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單分子級別數(shù)字ELISA易用性

來源: 發(fā)布時間:2025-06-04

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從TNF-α數(shù)字ELISA測定的檢測限為~150aM(2.5fg/mL),相當(dāng)于全血中的~600aM(10fg/mL);市場上可用的ELISA對TNF-α的比較高靈敏度在血清中的LOD為21fM(0.34pg/mL)(補(bǔ)充圖3)。兩種方法的目標(biāo)蛋白零濃度尖峰均為為這些實驗提供有用的陰性對照:25%的血清含有多種蛋白質(zhì)的微摩爾濃度,在這些高蛋白質(zhì)背景之上可以檢測到非常低濃度的目標(biāo)蛋白。我們還開發(fā)了一個證明用于顯示低濃度核酸可以檢測到的DNA的主要數(shù)字分析方法,而無需復(fù)制目標(biāo)


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低豐度神經(jīng)因子檢測:芯棄疾芯片的臨床獨(dú)特價值,針對阿爾茨海默癥、帕金森病等神經(jīng)退行性疾病的早期診斷需求,芯棄疾單分子芯片展現(xiàn)出獨(dú)特優(yōu)勢。其飛克級檢測能力可在患者血清接近正常水平時,檢測到NfL、Aβ42等關(guān)鍵神經(jīng)因子的細(xì)微變化,較傳統(tǒng)方法提前16年預(yù)警疾病風(fēng)險。在檢測過程中,芯片對房水、玻璃體等微量樣本的適應(yīng)性,避免了腰椎穿刺等有創(chuàng)檢查,提升患者依從性。通過加大樣本稀釋倍數(shù),芯片有效排除基質(zhì)干擾,精細(xì)捕獲低濃度蛋白,為神經(jīng)疾病的病程監(jiān)測與藥物療效評估提供了無創(chuàng)、高敏的檢測方案,推動精細(xì)醫(yī)療在神經(jīng)領(lǐng)域的落地應(yīng)用。

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動力學(xué)上,對于200,000個微球分散在100μL中,珠子之間的平均距離約為80μm。大小為TNF-α和PSA(分別為17.3和30kDa)的蛋白質(zhì)將在不到1min的時間內(nèi)擴(kuò)散80μm。表明,在2小時的孵育過程中,蛋白質(zhì)分子的捕獲不會受到限制動力學(xué)上。其次,必須有足夠的珠子被加載到陣列上以限制泊松噪聲。200,000個珠子加載到50,000孔陣列中,通常會導(dǎo)致20,000–30,000個微球被困在1mL孔中。對于典型的背景信號為1%活性微球(見下文),這種裝載導(dǎo)致背景信號為200-300個活性微球檢測到,對應(yīng)于泊松噪聲的可接受變異系數(shù)(CV)為6-7%。第三,過高的微球濃度可能導(dǎo)致:a)非特異性結(jié)合增加,降低信噪比;以及b)分析物與微球的比例過低,導(dǎo)致活性微球的比例過低,從而導(dǎo)致泊松噪聲引起的高CV。這些因素的平衡NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日獲得。Rissin等人第5頁因素意味著每100μLoftest樣品含有20萬到100萬顆珠子是比較好的數(shù)字ELISA。同時,為了獲得可接受的背景信號(1%)和泊松噪聲)。 芯棄疾JX-8B數(shù)字ELISA,超敏檢測,低可測試到亞皮克級;

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通過在離散的飛升微孔陣列中分離和檢測單個免疫復(fù)合物,實現(xiàn)數(shù)字ELISA已使在亞細(xì)胞水平上測量血清中臨床重要的蛋白質(zhì)成為可能飛摩爾濃度。我們認(rèn)為,與之前報道的方法相比,數(shù)字ELISA表現(xiàn)出的不敏感性改善將轉(zhuǎn)化為診斷上的好處。例如,在本研究中測定的30個RP樣品中有9個樣品的PSA水平低于基于納米顆粒標(biāo)簽的先前比較高靈敏度PSA測定的LOD17。 6)數(shù)字化高敏ELISA芯片試劑盒,10ul樣本可同時測2-4個指標(biāo);芯棄疾產(chǎn)品數(shù)字ELISA微量樣本

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超敏:芯棄疾.數(shù)字ELISA,與Simoa同樣的檢測方案,將檢測結(jié)果二維化,使用成像方式,可精確量檢測區(qū)多少個微球載體上發(fā)生免疫反應(yīng),具有陽性熒光信號,理論可達(dá)fg級;使用常規(guī)ELISA試劑,測試IL-6等演示指標(biāo),也可輕松達(dá)到亞pg級(0.2-0.5pg/mL);使用顯微圖像處理方法,得到數(shù)萬個磁珠中,陽性的個數(shù)和亮度,建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,得到待測指標(biāo)的濃度。極低濃度時,檢測信息為數(shù)字化信號,有效提高檢測靈敏度到0.2 pg/ml級; 單分子級別數(shù)字ELISA易用性

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