**技術(shù)參數(shù):決定實(shí)驗(yàn)精度與可靠性:1. 溫控性能控溫范圍:需覆蓋 4-100℃,滿足變性(94-96℃)、退火(50-65℃)、延伸(72℃)全流程需求。控溫精度:±0.1-0.5℃為優(yōu),精度不足可能導(dǎo)致引物非特異性結(jié)合或酶活性降低(如退火溫度波動(dòng)易引發(fā)假陽(yáng)...
多重 PCR 與多基因檢測(cè)場(chǎng)景:同時(shí)擴(kuò)增多個(gè)靶基因(如病原體分型、遺傳標(biāo)記檢測(cè)),需平衡不同引物對(duì)的退火溫度。例:在 HPV 分型檢測(cè)中,使用梯度 PCR 優(yōu)化 14 種型別引物的共同退火溫度,避免因單一溫度導(dǎo)致部分型別漏檢。 科研方法開(kāi)發(fā)與驗(yàn)證場(chǎng)景:建立新的...
梯度 PCR 儀是一種具備多溫度梯度功能的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)儀器,其**優(yōu)勢(shì)在于可在同一反應(yīng)板上設(shè)置不同的溫度梯度(如橫向或縱向溫度梯度),允許用戶同時(shí)優(yōu)化多個(gè)退火溫度或其他循環(huán)參數(shù),***提升實(shí)驗(yàn)效率。這類儀器廣泛應(yīng)用于引物優(yōu)化、條件摸索和復(fù)雜擴(kuò)增反應(yīng),是科研與...
啟動(dòng)反應(yīng)與結(jié)果分析確認(rèn)參數(shù)無(wú)誤后,啟動(dòng) qPCR 程序,儀器自動(dòng)運(yùn)行并實(shí)時(shí)顯示熒光曲線。反應(yīng)結(jié)束后,通過(guò)軟件查看結(jié)果:定量結(jié)果:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算未知樣本的初始模板濃度(定量),或通過(guò) ΔΔCt 法分析相對(duì)表達(dá)量(相對(duì)定量)。溶解曲線:若出現(xiàn)單一尖銳峰,說(shuō)明擴(kuò)增...
司法與法醫(yī)鑒定DNA 數(shù)據(jù)庫(kù)構(gòu)建應(yīng)用:同時(shí)擴(kuò)增 96 份血樣的 STR 位點(diǎn)(如 CODIS 系統(tǒng)中的 13 個(gè)**位點(diǎn)),加速犯罪現(xiàn)場(chǎng)樣本比對(duì)。親子鑒定批量處理應(yīng)用:法醫(yī)實(shí)驗(yàn)室通過(guò) 96 孔板同步處理多個(gè)家庭的樣本,縮短鑒定周期。5. 食品與環(huán)境安全食品微生...
實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 儀(qPCR 儀)的使用需嚴(yán)格遵循操作流程,以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性。實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備試劑與樣本準(zhǔn)備:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求配制qPCR反應(yīng)體系(通常包括模板DNA/RNA逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物、引物、探針/熒光染料、qPCRMix酶、無(wú)菌水等),需在冰上操作...
環(huán)境監(jiān)測(cè)與生態(tài)保護(hù):微生物與污染物的 “基因追蹤”:1. 水體與土壤污染評(píng)估場(chǎng)景:檢測(cè)水體中病原微生物(如霍亂弧菌 ctx 基因)、土壤中***抗性基因(如 tetA 基因)的分布,評(píng)估環(huán)境污染程度。技術(shù)價(jià)值:通過(guò) PCR 定量抗性基因豐度,為污水處理工藝優(yōu)化...
轉(zhuǎn)基因作物檢測(cè)應(yīng)用:擴(kuò)增轉(zhuǎn)基因作物中的外源基因(如抗蟲(chóng)基因Bt、抗除草劑基因EPSPS),用于安全性評(píng)估和監(jiān)管篩查。案例:歐盟法規(guī)要求對(duì)食品中的轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)行 PCR 定性檢測(cè)。2. 作物育種與品種鑒定應(yīng)用:利用 SSR(簡(jiǎn)單序列重復(fù))、AFLP(擴(kuò)增片段長(zhǎng)度...
