子宮內(nèi)膜異位癥自然發(fā)生的前提是有月經(jīng)周期,非人靈長類動物可用于自發(fā)性模型的建立,其與人類疾病的發(fā)生位點相同,且形態(tài)學與人類相應部位的相同,以前人們認為自發(fā)模型很少在卵巢形成EM,因此與人類EM的發(fā)生可能存在差異,但Dick[町等的研究改變了這一理論,證實卵巢也易發(fā)病。而誘發(fā)性模型(除非人靈長類動物)不能完全模擬人類發(fā)生EM的過程、環(huán)境。因此,非人靈長類動物是比較好的模型,但其發(fā)病率低,約25%-35'3毛;周期在10年以上;且來源、少,所需經(jīng)費昂貴。而誘發(fā)性模型成功率為759串-959島,實驗周期為2個月左右,來源普遍,價格較低,適合大樣本研究。子宮內(nèi)膜異位癥模型是研究該疾病發(fā)病機理的重要工具。湖北比較好的子宮內(nèi)膜異位癥模型有哪些
子宮內(nèi)膜異位癥模型是通過將子宮組織移植到腸系膜上而誘發(fā)的。簡言之,供體動物(發(fā)情期)經(jīng)宮頸脫位處死,取出兩側(cè)子宮角并置于溫箱中。將子宮角縱向打開,切成約 4 平方毫米(2 毫米*2 毫米)的正方形小塊,然后移植到發(fā)情期受體小鼠的腹壁上來構(gòu)建子宮內(nèi)膜異位癥模型。動物模型總體可以分為兩類,一是自發(fā)性動物模型,即不需干預就可自發(fā)形成類似人類EM的病灶;二是誘發(fā)性動物模型,即通過各種方法將內(nèi)膜組織或細胞移植于動物體內(nèi),形成EM病灶。陜西小鼠子宮內(nèi)膜異位癥模型有哪家研究人員正在不斷優(yōu)化子宮內(nèi)膜異位癥模型,以提高其實驗準確性。
子宮內(nèi)膜異位癥模型同種異體移植法:1.隨機取小鼠一只作為捐贈鼠,脫頸椎法處死,仰臥位固定于手術(shù)臺,腹部酒精消毒后,沿正中線剖開腹腔。找到Y(jié)形子宮,小心分別牽出左、右側(cè)子宮,細心分離雙側(cè)子宮系膜。2.離斷宮角與卵巢,在Y形子宮分叉分別剪斷左側(cè)及右側(cè)子宮,放入裝有生理鹽水的無菌彎盤中,反復漂洗子宮表面的血跡,進一步分離剩余粘附的子宮系膜。將兩個子宮角分別放置于兩個無菌彎盤中,將它們直接剪成大小均等約1mm×1mm的碎片,并將它們懸浮于生理鹽水中。3.將捐贈鼠的子宮按1/2的比例種植于接受鼠腹腔,1只捐贈鼠內(nèi)膜供應2只接受鼠,用生理鹽水懸浮彎盤里的組織碎片。4.隨機取一只小鼠作為接受鼠,取臍下偏正中線處的左下腹為進針點,將溶有子宮組織碎片的生理鹽水用號針頭連同子宮組織塊碎片注入接受鼠的腹腔,后放置于鼠籠。
子宮內(nèi)膜異位癥模型造模方法選用非動情期大鼠,術(shù)前1 d予戊酸雌二醇0.2 mg/只灌服。手術(shù)在室溫28~32℃環(huán)境下進行,無菌操作。以10%水合氯醛3 mL/kg進行腹腔注射麻醉,將麻醉后的大鼠仰臥位固定于手術(shù)板上,腹部備皮,常規(guī)消毒鋪巾。大鼠下腹正中恥骨聯(lián)合上1 cm處以上取長約2~3 cm縱行切口,進腹后在膀胱背側(cè)找到“Y”字型子宮,游離右側(cè)子宮,近端離子宮角1 cm處結(jié)扎,遠端離卵巢1 cm處結(jié)扎,剪下右側(cè)子宮。將剪下的子宮組織放入盛有無菌生理鹽水的培養(yǎng)皿中,縱向剖開。將子宮內(nèi)膜與肌層分離,剪取3塊3 mm×5 mm的內(nèi)膜組織,用4-0號可吸收線將內(nèi)膜面貼于種植部位,分別縫合在左側(cè)卵巢、宮骶韌帶以及左側(cè)遠離腹部切口的腹壁上。隨后用慶大霉素稀釋液沖洗腹腔,***用0號絲線分層縫合腹部切口,常規(guī)關(guān)腹。術(shù)后密切觀察大鼠呼吸、心率,待其自然蘇醒,正常喂養(yǎng),觀察大鼠傷口及生活情況。術(shù)后第1天開始每只大鼠肌內(nèi)注射慶大霉素0.1 mL,每天1次,連續(xù)7 d。術(shù)后第10天開始每天予戊酸雌二醇0.02 mg/kg灌服,連續(xù)5 d。子宮內(nèi)膜異位癥模型是生殖醫(yī)學研究的重要組成部分。
子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis,EM)是一種因子依賴性的常見良性變化,多發(fā)于生育年齡婦女,其發(fā)病率為10%-159毛。迄今為止,關(guān)于EM的真正發(fā)病機制并未比較終闡明,且缺少有效的治療方法。其中一個主要原因是這種疾病只發(fā)生于人類和靈長類動物。由于實際操作和倫理學方面的約束,嚴重限制了對該疾病的研究,因此需要一種可在實驗動物體內(nèi)復制該病的方法。1922年Jacobson初次建立了兔的EM模型,從而開創(chuàng)了EM研究的新局面。本文就EM模型建立、應用的現(xiàn)狀及進展進行綜述。子宮內(nèi)膜異位癥模型的建立對于培養(yǎng)年輕科研人員具有重要意義。甘肅專業(yè)的子宮內(nèi)膜異位癥模型是哪家
子宮內(nèi)膜異位癥模型為研究疾病的免疫機制提供了重要的平臺。湖北比較好的子宮內(nèi)膜異位癥模型有哪些
免疫因素在子宮內(nèi)膜異位癥模型的發(fā)生長展中起重要作用。IL-6主要由單核-巨噬細胞產(chǎn)生,參與炎癥反應。大鼠異位內(nèi)膜IL-6mRNA的表達明顯高于在位內(nèi)膜,在位內(nèi)膜IL-6mR-NA又較正常內(nèi)膜明顯增加,同時使局部雌因子水平升高[19J轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)可促進成纖維細胞中膠原和纖維蛋白的形成,抑制T細胞及巨噬細胞的增殖及活化,活化血管生長因子;補體。在免疫反應中參與炎癥反應,可活化巨噬細胞、介導淋巴細胞功能;Sha叩[20J發(fā)現(xiàn)EM大鼠模型中異位內(nèi)膜中C3異常表達,腹腔液中C3合成增多,可能誘發(fā)自身免疫;NK細胞具有多種免疫功能,可殺傷和去除機體病原微生物及其他異物,在免疫監(jiān)護中起重要作用。Ota等[21J將EM大鼠模型的脾切除,并將牌細胞再注入大鼠靜脈中,然后測量脾細胞中NK細胞的活性,結(jié)果顯示該模型中NK細胞活性較正常大鼠明顯下降,但比未注入脾細胞的EM大鼠模型的NK細胞活性下降要小,證實EM大鼠中NK細胞活性下降,去除異位內(nèi)膜的能力降低,使得異位內(nèi)膜得以種植和生長。湖北比較好的子宮內(nèi)膜異位癥模型有哪些