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高鹽核酸酶價(jià)格優(yōu)惠

來源: 發(fā)布時(shí)間:2025-06-11

跟其他類型的核酸酶一樣,SAN HQ高鹽核酸酶和M-SAN HQ中鹽核酸酶的滅活方法有很多,分為可逆滅活及不可逆滅活。金屬離子螯合劑如EDTA會可逆抑制兩者的活性,加入的EDTA濃度一般是溶液中Mg2+濃度的2倍左右即可完全抑制活性;后續(xù)補(bǔ)加過量的Mg2+即可恢復(fù)核酸酶活性。加熱、還原劑(如DTT)、咪唑、甘油及表面活性劑(如高于15%濃度的Triton X-100、SDS、尿素等)等都可以使其不可逆失活。在生物工藝流程,需要結(jié)合上下游應(yīng)用需要選擇合適的方法去除或滅活核酸酶。在如抗體、病毒載體藥物等的生產(chǎn)工藝流程中,核酸雜質(zhì)的去除至關(guān)重要。高鹽核酸酶價(jià)格優(yōu)惠

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AAV病毒滴度通常分為物理滴度和infection滴度。物理滴度一般是指基因組滴度或者衣殼滴度。在測定AAV的含量時(shí),通常采用基因組滴度或者衣殼滴度作為單位,其中基因組滴度為攜帶基因組的AAV的濃度,衣殼滴度為AAV物理顆粒的濃度。基因組滴度一般采用qPCR、ddPCR、染料法、UV/Vis等方法來測定;衣殼滴度主要是通過ELISA、HPLC等方法來測定。AAV基因組滴度檢測的關(guān)鍵在于盡可能徹底去除AAV衣殼外的HCD殘留,減少污染核酸對qPCR或ddPCR的影響。經(jīng)典方法是加入常規(guī)核酸酶(如Dnase I、Benzonase等)消化AAV衣殼外的HCD殘留,然后加入Proteinase K破碎病毒衣殼,進(jìn)行后續(xù)檢測。經(jīng)過對比發(fā)現(xiàn),用SAN HQ高鹽核酸酶替代常規(guī)核酸酶處理AAV病毒,能夠更高效去除衣殼外的核酸殘留,qPCR或ddPCR結(jié)果重復(fù)性更高、更穩(wěn)定。寧波倍篤高鹽核酸酶代理商SAN HQ高鹽核酸酶是用Pichia pastoris表達(dá)的重組非特異性內(nèi)切核酸酶。

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市售的SAN HQ高鹽核酸酶有三個(gè)規(guī)格,分別是25kU、500kU及5MU,分別滿足研發(fā)初期及大規(guī)模生產(chǎn)各階段的要求。通過SDS-PAGE檢測蛋白純度在98%以上?;贏rcticZymes Technologies的30年的酶學(xué)開發(fā)及大規(guī)模生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn),SAN HQ的生產(chǎn)體系穩(wěn)定,產(chǎn)品純度高,批次一致性好,無蛋白酶活性。廠家開發(fā)出特異的緩沖液體系,使SAN HQ保存起來更加穩(wěn)定,-15℃ - -30℃條件下有效期3年左右。研究數(shù)據(jù)表明,經(jīng)過5-6次的反復(fù)凍融,SAN HQ高鹽核酸酶活性沒有明顯變化。

綜合腺相關(guān)病毒AAV制備的三個(gè)工藝階段介紹,可以看出下游處理可以占病毒生產(chǎn)總成本的很大一部分,而且難度也是非常大,尤其是純化過程。原因之一是由于有超過100種不同血清型的變體AAV衣殼,不同血清型的AAV蛋白存在差異。因此,各種血清型的表面特性增加AAV純化難度。原因之二是:針對工藝和產(chǎn)品相關(guān)的雜質(zhì)(包括宿主細(xì)胞物質(zhì),DNA和空衣殼),缺乏一個(gè)有效和可重復(fù)的平臺方法,尤其是來從空衣殼中分離出完整的衣殼。為了解決以上問題,國內(nèi)外大的藥企公司都致力于純化新產(chǎn)品的開發(fā),以期達(dá)到:(1)實(shí)現(xiàn)病毒顆粒的分離(2)減少產(chǎn)品相關(guān)雜質(zhì)(3)保持效力和產(chǎn)量的目標(biāo)。SAN HQ提高核酸污染去除效率,同時(shí)提高目標(biāo)產(chǎn)物產(chǎn)量。

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在生物工藝流程中,需要使用核酸酶去除終產(chǎn)品中的核酸污染,而核酸酶作為外源成份,也需要在生產(chǎn)流程中去除。核酸酶去除工藝包括熱滅活法、酶抑制劑、離子交換和親合層析法等。AAV衣殼亞種之間因表面電荷的差異導(dǎo)致不同的的等電點(diǎn),——空衣殼pI在6.3左右,包裝了完整基因組DNA后的病毒顆粒pI大致為5.9。而來自于S.marcescens的全能核酸酶pI 6.85左右,SAN HQ高鹽核酸酶pI 9.6左右。因此,在同樣的條件下,從AAV溶液中去除SAN HQ高鹽核酸酶比去除Benzonase全能核酸酶更容易、更徹底。SAN HQ是生物工藝流程中去除核酸污染的理想選擇。臺州70921-202高鹽核酸酶銷售電話

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SANHQ(生物工藝級)是用Pichiapastoris表達(dá)的重組非特異性內(nèi)切核酸酶,廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)工藝流程中,有效去除核酸污染。該酶在高鹽濃度下具有良好的活性,應(yīng)用在生產(chǎn)工藝流程中提高去除效率和目標(biāo)產(chǎn)物產(chǎn)量。在生物制品生產(chǎn),如AAV載體及腺病毒載體疫苗生產(chǎn)中,宿主細(xì)胞DNA殘留是關(guān)鍵質(zhì)量參數(shù)之一。宿主細(xì)胞DNA主要以染色質(zhì)形態(tài)存在,其中的組蛋白通過離子相互作用及疏水相互作用與DNA緊密結(jié)合,從而影響DNA的檢測與酶切處理。SAN HQ(生物工藝級)高鹽核酸酶高鹽核酸酶價(jià)格優(yōu)惠

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