啟動反應(yīng)與結(jié)果分析確認(rèn)參數(shù)無誤后,啟動 qPCR 程序,儀器自動運行并實時顯示熒光曲線。反應(yīng)結(jié)束后,通過軟件查看結(jié)果:定量結(jié)果:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算未知樣本的初始模板濃度(定量),或通過 ΔΔCt 法分析相對表達(dá)量(相對定量)。溶解曲線:若出現(xiàn)單一尖銳峰,說明擴(kuò)增...
基于兩個熒光分子(供體與受體)距離接近時(<10nm),供體的能量轉(zhuǎn)移給受體,導(dǎo)致供體熒光減弱、受體熒光增強(qiáng),用于分析分子間相互作用或構(gòu)象變化。典型應(yīng)用場景:蛋白質(zhì)相互作用研究分別標(biāo)記兩個蛋白(供體與受體),若相互結(jié)合,F(xiàn)RET 信號增強(qiáng),可實時監(jiān)測細(xì)胞內(nèi)蛋白...
樣本處理:將待計數(shù)的細(xì)胞樣品進(jìn)行適當(dāng)?shù)奶幚?,通常?xì)胞會與染色劑和/或稀釋液混合。計數(shù)腔和光源:細(xì)胞計數(shù)儀通常包含計數(shù)腔和光源,計數(shù)腔是一個小空間,可以容納樣本溶液。光敏傳感器:細(xì)胞計數(shù)器配備一個光敏傳感器,它可以感應(yīng)到細(xì)胞在光源照射下發(fā)出的信號。光敏傳感器的種...
1. DNA 指紋分析應(yīng)用:擴(kuò)增人類基因組中的短串聯(lián)重復(fù)序列(STR),如 D21S11、TH01 等位點,用于個體識別、親子鑒定和犯罪現(xiàn)場證據(jù)分析。案例:通過 PCR - 毛細(xì)管電泳技術(shù)構(gòu)建 DNA 圖譜,比對嫌疑人和現(xiàn)場生物樣本(如血跡、毛發(fā))。2. 物種...
使用細(xì)胞計數(shù)儀(以常用的自動細(xì)胞計數(shù)儀為例)的**是通過標(biāo)準(zhǔn)化操作確保細(xì)胞懸液均勻、染色正確,從而獲得準(zhǔn)確的計數(shù)結(jié)果。1. 儀器檢查開機(jī)預(yù)熱:部分儀器需 10-15 分鐘(參考說明書),確保軟件啟動正常,鏡頭清潔無污漬(若有灰塵,用鏡頭紙輕擦)。確認(rèn)計數(shù)板類型...
快速檢測沙門氏菌:沙門氏菌是常見的食源性致病菌,可引發(fā)食物中毒等疾病。利用 PCR 儀,針對沙門氏菌的特定基因序列設(shè)計引物,能快速從食品樣本中擴(kuò)增出相關(guān)基因片段,從而判斷食品中是否存在沙門氏菌。相比傳統(tǒng)檢測方法,縮短了檢測時間,提高了檢測效率。檢測大腸桿菌 O...
放入 PCR 儀:將配置好的反應(yīng)管放入基因擴(kuò)增儀 PCR 儀中,按照設(shè)定的程序進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)。設(shè)置擴(kuò)增程序:一般包括預(yù)變性、變性、退火、延伸和終延伸等步驟。預(yù)變性步驟通常在 94℃-95℃下進(jìn)行 5-10 分鐘,使 DNA 雙鏈充分解開;變性溫度一般為 94℃-...
細(xì)胞計數(shù)儀主要有以下功能:數(shù)據(jù)分析與報告生成:數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析:對計數(shù)和測量得到的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析,如計算平均值、標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)等,以評估細(xì)胞樣本的一致性和穩(wěn)定性。生成報告:可以生成詳細(xì)的計數(shù)報告,包括細(xì)胞總數(shù)、活細(xì)胞數(shù)、死細(xì)胞數(shù)、細(xì)胞存活率、細(xì)胞大小分布等信息...
轉(zhuǎn)基因作物檢測應(yīng)用:擴(kuò)增轉(zhuǎn)基因作物中的外源基因(如抗蟲基因Bt、抗除草劑基因EPSPS),用于安全性評估和監(jiān)管篩查。案例:歐盟法規(guī)要求對食品中的轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)行 PCR 定性檢測。2. 作物育種與品種鑒定應(yīng)用:利用 SSR(簡單序列重復(fù))、AFLP(擴(kuò)增片段長度...
篩選轉(zhuǎn)基因作物:在食品生產(chǎn)中,許多原料來自轉(zhuǎn)基因作物。PCR 儀可對食品中的植物成分進(jìn)行檢測,通過擴(kuò)增特定的轉(zhuǎn)基因元件,如啟動子、終止子、目的基因等,判斷食品是否含有轉(zhuǎn)基因成分。例如,檢測轉(zhuǎn)基因大豆中的 CP4-EPSPS 基因,確定大豆制品是否為轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品,...