轉(zhuǎn)基因作物檢測(cè)應(yīng)用:擴(kuò)增轉(zhuǎn)基因作物中的外源基因(如抗蟲(chóng)基因Bt、抗除草劑基因EPSPS),用于安全性評(píng)估和監(jiān)管篩查。案例:歐盟法規(guī)要求對(duì)食品中的轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)行 PCR 定性檢測(cè)。2. 作物育種與品種鑒定應(yīng)用:利用 SSR(簡(jiǎn)單序列重復(fù))、AFLP(擴(kuò)增片段長(zhǎng)度...
準(zhǔn)備試劑:準(zhǔn)備 PCR 反應(yīng)所需的各種試劑,包括 Taq DNA 聚合酶、dNTPs、緩沖液、引物、Mg2?等。引物是決定 PCR 特異性的關(guān)鍵因素,需根據(jù)待檢測(cè)的轉(zhuǎn)基因成分的特定基因序列設(shè)計(jì)合成特異性引物。配置反應(yīng)液:按照一定的比例和順序,將各種試劑加入到無(wú)...
基因克隆:PCR儀擴(kuò)增得到的特定DNA片段可以用于基因克隆,即將目的基因插入到載體中,構(gòu)建重組DNA分子,再導(dǎo)入宿主細(xì)胞進(jìn)行大量復(fù)制和表達(dá),為基因功能研究、蛋白質(zhì)生產(chǎn)等提供基礎(chǔ)。遺傳疾病診斷:許多遺傳疾病是由基因突變引起的,PCR儀可以快速、準(zhǔn)確地檢測(cè)出這些突...
梯度 PCR 儀是一種具備多溫度梯度功能的聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)儀器,其**優(yōu)勢(shì)在于可在同一反應(yīng)板上設(shè)置不同的溫度梯度(如橫向或縱向溫度梯度),允許用戶同時(shí)優(yōu)化多個(gè)退火溫度或其他循環(huán)參數(shù),***提升實(shí)驗(yàn)效率。這類儀器廣泛應(yīng)用于引物優(yōu)化、條件摸索和復(fù)雜擴(kuò)增反應(yīng),是科研與...
轉(zhuǎn)基因作物檢測(cè)應(yīng)用:擴(kuò)增轉(zhuǎn)基因作物中的外源基因(如抗蟲(chóng)基因Bt、抗除草劑基因EPSPS),用于安全性評(píng)估和監(jiān)管篩查。案例:歐盟法規(guī)要求對(duì)食品中的轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)行 PCR 定性檢測(cè)。2. 作物育種與品種鑒定應(yīng)用:利用 SSR(簡(jiǎn)單序列重復(fù))、AFLP(擴(kuò)增片段長(zhǎng)度...
1. **參數(shù)溫度均勻性:各孔位溫度差異≤0.5℃,避免擴(kuò)增效率不一致。熱循環(huán)重復(fù)性:多次運(yùn)行同一程序時(shí),溫度曲線重合度高,保證實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性。兼容性:支持不同規(guī)格反應(yīng)管(如 0.2mL 管、96 孔板)和試劑體系(如 Taq 酶、高保真酶)。2. 選型建議科研...
性能指標(biāo)溫度控制準(zhǔn)確性:指樣品孔溫度與設(shè)定溫度的一致性,直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗,一般要求溫度準(zhǔn)確性在±0.1℃-±0.2℃之間。均勻性:指樣品孔間的溫度差異,關(guān)系到不同樣品孔進(jìn)行反應(yīng)結(jié)果的一致性,良好的溫度均勻性可使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更具重復(fù)性,通常溫度均勻性應(yīng)在±0.2...
