑盒哪家好

EdU標記(a)將細胞完全培養(yǎng)基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU標記培養(yǎng)基；(b)提前將2xEdU標記培養(yǎng)基預(yù)熱，然后等體積加入到細胞原有培養(yǎng)基中，獲得lxEdU溶液，其中EdU的終濃度為10uM；注：1)我們不建議替換全部培養(yǎng)基，因為這樣可能會影響細胞增殖的速度；2)配置好的培養(yǎng)基建議現(xiàn)用現(xiàn)配，用量以沒過細胞為宜；(c)每孔加入300ul含EdU培養(yǎng)基孵育細胞2小時，棄培養(yǎng)基；注：1)培養(yǎng)時間取決于細胞的增殖速度和生長狀態(tài)；2)大多數(shù)**細胞以及粘附細胞系均可采用2小時的孵育時間(d)以lxPBS清洗細胞兩次，毎次5分鐘，以除去未摻入DNA的EdU殘留。注：貼壁不牢的細胞可降低清洗強度湖北正規(guī)EdU細胞增殖檢測試劑盒公司EdU細胞增殖檢測試劑盒在社會上的重要性。

細胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛細胞固定液，室溫培養(yǎng)30分鐘，棄固定液；(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸，搖床孵育5分鐘，以中和過量的多聚甲醛；(c)棄甘氨酸溶液，每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100細胞通透液，室溫通透10分鐘，棄細胞通透溶液；(e)每孔加入300ulPBS洗液，室溫清洗5分鐘；該產(chǎn)品是采用成像檢測方法對貼壁細胞進行檢測，適用于熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等儀器。非貼壁細胞可在孵育EdU后進行細胞涂片處理，固定后再采用貼壁細胞的染色流程進行檢測。也可以應(yīng)用于流式細胞儀檢測

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建議染色完成后立即進行熒光顯微鏡拍照觀察；如果條件限制，請于4°C條件下避光濕潤保存3天之內(nèi)完成拍照。若為細胞爬片或涂片，可使用抗熒光淬滅封片劑進行封片后于4°C條件下保存及拍照檢測。而EdU檢測方法不需要劇烈的DNA變性，只需溫和的細胞固定化和透化處理，能夠較好地保護細胞形態(tài)、DNA整體結(jié)構(gòu)及細胞內(nèi)抗原識別位點，操作步驟更加快速、靈敏和準確。EdU與胸腺嘧啶(T)結(jié)構(gòu)非常相似，而EdU染料大小只有BrdU抗體的1/500,在細胞內(nèi)很容易擴散，無需DNA變性(酸解、熱解、酶解等)，可有效避免樣品損傷，而且無需抗原抗體反應(yīng)，能在細胞和組織水平更快速便捷地反映DNA復(fù)制活性上海東寰告訴您什么是EdU細胞增殖檢測試劑盒？上海哪一家EdU細胞增殖檢測試劑盒購買

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