**技術(shù)參數(shù):決定實(shí)驗(yàn)精度與可靠性:1. 溫控性能控溫范圍:需覆蓋 4-100℃,滿足變性(94-96℃)、退火(50-65℃)、延伸(72℃)全流程需求??販鼐龋骸?.1-0.5℃為優(yōu),精度不足可能導(dǎo)致引物非特異性結(jié)合或酶活性降低(如退火溫度波動(dòng)易引發(fā)假陽(yáng)性)。溫度均勻性:各孔位溫差≤0.5℃,若均勻性差,同批次樣本擴(kuò)增效率可能不一致,影響結(jié)果重復(fù)性。升降溫速率:常規(guī) PCR 儀速率為 3-8℃/s,高速機(jī)型可達(dá) 10℃/s 以上,可縮短單循環(huán)時(shí)間(如 30 個(gè)循環(huán)從 2 小時(shí)壓縮至 1 小時(shí))。2. 反應(yīng)模塊兼容性樣本通量:低通量:?jiǎn)喂堋? 聯(lián)管(適合少量樣本,如科研初篩、臨床單樣本檢測(cè));中高通量:96 孔板(常規(guī)批量檢測(cè))、384 孔板(超高通量,如基因芯片預(yù)處理)。梯度功能:梯度 PCR 儀可在同一模塊設(shè)置 3-5℃的溫度梯度(如 55-60℃),用于優(yōu)化引物退火溫度,減少預(yù)實(shí)驗(yàn)次數(shù)。柏恒RePure系列PCR儀在擴(kuò)增效果方面表現(xiàn)優(yōu)異,具有高靈敏度和穩(wěn)定性,能夠?qū)崿F(xiàn)快速、高效的DNA擴(kuò)增。南京96孔基因擴(kuò)增儀PCR儀
醫(yī)療與臨床診斷:疾病檢測(cè)的 “金標(biāo)準(zhǔn)”1. 病原體快速檢測(cè)場(chǎng)景:病毒性疾?。海〝U(kuò)增 N 基因 / ORF1ab 基因)、乙肝病毒(HBV-DNA 檢測(cè))、HPV 分型(L1 基因擴(kuò)增);細(xì)菌性疾?。航Y(jié)核分枝桿菌(IS6110 基因檢測(cè))、淋球菌(隱蔽質(zhì)?;驍U(kuò)增)。技術(shù)價(jià)值:相比傳統(tǒng)培養(yǎng)法,PCR 可縮短檢測(cè)時(shí)間(如結(jié)核檢測(cè)從 2-4 周縮短至 4 小時(shí)),且適用于微量樣本(如腦脊液、拭子)。設(shè)備需求:高通量 96 孔板 PCR 儀,部分場(chǎng)景需搭配核酸提取儀實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化檢測(cè)。2. 遺傳疾病篩查場(chǎng)景:產(chǎn)前診斷(如唐氏綜合征 21 號(hào)染色體三體檢測(cè))、新生兒遺傳?。倚岳w維化基因 F508del 突變檢測(cè))。技術(shù)價(jià)值:通過(guò)擴(kuò)增目標(biāo)突變位點(diǎn),結(jié)合測(cè)序或酶切分析,實(shí)現(xiàn)疾病的早期確診(如脊髓性肌萎縮癥 SMN1 基因缺失檢測(cè))。無(wú)錫定性基因擴(kuò)增儀PCR儀直銷價(jià)RePure-T非常適合需要調(diào)節(jié)多個(gè)樣本和多個(gè)溫度設(shè)置的研究,例如基因擴(kuò)增、變異檢測(cè)和生物標(biāo)志物發(fā)現(xiàn)等領(lǐng)域。
1. DNA 指紋分析應(yīng)用:擴(kuò)增人類基因組中的短串聯(lián)重復(fù)序列(STR),如 D21S11、TH01 等位點(diǎn),用于個(gè)體識(shí)別、親子鑒定和犯罪現(xiàn)場(chǎng)證據(jù)分析。案例:通過(guò) PCR - 毛細(xì)管電泳技術(shù)構(gòu)建 DNA 圖譜,比對(duì)嫌疑人和現(xiàn)場(chǎng)生物樣本(如血跡、毛發(fā))。2. 物種鑒定應(yīng)用:擴(kuò)增動(dòng)物或植物的特定基因(如細(xì)胞色素 C 氧化酶亞基 I 基因,COI),鑒別瀕危物種或非法貿(mào)易中的生物來(lái)源。案例:檢測(cè)**象牙中的大象 DNA,打擊野生動(dòng)物非法交易。1. 食品微生物檢測(cè)應(yīng)用:檢測(cè)食品中的致病菌(如沙門氏菌、大腸桿菌 O157:H7)或過(guò)敏原基因(如花生、大豆過(guò)敏原蛋白基因),保障食品安全。案例:通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量 PCR(qPCR)快速篩查即食食品中的李斯特菌。2. 環(huán)境微生物監(jiān)測(cè)應(yīng)用:擴(kuò)增環(huán)境樣本(如水、土壤)中的微生物 16S rRNA 基因(細(xì)菌)或 18S rRNA 基因(***),分析微生物群落多樣性或檢測(cè)特定污染物降解菌。案例:監(jiān)測(cè)污水處理廠中脫氮菌的豐度,評(píng)估處理效率。
