CASA，即計算機(jī)輔助精子分析，是一種利用技術(shù)手段對精子活力、濃度和形態(tài)進(jìn)行精確評估的方法。WHO第五版指南強(qiáng)調(diào)，相比人工檢測，CASA提供更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)和精子動力學(xué)參數(shù)，如前向運(yùn)動和超活化運(yùn)動，以及獲能精子特征參數(shù)。研究顯示，CASA檢測的精子參數(shù)與體內(nèi)外受精成功率和受孕時間有***關(guān)聯(lián)。使用CASA分析儀，通常通過相差顯微鏡識別活動精子，適用于精子動力學(xué)分析。但要確保可靠結(jié)果，操作者需注意標(biāo)本制備、幀頻率、精子濃度等因素。每份樣本至少需要分析200個活動精子的運(yùn)動軌跡，更多精子樣本有助于分類和變異性的分析。國內(nèi)已有自主研發(fā)的精子分析儀，通常進(jìn)行兩次分析，每次至少200個精子，結(jié)果通過統(tǒng)計學(xué)分析得出。CASA在評估精子濃度時，需精確測量精子體積，確保**完全液化并充分混勻。計數(shù)板的精確性和計數(shù)一致性是關(guān)鍵，每次檢測需滿足5個視野和200條以上精子的比較低要求。對于高濃度**，可能需要稀釋以減少誤差。形態(tài)分析方面，CASA能夠定量評估精子頭部、中段和主段，尾部缺陷可通過活力評估。對于碎片過多或黏稠的**，可能需要洗滌以減少背景干擾。CASA中涉及一系列術(shù)語，如VCL（曲線速度）、VSL（直線速度）等，它們反映了精子運(yùn)動的不同特性。精子分析儀參數(shù)，平均路徑速率（VAP）?：精子頭沿其平均路徑移動時的時均速率。上海瀕危物種精子分析

CASA系統(tǒng)雖然有諸多優(yōu)點，但是很多因素都會影響到CASA儀器的使用及準(zhǔn)確性。CASA系統(tǒng)進(jìn)行**分析應(yīng)注意以下幾點：3.1標(biāo)本的采集與制作（1）采集前禁欲2?7天，禁欲時間過長、過短對**質(zhì)量都有一定影響。（2）容器要清潔。（3）特殊情況下，*可使用專門為采集**設(shè)計的無毒性避孕套，普通的乳膠避孕套因含有損害精子活力的物質(zhì)不可使用。（4）注意保溫（20?37℃），并于30分鐘內(nèi)送檢驗科。（5）標(biāo)本置于37℃水浴.精子運(yùn)動參數(shù)具有溫度敏感性，因此要求計數(shù)池應(yīng)于分析儀恒溫板上預(yù)溫。（6）密切注意**液化的情況，確保液化時間準(zhǔn)確，因**樣本隨放置時間的延長，精子活動力及活動率有減少的趨勢。標(biāo)本液化后取混勻樣本**1滴滴在樣品池中間，然后進(jìn)行分析。（7）檢測精子活動力，標(biāo)本密度應(yīng)控制在2×106/ml到50×106/ml之間。具有高密度（如高于50×106/ml）精子的標(biāo)本，通常會增加碰撞的頻率，并可能由此出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。在這種情況下，建議用同源精漿稀釋標(biāo)本。南京CASA精子分析VCL電腦全自動精子采集分析儀是一款高科技醫(yī)療設(shè)備，它巧妙地融合了現(xiàn)代計算機(jī)技術(shù)和自動控制技術(shù)。

CASA系統(tǒng)進(jìn)行**分析應(yīng)注意以下幾點：3.2**分析儀閾值的確定（1）精子灰度、對比度閾值：由于分析儀是根據(jù)灰度的高低來判斷精子的真?zhèn)危瑢α炼群蛯Ρ榷纫筇貏e高，檢測時應(yīng)多次試用，尋找能準(zhǔn)確識別精子的比較好灰度閾值[8]。（2）碎片：測定精子濃度準(zhǔn)確性受**中細(xì)胞成份和非精子的顆粒物質(zhì)的干擾，測定活動精子的百分率也受精子中非精子物質(zhì)的影響[9]，這些也是需要注意的。對于系統(tǒng)誤認(rèn)為精子的非精子成分，如精原細(xì)胞、白細(xì)胞和非白細(xì)胞顆粒等，可人為準(zhǔn)確記數(shù)后在可刪除雜質(zhì)一欄將其舍去。3.3出現(xiàn)1次異常結(jié)果應(yīng)間隔復(fù)查反復(fù)檢查2?3次方能得出比較正確的結(jié)果。3.4對于無精子的患者應(yīng)仔細(xì)進(jìn)行視野檢查注意不要將雜質(zhì)誤認(rèn)為精子計數(shù)在內(nèi)，應(yīng)將**3000ɡ離心15分鐘后，再涂片檢查，確認(rèn)無精后再出報告。