96 孔 PCR 儀是一種基于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)的儀器,通過(guò) 96 孔反應(yīng)板實(shí)現(xiàn)一次性處理 96 個(gè)樣本的基因擴(kuò)增,適用于高通量檢測(cè)場(chǎng)景。其設(shè)計(jì)**是通過(guò)精確控溫(加熱、冷卻、恒溫)實(shí)現(xiàn) DNA 的變性、退火、延伸循環(huán),廣泛應(yīng)用于科研、臨床、農(nóng)業(yè)、司...
司法與法醫(yī)鑒定DNA 數(shù)據(jù)庫(kù)構(gòu)建應(yīng)用:同時(shí)擴(kuò)增 96 份血樣的 STR 位點(diǎn)(如 CODIS 系統(tǒng)中的 13 個(gè)**位點(diǎn)),加速犯罪現(xiàn)場(chǎng)樣本比對(duì)。親子鑒定批量處理應(yīng)用:法醫(yī)實(shí)驗(yàn)室通過(guò) 96 孔板同步處理多個(gè)家庭的樣本,縮短鑒定周期。5. 食品與環(huán)境安全食品微生...
實(shí)驗(yàn)效率與合規(guī)性:1. 程序編輯與數(shù)據(jù)管理操作界面是否支持觸摸屏或電腦端遠(yuǎn)程控制,能否存儲(chǔ)自定義程序(如保存不同實(shí)驗(yàn)的溫度循環(huán)參數(shù));數(shù)據(jù)導(dǎo)出功能:是否支持 PDF、Excel 格式報(bào)告生成,便于實(shí)驗(yàn)記錄和合規(guī)審計(jì)(如臨床檢測(cè)需符合 GMP 標(biāo)準(zhǔn))。2. 安全...
應(yīng)用場(chǎng)景:匹配實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c樣本特性:1. 科研場(chǎng)景需求:引物設(shè)計(jì)優(yōu)化、基因克隆、突變檢測(cè)等,需靈活調(diào)整反應(yīng)條件。選型建議:梯度 PCR 儀 + 低通量模塊(如 8 聯(lián)管),便于小樣本多條件測(cè)試;若涉及多基因并行擴(kuò)增,可搭配 96 孔板模塊。2. 臨床與診斷需求:...
快速檢測(cè)沙門氏菌:沙門氏菌是常見(jiàn)的食源性致病菌,可引發(fā)食物中毒等疾病。利用 PCR 儀,針對(duì)沙門氏菌的特定基因序列設(shè)計(jì)引物,能快速?gòu)氖称窐颖局袛U(kuò)增出相關(guān)基因片段,從而判斷食品中是否存在沙門氏菌。相比傳統(tǒng)檢測(cè)方法,縮短了檢測(cè)時(shí)間,提高了檢測(cè)效率。檢測(cè)大腸桿菌 O...
在基因功能、調(diào)控機(jī)制等基礎(chǔ)研究中,qPCR是不可或缺的工具,主要用于基因表達(dá)水平的定量分析?;虮磉_(dá)分析:通過(guò)定量比較不同組織、不同發(fā)育階段或不同處理?xiàng)l件下目的基因的mRNA表達(dá)量,探究基因的功能及調(diào)控機(jī)制。例如,研究某種藥物對(duì)細(xì)胞中特定基因表達(dá)的影響,或比較...
功能拓展與兼容性:適配實(shí)驗(yàn)流程:1. 附加功能熒光檢測(cè)模塊:若需定量分析(如基因表達(dá)量、病原體載量),需選擇 qPCR 儀,內(nèi)置熒光通道(如 FAM、VIC、ROX 等),支持實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)擴(kuò)增曲線。自動(dòng)化接口:**機(jī)型可對(duì)接機(jī)器人工作站,實(shí)現(xiàn) “樣本提取 - 體系...