1. **參數(shù)溫度均勻性:各孔位溫度差異≤0.5℃,避免擴(kuò)增效率不一致。熱循環(huán)重復(fù)性:多次運(yùn)行同一程序時(shí),溫度曲線重合度高,保證實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性。兼容性:支持不同規(guī)格反應(yīng)管(如 0.2mL 管、96 孔板)和試劑體系(如 Taq 酶、高保真酶)。2. 選型建議科研場(chǎng)景:梯度 PCR 儀 + 低通量模塊,便于優(yōu)化反應(yīng)條件。臨床檢測(cè):高通量普通 PCR 儀或 qPCR 儀,兼顧效率和定量需求。野外或現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè):便攜式 PCR 儀(如基于微流控芯片,電池供電),適合應(yīng)急檢測(cè)(如**防控)。RePure-(D)B梯度功能的應(yīng)用可有效減少實(shí)驗(yàn)中的試錯(cuò)次數(shù),節(jié)省實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
儀器操作設(shè)置放置樣品板:將密封好的 96 孔板平穩(wěn)放入 qPCR 儀的樣品槽,確??孜粚?duì)齊,蓋緊儀器艙門。程序設(shè)置(通過(guò)儀器軟件):預(yù)變性:通常 95℃,30 秒 - 5 分鐘(熱啟動(dòng)酶,使模板完全變性)。循環(huán)階段(變性→退火→延伸,同時(shí)采集熒光):變性:95℃,5-15 秒(使 DNA 解鏈)。退火 / 延伸:根據(jù)引物 Tm 值設(shè)置溫度(一般 55-65℃),20-30 秒(引物結(jié)合并延伸,熒光染料 / 探針在此階段發(fā)光)。循環(huán)次數(shù):通常 35-40 次(根據(jù)模板濃度調(diào)整)。溶解曲線(可選):用于驗(yàn)證擴(kuò)增產(chǎn)物特異性,程序?yàn)?95℃ 15 秒→60℃ 1 分鐘→緩慢升溫至 95℃,同時(shí)連續(xù)采集熒光(觀察是否有單一峰,排除非特異性擴(kuò)增或引物二聚體)。熒光通道選擇:根據(jù)使用的熒光染料 / 探針類型選擇(如 SYBR GreenⅠ 對(duì)應(yīng) FAM 通道,TaqMan 探針根據(jù)標(biāo)記熒光選擇)。樣本信息錄入:在軟件中標(biāo)記樣品類型(如標(biāo)準(zhǔn)品、未知樣本、陰性對(duì)照、空白對(duì)照)及孔位對(duì)應(yīng)關(guān)系。RePure系列PCR儀能快速找到合適的退火溫度,顯著提高了實(shí)驗(yàn)的成功率和可靠性。南京熒光基因擴(kuò)增儀PCR儀價(jià)格實(shí)惠
RePure-(D)B采用先進(jìn)的PID溫控技術(shù),可精確控制反應(yīng)溫度,保證PCR反應(yīng)的穩(wěn)定性和可靠性。南京96孔基因擴(kuò)增儀PCR儀
PCR儀是利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù),在體外對(duì)特定DNA片段進(jìn)行大量擴(kuò)增的儀器。其原理是通過(guò)高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個(gè)周期,循環(huán)進(jìn)行,使目的DNA得以迅速擴(kuò)增。具體過(guò)程如下:高溫變性:將待擴(kuò)增的DNA雙鏈在高溫(90-95℃)下解鏈,形成單鏈DNA模板。低溫退火:降低溫度(一般為50-65℃),使引物與單鏈DNA模板特異性結(jié)合。適溫延伸:在DNA聚合酶的作用下,以引物為起始點(diǎn),在適宜溫度(一般為72℃左右)下,以dNTP為原料,沿著模板鏈合成新的DNA鏈。南京96孔基因擴(kuò)增儀PCR儀