美國HamiltonThorne的TOXIVOS精子分析儀已經(jīng)被FDA和國內外毒理學實驗室所使用。本試驗研究目的對精子分析儀和血細胞計數(shù)板在大鼠附睪精子計數(shù)結果的比較驗證。方法選取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,對三批次雄鼠的精子計數(shù)進行比較。健康雄鼠通過戊巴比妥鈉麻醉實施安樂死后,取左側附睪尾稱重,將附睪尾部放入37℃預熱的含有M199培養(yǎng)液平皿中,剪碎附睪尾,放入培養(yǎng)箱中37℃孵育5min,然后吸取1份精子懸液,用M199培養(yǎng)液進行一定倍數(shù)的稀釋,混勻后,取1滴稀釋液,滴入精子分析儀**載玻片上,將載玻片放入TOXIVOS精子分析儀載物臺,進行精子計數(shù),同時吸取稀釋后的精子懸液滴入血細胞計數(shù)板內,通過光學顯微鏡進行計數(shù),比較兩種計數(shù)方法的差異性。結果***批次雄鼠精子分析儀和血細胞計數(shù)器的精子計數(shù)結果分別為70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析儀和血細胞計數(shù)器的精子計數(shù)結果分別為128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析儀和血細胞計數(shù)器的精子計數(shù)結果分別為165.9±91.7,140.0±59.6。三個批次的精子分析儀和血細胞計數(shù)板的精子計數(shù)結果無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。結論精子分析儀是一種方便、可靠、快速、高效的研究工具,在生殖毒理學研究中具有重要的應用價值。精子分析，平均角位移（MAD）?：精子頭沿其曲線軌跡瞬時轉折角度的時均J對值?。山羊精子分析精子動力分析

醫(yī)生為了鑒定男性生育能力，常囑男方作精液檢查，正常精液顏色為灰白色或乳白色。如節(jié)欲時間長者，可呈淡黃色，若出現(xiàn)鮮紅色.暗紅色，則提示患者有炎癥或生殖道損傷。每次排精量為2~6毫升，常受排精次數(shù)與頻率的影響。新鮮精液呈稠厚膠凍狀，1小時之內應液化為稀薄的液體，用一根小玻璃棒插入精液中再提起，所形成的精液絲長度一般不超過2厘米，否則視為異常。精液呈弱堿性，PH值為7.2~7.8。正常精子數(shù)應超過2000萬/毫升。排精后1小時內活動精＞=50%。世界衛(wèi)生組織推薦精子活動力分為四級：0級：不活動；1級：精子原地擺動；2級：有中等的前向運動；3級：前向運動活躍，快速直線運動。正常的精子活動力為2~3級的精子＞=40%~50%.精子形態(tài)：畸形精子小于50%。分析男性生育能力不能單從精液的一項指標定論，應對精子數(shù)量活力活動率液化時間畸形率等多方面進行綜合能力分析。采集精液前5～7天內必須停止性生活，并且不得有**、夢遺等情況，還應禁煙戒酒，忌服對生精功能有影響的藥物等。精子分析VCLHamilton Thorne精子分析儀采用先進的光學成像，能夠實時分析精子的動力學參數(shù)，提供有效的精子質量評估。

二、生化及免疫學檢驗：1、精漿果糖測定【正常參考值】9.11-17.67mmol/L。【臨床意義】（1）精液果糖為0，可見于先天性兩側輸精管及精囊腺缺如、兩側輸精管完全阻塞或逆行**。（2）精液果糖降低，常見于精囊炎和雄***分泌不足，果糖不足可導致精子運動能量缺乏，甚至不易受孕。2、精漿酸性磷酸酶測定【正常參考值】金氏法：＞255nmol·s-1/L【臨床意義】（1）精漿酸性磷酸酶含量增高，常見于前列腺肥大或早期前列腺惡性**患者。（2）精漿酸性磷酸酶含量降低，常見于前列腺炎患者。（3）精漿酸性磷酸酶檢測是法醫(yī)鑒定有無精液**敏感的方法。3、精漿頂體酶活性測定【正常參考值】36.72±21.43U/L?！九R床意義】精子頂體酶活力與精子密度及精子頂體完整率呈正相關，其活力不足，可導致男性不育。4、精漿乳酸脫氫酶-X同功酶(LDH-X)測定【正常參考值】LDH-X***活性：2620±1340U/L；LDH-X相對活性：≥0.426?！九R床意義】LDH-X具有睪丸及精子的組織特異性，是精于運動獲能的關鍵酶，該酶檢測可作為診斷男性不育有價值的指標。睪丸萎縮患者LDH-X降低或消失，精子發(fā)生缺陷時無LDH-X形成，少精或無精者可致LDH-X活性降低。服用棉酚也可抑制此酶活性。