溫度校準(zhǔn):定期使用溫度驗證儀檢測梯度準(zhǔn)確性(如每列孔實際溫度是否與設(shè)定值一致)。耗材適配:使用與儀器模塊匹配的 PCR 板(如薄型光學(xué)板用于熒光檢測),避免因板型差異導(dǎo)致溫度傳導(dǎo)不均。防污染措施:梯度優(yōu)化實驗常涉及多引物組合,需嚴(yán)格遵循 PCR 實驗室分區(qū)原則...
精確含量測定:熒光定量 PCR 技術(shù)作為 PCR 的一種衍生方法,不僅能夠定性地判斷樣本中是否含有轉(zhuǎn)基因成分,還可以通過標(biāo)準(zhǔn)曲線法或相對定量法等手段,對轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)行精確的定量分析,準(zhǔn)確測定樣本中轉(zhuǎn)基因成分的含量,為轉(zhuǎn)基因生物的監(jiān)管、標(biāo)識管理以及風(fēng)險評估等提供...
科研實驗室:優(yōu)先選擇帶梯度功能的機(jī)型(如 Veriti、C1000),便于優(yōu)化引物退火溫度。臨床檢測:選擇兼容熒光定量模塊的機(jī)型(如 QuantStudio),實現(xiàn)定性 + 定量一體化檢測。工業(yè)級批量檢測:選擇快速升降溫機(jī)型(如某些國產(chǎn)型號升降溫速率≥6℃/ ...
定性基因擴(kuò)增儀(PCR 儀)憑借其高靈敏度和特異性的基因檢測能力,在多個行業(yè)中承擔(dān)著關(guān)鍵角色。1. 基因克隆與功能研究場景:目的基因的擴(kuò)增、載體構(gòu)建(如將目標(biāo)基因插入質(zhì)粒)、基因突變(點突變、缺失突變)驗證。技術(shù)價值:通過 PCR 擴(kuò)增目的基因片段,結(jié)合酶切、...
**技術(shù)參數(shù):決定實驗精度與可靠性:1. 溫控性能控溫范圍:需覆蓋 4-100℃,滿足變性(94-96℃)、退火(50-65℃)、延伸(72℃)全流程需求??販鼐龋骸?.1-0.5℃為優(yōu),精度不足可能導(dǎo)致引物非特異性結(jié)合或酶活性降低(如退火溫度波動易引發(fā)假陽...
精確含量測定:熒光定量 PCR 技術(shù)作為 PCR 的一種衍生方法,不僅能夠定性地判斷樣本中是否含有轉(zhuǎn)基因成分,還可以通過標(biāo)準(zhǔn)曲線法或相對定量法等手段,對轉(zhuǎn)基因成分進(jìn)行精確的定量分析,準(zhǔn)確測定樣本中轉(zhuǎn)基因成分的含量,為轉(zhuǎn)基因生物的監(jiān)管、標(biāo)識管理以及風(fēng)險評估等提供...
啟動反應(yīng)與結(jié)果分析確認(rèn)參數(shù)無誤后,啟動 qPCR 程序,儀器自動運行并實時顯示熒光曲線。反應(yīng)結(jié)束后,通過軟件查看結(jié)果:定量結(jié)果:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算未知樣本的初始模板濃度(定量),或通過 ΔΔCt 法分析相對表達(dá)量(相對定量)。溶解曲線:若出現(xiàn)單一尖銳峰,說明擴(kuò)增...
細(xì)胞生物學(xué)細(xì)胞計數(shù)與活力評估:結(jié)合臺盼藍(lán)染色,通過 600 nm 吸光度估算細(xì)胞密度(需配合細(xì)胞計數(shù)板校準(zhǔn))。細(xì)胞增殖 / 毒性實驗:監(jiān)測細(xì)胞懸液濁度變化,反映細(xì)胞生長狀態(tài)或藥物毒性。醫(yī)學(xué)與臨床檢測病原體核酸檢測:定量病毒載量(如 HIV、HBV)或細(xì)菌 DN...
定性基因擴(kuò)增儀(PCR 儀)憑借其高靈敏度和特異性的基因檢測能力,在多個行業(yè)中承擔(dān)著關(guān)鍵角色。1. 基因克隆與功能研究場景:目的基因的擴(kuò)增、載體構(gòu)建(如將目標(biāo)基因插入質(zhì)粒)、基因突變(點突變、缺失突變)驗證。技術(shù)價值:通過 PCR 擴(kuò)增目的基因片段,結(jié)合酶切、...
2. 代謝活性評估利用微生物代謝過程中輔酶(如 NADH)的吸光度變化(340nm),間接反映細(xì)胞活性。例如,在***敏感性測試中,藥物抑制代謝會導(dǎo)致 NADH 生成減少,吸光度變化速率降低。3. 核酸 / 蛋白定量雖然主要用于微生物濃度檢測,但分光光度計在 ...