測定精子密度和精子總數(shù)的方法主要包括顯微鏡計數(shù)和全自動分析。1.顯微鏡計數(shù)：這是傳統(tǒng)的測定方法，需要收集精液，通常是使用量杯。收集后，應(yīng)在實驗室中盡快進(jìn)行計數(shù)。應(yīng)在光學(xué)顯微鏡下將精子進(jìn)行分類，這一步非常重要，因為完整的精子才能被計數(shù)。然后，將剩余的精液樣本通過自然沉降或離心的方法讓精子下沉，通過顯微鏡觀察并計數(shù)。這種方法需要一定的經(jīng)驗和技巧，而且受到許多因素的影響，如精子的活動性、濃度、形態(tài)等。2.全自動分析：隨著科技的發(fā)展，現(xiàn)在有全自動的精子分析儀，可以快速準(zhǔn)確地測定精子密度和總數(shù)。這種方法通過激光技術(shù)進(jìn)行，可以測量大量精子，包括前向運(yùn)動的精子。這些儀器通?？梢蕴峁└_的結(jié)果，并且減少了人為錯誤。在進(jìn)行精子計數(shù)前，男性應(yīng)避免長時間禁欲，因為這可能會影響精子的數(shù)量和質(zhì)量。同時，健康的飲食和生活方式也有助于提高精子的數(shù)量和質(zhì)量。?精子分析可以分析參數(shù)有，曲線速率（VCL）?：精子頭沿其實際曲線運(yùn)動的時均速率。

前沿性檢查：目前不作為生育力低下男性初步評估的常規(guī)方法。這一部分包括了非常專業(yè)化的、主要用于研究的方法和其他新興檢測技術(shù)。有研究認(rèn)為，氧化應(yīng)激可能是影響人類精子功能和妊娠結(jié)局的重要因素；新的證據(jù)也表明了精子DNA完整性和染色質(zhì)組裝與生育力的關(guān)系。前沿性檢查一節(jié)中詳細(xì)介紹了精子氧化應(yīng)激和活性氧實驗、精子染色質(zhì)檢測(苯胺藍(lán)和色霉素A3染色)的具體實驗操作及討論。手冊重寫了計算機(jī)輔助精子分析(CASA)部分，強(qiáng)調(diào)了CASA對于檢測精子濃度的局限性與質(zhì)控要求，增加了CASA檢測精子超活化運(yùn)動的內(nèi)容。對精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的功能分析，可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。為此，手冊新增了檢測精子跨膜離子流和轉(zhuǎn)運(yùn)的內(nèi)容。精子分析，直線速率（VSL）?：精子頭在開始檢測時的位置與終止所處位置之間的直線運(yùn)動的時均速率。廣州慢速運(yùn)動精子分析W.H.O 4

精子分析系統(tǒng)較傳統(tǒng)的分析法比較，具有速度快、量比性好、準(zhǔn)確性高、為臨床和科研提供客觀的檢測依據(jù)。上海瀕危物種精子分析

世界衛(wèi)生組織(WHO)《人類精液及精子—宮頸粘液相互作用實驗室檢驗手冊》于1980年***出版，以滿足臨床與科研對人類精液標(biāo)準(zhǔn)化檢測程序日益增長的需求。該手冊是人類精液實驗室檢查和處理程序及方法的標(biāo)準(zhǔn)操作指南，旨在提高精液分析的質(zhì)量和提高不同實驗室結(jié)果的可比性。在過去40年里，該手冊進(jìn)行了4次修訂與補(bǔ)充(1987年、1992年、1999年和2010年)，內(nèi)容涉及精液檢查的標(biāo)準(zhǔn)化操作程序、精子功能、精漿生化、精液處理與冷凍以及質(zhì)量保證等，已成為國際公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)，被世界各地臨床和實驗室***使用。中國衛(wèi)生部已在2003年將其納入人類輔助生殖技術(shù)規(guī)范。WHO《人類精液檢查與處理實驗室手冊(第5版)》精液參考值的數(shù)據(jù)是來自全球3大洲8個國家的前瞻性、多中心臨床研究的結(jié)果，通過循證醫(yī)學(xué)研究獲得的精液參數(shù)參考值具有里程碑式意義。自2010年出版以來成為WHO很受歡迎的出版物之一，即使在**近幾年其下載量也在穩(wěn)步增長。它是男科實驗室及全球范圍內(nèi)開展精液分析操作的其他實驗室、醫(yī)院和研究機(jī)構(gòu)使用的標(biāo)準(zhǔn)操作手冊。該手冊在國際大會、科學(xué)會議、以及WHO合作中心、專業(yè)學(xué)會和其他學(xué)術(shù)機(jī)構(gòu)的培訓(xùn)項目中進(jìn)行了***傳播。截止到2021年，已被3000余篇同行評議論文和評論引用。上海瀕危物種精子分析