PCR儀是利用聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)技術(shù),在體外對特定DNA片段進行大量擴增的儀器。其原理是通過高溫變性、低溫退火及適溫延伸等幾步反應(yīng)組成一個周期,循環(huán)進行,使目的DNA得以迅速擴增。具體過程如下:高溫變性:將待擴增的DNA雙鏈在高溫(90-95℃)下解鏈,形成單鏈DNA模板。低溫退火:降低溫度(一般為50-65℃),使引物與單鏈DNA模板特異性結(jié)合。適溫延伸:在DNA聚合酶的作用下,以引物為起始點,在適宜溫度(一般為72℃左右)下,以dNTP為原料,沿著模板鏈合成新的DNA鏈。RePure-A配備的人性化操作界面和直觀的軟件系統(tǒng)使得用戶能夠輕松設(shè)置實驗程序。江蘇三槽基因擴增儀PCR儀品牌
在基因功能、調(diào)控機制等基礎(chǔ)研究中,qPCR是不可或缺的工具,主要用于基因表達水平的定量分析?;虮磉_分析:通過定量比較不同組織、不同發(fā)育階段或不同處理條件下目的基因的mRNA表達量,探究基因的功能及調(diào)控機制。例如,研究某種藥物對細胞中特定基因表達的影響,或比較正常組織與病變組織中基因表達的差異?;蚍中团cSNP分析:結(jié)合特異性探針或引物,可對單核苷酸多態(tài)性(SNP)進行快速分型,用于研究基因多態(tài)性與疾病易感性、藥物反應(yīng)差異等的關(guān)聯(lián)?;蚩截悢?shù)變異(CNV)分析:檢測基因組中特定基因的拷貝數(shù)是否異常,為研究染色體結(jié)構(gòu)變異與疾病的關(guān)系提供數(shù)據(jù)支持。江蘇三槽基因擴增儀PCR儀品牌RePure-(D)B在同一次實驗中測試多個不同溫度下的反應(yīng)效果,提高實驗的成功率。
瓊脂糖凝膠電泳檢測:PCR 擴增結(jié)束后,取適量的擴增產(chǎn)物進行瓊脂糖凝膠電泳。在電場作用下,DNA 根據(jù)大小在凝膠中遷移,經(jīng)過染色后,在紫外燈下觀察是否出現(xiàn)特異性條帶。若出現(xiàn)與預(yù)期大小相符的條帶,則初步判斷為轉(zhuǎn)基因成分陽性;若未出現(xiàn)條帶,則為陰性。熒光定量 PCR 分析:若采用熒光定量 PCR 技術(shù),可根據(jù)熒光信號的變化實時監(jiān)測 PCR 擴增過程。通過標準曲線法或相對定量法,計算出樣本中轉(zhuǎn)基因成分的含量。一般以 Ct 值(循環(huán)閾值)來表示熒光信號達到設(shè)定閾值時的 PCR 循環(huán)數(shù),Ct 值與模板 DNA 的起始量呈負相關(guān),通過與標準品的 Ct 值比較,可得出樣本中轉(zhuǎn)基因成分的相對含量。測序驗證:對于瓊脂糖凝膠電泳檢測為陽性的樣本,為進一步確認結(jié)果的準確性,可將擴增產(chǎn)物進行測序。將測序結(jié)果與已知的轉(zhuǎn)基因序列進行比對,若序列一致,則可確定樣本中含有相應(yīng)的轉(zhuǎn)基因成分。
PCR 儀的**組成與功能:1. 溫控系統(tǒng)關(guān)鍵部件:加熱模塊(如半導(dǎo)體加熱片、熱板)、溫度傳感器(熱電偶或紅外傳感器)。技術(shù)要求:溫度范圍:通常為 4-100℃,覆蓋 PCR 各階段需求。控溫精度:±0.1-0.5℃,確保引物特異性結(jié)合和酶活性穩(wěn)定。升降溫速率:常見為 3-8℃/s,高速 PCR 儀可達 10℃/s 以上,縮短反應(yīng)時間。2. 反應(yīng)模塊樣本容量:常見規(guī)格:96 孔板(單孔 20-100μL)、384 孔板(低通量)、單管 / 8 聯(lián)管(適合少量樣本)。特殊設(shè)計:梯度 PCR 儀可在同一反應(yīng)中設(shè)置不同孔位的退火溫度,用于優(yōu)化引物條件。3. 控制系統(tǒng)與軟件功能:預(yù)設(shè) PCR 程序(如 touchdown PCR、巢式 PCR)、實時監(jiān)控溫度曲線、存儲實驗數(shù)據(jù)。界面:觸摸屏或電腦端操作,支持程序編輯和個性化設(shè)置。RePure-T配備了三槽設(shè)計,允許用戶在同一次實驗中同時進行多個反應(yīng)。
定性基因擴增儀(PCR 儀)是分子生物學(xué)領(lǐng)域用于實現(xiàn)聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)的設(shè)備,其通過精確控制溫度循環(huán),使 DN段在體外實現(xiàn)指數(shù)級擴增,為基因檢測、疾病診斷、科研等提供關(guān)鍵技術(shù)支持。PCR的原理是利用DNA的熱變性、復(fù)性及延伸特性,通過循環(huán)控溫實現(xiàn)DNA擴增,具體過程如下:變性階段:將反應(yīng)體系加熱至94-96℃,使雙鏈DNA解旋為單鏈。退火階段:降溫至50-65℃,讓引物與單鏈DNA的特定區(qū)域互補結(jié)合。延伸階段:升溫至72℃左右,DNA聚合酶以引物為起點,沿模板鏈合成新的DNA鏈。循環(huán)重復(fù):上述三步為一個循環(huán),通常進行25-40次,使目標DNA片段以2?的倍數(shù)擴增(n為循環(huán)數(shù))。柏恒RePure系列PCR儀進行PCR擴增,可以獲得高度特異性和穩(wěn)定性的擴增結(jié)果,為實驗提供有力支持。南京定量基因擴增儀PCR儀功能
RePure-A即時獲取實時數(shù)據(jù),增強了實驗的可控性和數(shù)據(jù)可靠性。江蘇三槽基因擴增儀PCR儀品牌
農(nóng)業(yè)與種業(yè):精細育種與作物保護:1. 轉(zhuǎn)基因作物檢測場景:檢測作物中是否含外源基因(如抗蟲 Bt 基因、抗除草劑 EPSPS 基因),用于監(jiān)管合規(guī)性篩查(如進出口農(nóng)產(chǎn)品檢測)。技術(shù)價值:通過 PCR 擴增轉(zhuǎn)基因載體的啟動子(如 CaMV 35S)、終止子(如 NOS)或目的基因,區(qū)分轉(zhuǎn)基因與非轉(zhuǎn)基因品種。設(shè)備需求:便攜式 PCR 儀(田間快速檢測)+ 常規(guī)實驗室高通量機型(批量樣本篩查)。2. 作物品種鑒定與抗病育種場景:種子純度檢測(如水稻品種 SSR 標記分析)、抗病基因篩選(如小麥抗銹病基因 Lr34 的分子標記輔助育種)。技術(shù)價值:利用 PCR 擴增特異性分子標記(如 SSR、SNP),快速鑒定品種真實性或篩選抗病株系,替代傳統(tǒng)表型鑒定的長周期(如育種周期從 5 年縮短至 2 年)。江蘇三槽基因擴增儀PCR儀品牌