環(huán)境監(jiān)測與生態(tài)保護(hù):微生物與污染物的 “基因追蹤”:1. 水體與土壤污染評估場景:檢測水體中病原微生物(如霍亂弧菌 ctx 基因)、土壤中***抗性基因(如 tetA 基因)的分布,評估環(huán)境污染程度。技術(shù)價值:通過 PCR 定量抗性基因豐度,為污水處理工藝優(yōu)化...
定性基因擴(kuò)增儀(PCR 儀)是分子生物學(xué)領(lǐng)域用于實現(xiàn)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)的設(shè)備,其通過精確控制溫度循環(huán),使 DN段在體外實現(xiàn)指數(shù)級擴(kuò)增,為基因檢測、疾病診斷、科研等提供關(guān)鍵技術(shù)支持。PCR的原理是利用DNA的熱變性、復(fù)性及延伸特性,通過循環(huán)控溫實現(xiàn)DNA擴(kuò)...
醫(yī)療與臨床診斷:疾病檢測的 “金標(biāo)準(zhǔn)”1. 病原體快速檢測場景:病毒性疾?。海〝U(kuò)增 N 基因 / ORF1ab 基因)、乙肝病毒(HBV-DNA 檢測)、HPV 分型(L1 基因擴(kuò)增);細(xì)菌性疾病:結(jié)核分枝桿菌(IS6110 基因檢測)、淋球菌(隱蔽質(zhì)粒基因擴(kuò)...
儀器預(yù)熱與校準(zhǔn)開機(jī)預(yù)熱(通常 10-15 分鐘),確保光源穩(wěn)定。用相應(yīng)的緩沖液(如 TE 緩沖液、RNase-free 水)進(jìn)行 “空白校準(zhǔn)”:取 1-2μL 緩沖液滴在檢測探頭上,閉合探頭,執(zhí)行校準(zhǔn)程序(消除背景干擾)。樣品準(zhǔn)備確保樣品充分混勻(避免沉淀或濃...
**技術(shù)參數(shù):決定實驗精度與可靠性:1. 溫控性能控溫范圍:需覆蓋 4-100℃,滿足變性(94-96℃)、退火(50-65℃)、延伸(72℃)全流程需求??販鼐龋骸?.1-0.5℃為優(yōu),精度不足可能導(dǎo)致引物非特異性結(jié)合或酶活性降低(如退火溫度波動易引發(fā)假陽...
啟動反應(yīng)與結(jié)果分析確認(rèn)參數(shù)無誤后,啟動 qPCR 程序,儀器自動運行并實時顯示熒光曲線。反應(yīng)結(jié)束后,通過軟件查看結(jié)果:定量結(jié)果:根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算未知樣本的初始模板濃度(定量),或通過 ΔΔCt 法分析相對表達(dá)量(相對定量)。溶解曲線:若出現(xiàn)單一尖銳峰,說明擴(kuò)增...
開機(jī)與預(yù)熱按儀器說明書開機(jī)(部分儀器需先開主機(jī)再開軟件,或直接觸摸屏幕啟動)。開機(jī)后需預(yù)熱10-15 分鐘(確保光源穩(wěn)定,尤其是紫外光部分),預(yù)熱期間可進(jìn)行樣品準(zhǔn)備。空白校準(zhǔn)(關(guān)鍵步驟,消除背景干擾)空白校準(zhǔn)的目的是去除緩沖液本身的吸光度影響,必須用與樣品溶解...
主要檢測功能:定量分析:基于特征波長吸光度與濃度的線性關(guān)系,如 DNA 在 260nm 的吸光度與濃度成正比。光譜定性分析:通過全波長掃描獲取樣本的吸收光譜曲線,對比標(biāo)準(zhǔn)譜庫判斷物質(zhì)成分。技術(shù)優(yōu)勢(對比傳統(tǒng)分光光度計)微量樣本檢測:*需 1-2μL 樣本(傳統(tǒng)...
科研實驗室:優(yōu)先選擇帶梯度功能的機(jī)型(如 Veriti、C1000),便于優(yōu)化引物退火溫度。臨床檢測:選擇兼容熒光定量模塊的機(jī)型(如 QuantStudio),實現(xiàn)定性 + 定量一體化檢測。工業(yè)級批量檢測:選擇快速升降溫機(jī)型(如某些國產(chǎn)型號升降溫速率≥6℃/ ...
微量分光光度計利用上述原理進(jìn)行工作。其重要部件包括光源、單色器、檢測器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。光源:發(fā)射一束光線,為測量提供光源。單色器:將光源發(fā)出的光線分解為單一波長的光線,以便測量特定波長下的吸光度。檢測器:將透過樣品的光線轉(zhuǎn)換為電信號,以便進(jìn)行后續(xù)的數(shù)據(jù)處理。數(shù)...