科研與分子生物學(xué)基因表達(dá)譜分析應(yīng)用:通過(guò) RT-PCR 同時(shí)檢測(cè)多個(gè)基因在不同樣本中的表達(dá)差異(如**組織芯片研究)。高通量測(cè)序文庫(kù)制備應(yīng)用:擴(kuò)增 DN**段用于二代測(cè)序(NGS)建庫(kù),提升測(cè)序前處理效率。3. 農(nóng)業(yè)與生物技術(shù)轉(zhuǎn)基因作物批量檢測(cè)應(yīng)用:同時(shí)篩查多...
瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè):PCR 擴(kuò)增結(jié)束后,取適量的擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳。在電場(chǎng)作用下,DNA 根據(jù)大小在凝膠中遷移,經(jīng)過(guò)染色后,在紫外燈下觀察是否出現(xiàn)特異性條帶。若出現(xiàn)與預(yù)期大小相符的條帶,則初步判斷為轉(zhuǎn)基因成分陽(yáng)性;若未出現(xiàn)條帶,則為陰性。熒光定量 PC...
引物設(shè)計(jì)與條件優(yōu)化場(chǎng)景:新引物開(kāi)發(fā)時(shí),需測(cè)試不同退火溫度(Tm 值)以避免非特異性擴(kuò)增。例:針對(duì)某基因設(shè)計(jì) 5 對(duì)引物,通過(guò)梯度 PCR 同時(shí)測(cè)試每對(duì)引物在 55℃~65℃范圍內(nèi)的比較好退火溫度,直接篩選出特異性條帶**亮的組合。優(yōu)勢(shì):傳統(tǒng)方法需多次**實(shí)驗(yàn),...
多種樣本類型:PCR 儀可以對(duì)各種類型的樣本進(jìn)行轉(zhuǎn)基因成分檢測(cè),包括植物組織、種子、農(nóng)產(chǎn)品加工品、飼料等。無(wú)論是新鮮的農(nóng)作物,還是經(jīng)過(guò)深加工的食品,如食用油、餅干、飲料等,只要其中含有殘留的 DNA,都可以通過(guò) PCR 技術(shù)進(jìn)行檢測(cè),能夠多方面覆蓋食品生產(chǎn)、加...
在保障農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全、品種改良和動(dòng)植物疫病防控中應(yīng)用較廣。轉(zhuǎn)基因作物檢測(cè):定量檢測(cè)農(nóng)作物中轉(zhuǎn)基因成分的含量,判斷是否符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)(如我國(guó)規(guī)定轉(zhuǎn)基因食品需標(biāo)注,qPCR可精細(xì)測(cè)定轉(zhuǎn)基因片段的拷貝數(shù))。動(dòng)植物疫病檢測(cè):快速檢測(cè)畜禽或農(nóng)作物中的病原體(如禽流感病毒、...
1. **參數(shù)溫度均勻性:各孔位溫度差異≤0.5℃,避免擴(kuò)增效率不一致。熱循環(huán)重復(fù)性:多次運(yùn)行同一程序時(shí),溫度曲線重合度高,保證實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性。兼容性:支持不同規(guī)格反應(yīng)管(如 0.2mL 管、96 孔板)和試劑體系(如 Taq 酶、高保真酶)。2. 選型建議科研...
溫度與反應(yīng)體系控制溫度準(zhǔn)確性:定期校準(zhǔn)儀器(由專業(yè)人員進(jìn)行),確保變性、退火溫度精細(xì)(偏差超過(guò) ±0.5℃會(huì)影響結(jié)果)。體系一致性:加樣時(shí)確保各孔反應(yīng)體積一致(誤差≤1μL),避免因體積差異導(dǎo)致 Ct 值偏差。避免氣泡:加樣后若有氣泡,需輕輕敲擊板壁或離心去除...
實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 儀(qPCR 儀)憑借其能夠在 PCR 擴(kuò)增過(guò)程中實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)變化,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)目的基因精細(xì)定量的特點(diǎn),在多個(gè)領(lǐng)域都有較廣且重要的應(yīng)用。qPCR的高靈敏度使其能對(duì)微量生物樣本(如血液、毛發(fā)、唾液、精斑等)進(jìn)行檢測(cè),在個(gè)體識(shí)別、親子鑒定等...