通過結果的生物學意義對結果質量進行評估?當所有具生物學意義的參數(shù)在測試中表現(xiàn)出較小的可變性時則方法學可變性亦較低方法學可變性低則結果質量就高。CASA系統(tǒng)獲得的數(shù)值與直觀評估獲得的數(shù)值進行分析和比較在精子數(shù)量和綜合運動性上具有較好的相關性而·131·中國優(yōu)生與遺傳雜志2002第10卷第6期DOI:10．13404／j．cnki．cjbhh．2002．06．091在前向運動精子百分率上的相關性較低］。Holt等報道了在常規(guī)實驗條件下采用五種不同的CASA系統(tǒng)對**參數(shù)值進行比較，其結果為：采用同一個測定池由不同的操作者測定**參數(shù)；變異系數(shù)（CV）是29％?活動精子比率的CV為24％?平均路徑速度（VAP）的CV為43?85％。作者們指出該分析結果不應看作是不同CASA系統(tǒng)間的工作情況的比較?實際上它揭示了操作者的錯誤是差異的主要來源。目前有待于尋找進一步的標準來評估CASA變量的結果質量。精子***的生物學功能是使卵細胞授精?因此用夫婦中的授精結果來考察精子運動性是合理的?只有在該基礎上能夠確定活動性參數(shù)的重要性。輔助生殖技術（授精IVF）的發(fā)展使檢測精子質量與各參數(shù)間的關系的比較成為可能；同樣可以驗證CASA測定結果與精子真實質量間的相關性有利于CASA結果質量的提高。Hamilton Thorne精子分析儀具備快速和高效的分析功能，能夠在短時間內處理大量樣本，提高工作效率。

前沿性檢查：目前不作為生育力低下男性初步評估的常規(guī)方法。這一部分包括了非常專業(yè)化的、主要用于研究的方法和其他新興檢測技術。有研究認為，氧化應激可能是影響人類精子功能和妊娠結局的重要因素；新的證據(jù)也表明了精子DNA完整性和染色質組裝與生育力的關系。前沿性檢查一節(jié)中詳細介紹了精子氧化應激和活性氧實驗、精子染色質檢測(苯胺藍和色霉素A3染色)的具體實驗操作及討論。手冊重寫了計算機輔助精子分析(CASA)部分，強調了CASA對于檢測精子濃度的局限性與質控要求，增加了CASA檢測精子超活化運動的內容。對精子跨膜離子流和轉運的功能分析，可更好地了解男性不育因素和男性生殖***疾病。為此，手冊新增了檢測精子跨膜離子流和轉運的內容。精子分析儀參數(shù)，精子頭側擺幅度（ALH）?：精子頭關于其平均路徑的側向位移幅度。美國瀕危物種精子分析VCL

HAMILTON THORNE精子分析儀可分析參數(shù)，鞭打頻率（BCF）?：精子曲線路徑跨越其平均路徑的平均頻率。山羊精子分析精子動力分析

檢查具備條件受檢者，經(jīng)歷一段經(jīng)常排精過程后，禁房事5－7天（上次排精到取標本間隔時間至少不得少于100小時）；[1]備大口有蓋清潔干燥容器一個，以**方式獲取精液，一次全部射入容器，蓋上蓋，記錄標本離體時間；貼身保溫，30分鐘內送到化驗室，并向檢驗員提供標本取出時間。精液常規(guī)觀察：精液總容量（毫升），精子活動情況，精子密度（個/毫升），精液液化時間（標本取出到精液液化的時間），不動精子（個/高倍視野）等。見不動精子，須染色方可區(qū)分：不活動的精子、死精子、未成熟精子等。找不到精子必須離心后檢驗，仍然找不到精子；方可報告無精。經(jīng)三次取樣化驗，結果仍然找不到精子方可確認無精子癥。山羊精子分析精子動力分析