ELISA試劑盒以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在上得到了普遍的應(yīng)用，但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。我將操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以期給同行帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量。選擇試劑，選擇質(zhì)量優(yōu)良的檢測試劑，嚴(yán)格按照試劑說明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。加樣，可能原因：血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；生化測定主要目的是比較處理內(nèi)和處理間該指標(biāo)的變化。ELISA試劑盒加入酶標(biāo)記的抗原或者抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。潮州ELISA試劑盒哪里有賣

先將抗原結(jié)合到ELISA板上，隨后分兩步進(jìn)行檢測：首先加入檢測抗體與抗原特異性結(jié)合，隨后加入酶標(biāo)二抗檢測并利用底物顯色。與直接ELISA相比，間接ELISA用到酶標(biāo)二抗，具有更高的靈敏度，也需要更少的標(biāo)記抗體，更經(jīng)濟(jì)。間接ELISA還提供了更大的靈活性，因?yàn)椴煌囊豢鼓軌蚺c單一標(biāo)記的二抗一同使用。間接ELISA實(shí)驗(yàn)的缺點(diǎn)是存在交叉反應(yīng)的可能性（酶標(biāo)二抗直接與抗原結(jié)合），可能會增加背景，同時與直接ELISA相比，間接ELISA實(shí)驗(yàn)多了二抗孵育的步驟，實(shí)驗(yàn)周期延長。惠州ELISA試劑盒研發(fā)公司在ELISA 操作中，洗滌是較主要的關(guān)鍵技術(shù)，應(yīng)引起操作者的高度重視，操作者應(yīng)嚴(yán)格按要求洗滌。

雙抗體（原）夾心法elisa試劑盒通常是結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，通過反應(yīng)也結(jié)合在固相載體上。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測定方法達(dá)到很高的敏感度。

ELISA試劑盒是較容易造假的試劑，因?qū)嶒?yàn)簡單、一次性實(shí)驗(yàn)等特點(diǎn)而決定。常見的造假方法是：廠家用一種試劑盒如VEGF的盒子，貼上不同標(biāo)簽。如TGF，MIF等，就可以賣錢了，因?yàn)檠獫{，培養(yǎng)基等都含有VEGF，所以買家肯定能做出試驗(yàn)結(jié)果，發(fā)光液標(biāo)準(zhǔn)曲線也很好，待測品也會顯色（沒有清水），你根本不會懷疑，很Happy地去比色、計算、統(tǒng)計。這是商家常用的手段，很高明，一般人很難察覺。這比樓上說的標(biāo)準(zhǔn)品沒做出來不知要高明多少，一般不會砸自己牌子。這類ELISA試劑盒，就是目錄很長，能提供上百種甚至上千種試劑盒（目錄冊包裝很爛），一打電話都說是國外分裝，而且能較快供貨，遇到這種情況你就要當(dāng)心了。ELISA試劑盒以嚴(yán)謹(jǐn)?shù)墓ぷ髯黠L(fēng)檢測每一份標(biāo)本，才能保證檢測質(zhì)量。

不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質(zhì)量完全一致，即使是通過批批檢的項目其檢測結(jié)果也存在差異，因此必須選擇和訂購長批號的試劑，并保證保存條件。嚴(yán)格執(zhí)行這一標(biāo)準(zhǔn)可以避免因試劑批號改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評估試劑的復(fù)雜過程，并且能夠保證結(jié)果的穩(wěn)定性；對于效期短、使用率低的試劑，應(yīng)當(dāng)小量分裝，每次使用則取分裝部分即可，避免反復(fù)凍融造成試劑的失效。標(biāo)本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素，前者包括類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等，后者包括標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存時間過長、標(biāo)本凝固不全、冷凍標(biāo)本的反復(fù)凍融等。試劑盒用于盛放檢測化學(xué)成分、藥物殘留、病毒種類等化學(xué)試劑的盒子?；葜軪LISA試劑盒研發(fā)公司

ELISA試劑盒如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存。潮州ELISA試劑盒哪里有賣

Elisa試劑盒加入酶標(biāo)記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與其所含藥物含量成負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出樣本中藥物的殘留量。Elisa試劑盒技術(shù)原理：抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面a的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。 受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上，這些是要注意的。潮州ELISA試劑盒哪里有賣

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