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微生物菌種保藏注意事項(xiàng)
摘要：一般利用菌種的休眠體(孢子、芽孢等)，創(chuàng)造有利于休眠狀態(tài)的環(huán)境條件，如低溫、干燥、隔絕空氣或氧氣、缺乏營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等，使菌體的代謝活性處于比較低狀態(tài)，同時(shí)也應(yīng)考慮到方法經(jīng)濟(jì)、簡(jiǎn)便
菌種保藏主要是根據(jù)菌種的生理、生化特性，人工創(chuàng)造條件使菌體的代謝活動(dòng)處于休眠狀態(tài)。保藏時(shí)，一般利用菌種的休眠體(孢子、芽孢等)，創(chuàng)造有利于休眠狀態(tài)的環(huán)境條件，如低溫、干燥、隔絕空氣或氧氣、缺乏營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等，使菌體的代謝活性處于比較低狀態(tài)，同時(shí)也應(yīng)考慮到方法經(jīng)濟(jì)、簡(jiǎn)便。由于微生物種類繁多，代謝特點(diǎn)各異，對(duì)各種外界環(huán)境因素的適應(yīng)能力不一致，一個(gè)菌種選用何種方法保藏較好，要根據(jù)具體情況而定。
菌種保藏要獲得較好的效果，需注意如下三個(gè)方面：
1、菌種在保藏前所處的狀態(tài)
絕大多數(shù)微生物的菌種均保藏其休眠體，如孢子或芽孢。保藏用的孢子或芽孢等要采用新鮮斜面上生長(zhǎng)豐滿的培養(yǎng)物。菌種斜面的培養(yǎng)時(shí)間和培養(yǎng)溫度影響其保藏質(zhì)量。培養(yǎng)時(shí)間過(guò)短，保存時(shí)容易死亡；培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)，生產(chǎn)性能衰退。一般以稍低于適生長(zhǎng)溫度下培養(yǎng)至孢子成熟的菌種進(jìn)行保存，效果較好。
2、菌種保藏所用的基質(zhì)
斜面低溫保藏所用的培養(yǎng)基，碳源比例應(yīng)少些，營(yíng)養(yǎng)成分貧乏些較好，否則易產(chǎn)生酸，或使代謝活動(dòng)增強(qiáng)，影響保藏時(shí)間。砂土管保藏需將砂和土充分洗凈，以防其中含有過(guò)多的有機(jī)物，影響菌的代謝或經(jīng)滅菌后產(chǎn)生一些有毒的物質(zhì)。冷凍干燥所用的保護(hù)劑，有不少經(jīng)過(guò)加熱就會(huì)分解或變性的物質(zhì)，如還原糖和脫脂乳，過(guò)度加熱往往形成有毒物質(zhì)，滅菌時(shí)應(yīng)特別注意。
3、操作過(guò)程對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)的損害
冷凍干燥時(shí)，凍結(jié)速度緩慢易導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)形成較大的冰晶，對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)造成機(jī)械損傷。真空干燥程度也將影響細(xì)胞結(jié)構(gòu)，加入保護(hù)劑就是為了盡量減輕冷凍干燥所引起的對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)的破壞。細(xì)胞結(jié)構(gòu)的損傷不僅使菌種保藏的死亡率增加，而且容易導(dǎo)致菌種變異，造成菌種性能衰退。
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