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大鼠創(chuàng)傷性腦損傷_艾菱菲生物專業(yè)科研服務(wù)團(tuán)隊(duì)
創(chuàng)傷性腦損傷（Traumatic Brain Injury，TBI）作為全球范圍內(nèi)影響人類健康的重要問題，一直是醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域的重點(diǎn)。頭部受到外力作用導(dǎo)致的腦組織損傷，可引發(fā)一系列復(fù)雜癥狀，如意識障礙、***、嘔吐、言語及肢體運(yùn)動障礙等，嚴(yán)重者甚至危及生命。車禍、摔倒、撞擊等都是常見的致傷原因，其損傷程度與外力大小、作用部位和速度等因素密切相關(guān) 。
在對 TBI 的研究中，構(gòu)建可靠的動物模型是深入探究其發(fā)病機(jī)制、***方法的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。控制皮層沖擊（Rodent Controlled Cortical Impact Injury，CCI）模型是目前廣泛應(yīng)用的誘導(dǎo) TBI 的方法。
以 8 周齡雄性 SD 大鼠為例，具體建模過程嚴(yán)謹(jǐn)且細(xì)致。首先，將大鼠稱重并進(jìn)行麻醉處理，麻醉后以俯臥位固定在手術(shù)墊上，用剃須刀片仔細(xì)剃除大鼠頭頂部毛發(fā)，充分暴露頭皮，接著用手術(shù)刀作頭頂皮膚正中切口，使顱骨、表面筋膜和軟組織清晰可見。使用 40% 雙氧水緩慢輕柔地溶解掉顱骨表面軟組織后，用直徑 0.4cm 鉆頭在顱左側(cè)以中線旁 2.5mm，前囟后 1.5mm 為中心磨開直徑 5mm 的骨窗，同時(shí)要小心保留硬腦膜。隨后，將大鼠固定在 TBI 建模裝置上，精細(xì)設(shè)置參數(shù)：沖擊深度 3.5mm，速度 5m/s，接觸時(shí)間 500ms 。撞擊完成后，迅速將大鼠從裝置中取出，用棉簽短暫壓迫止血，清理手術(shù)野，再間斷縫合切口。而 Sham 組大鼠*開放顱窗，不進(jìn)行 TBI 操作。整個(gè)操作過程中，需格外注意避免出血和對周圍組織的刺激，以確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性。所有大鼠處理完畢后，放置于加熱墊上，等待其自然蘇醒。建模完成后，評估大鼠的神經(jīng)系統(tǒng)功能缺損情況至關(guān)重要。
改良神經(jīng)功能評分（Mahmood’s method Neurological Severity Score，mNSS）是一種常用的綜合評分系統(tǒng)。它從運(yùn)動、感覺和反射三個(gè)方面***考量動物的神經(jīng)功能表現(xiàn)，在腦損傷、神經(jīng)退行性疾病以及神經(jīng)保護(hù)藥物篩選等實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用***。
運(yùn)動功能：正常運(yùn)動的大鼠得 0 分，它們能夠自由、協(xié)調(diào)地行走、奔跑，四肢動作流暢；若出現(xiàn)輕微步態(tài)異常，但仍能自主行走并保持平衡，評分為 1 分；行走困難、步態(tài)不穩(wěn)、肢體協(xié)調(diào)性差，偶爾跌倒，在輔助下能行走的大鼠為 2 分；幾乎不能自主行走，肢體活動嚴(yán)重受限，只有在強(qiáng)烈刺激下才有微弱活動的，得 3 分；完全喪失肢體運(yùn)動能力，對任何刺激無反應(yīng)的則為 4 分。
感覺功能：對觸覺、痛覺和本體感覺刺激反應(yīng)正常的大鼠得 0 分；反應(yīng)稍遲鈍，如棉棒輕觸反應(yīng)延遲、針刺痛覺減弱、傾斜平面平衡能力稍差，但仍有反應(yīng)的為 1 分；感覺刺激反應(yīng)明顯遲鈍，需較強(qiáng)刺激才有反應(yīng)，痛覺明顯減弱，傾斜平面難維持平衡，本體感覺受損的是 2 分；幾乎對刺激無反應(yīng)，*在極強(qiáng)刺激下可能有微弱反應(yīng)或無反應(yīng)的為 3 分。
反射功能：角膜反射、耳反射、翻正反射等生理反射正常的得 0 分；部分反射減弱，如角膜反射或耳反射稍有延遲、翻正反射稍慢，但仍能完成反射動作的為 1 分；反射明顯減弱，需較強(qiáng)刺激才能引出，且反射動作不完整或延遲明顯的是 2 分；大部分反射消失，強(qiáng)烈刺激也難引出反射動作的為 3 分。mNSS 總分為 0 - 10 分，分?jǐn)?shù)越高表示神經(jīng)功能缺損越嚴(yán)重。0 - 3 分表明神經(jīng)功能基本正常或*有輕微缺損，動物日常生活活動基本不受影響；4 - 6 分提示中度神經(jīng)功能缺損，動物可能出現(xiàn)明顯的運(yùn)動、感覺或反射異常，正常生活活動受到一定影響；7 - 10 分則表示重度神經(jīng)功能缺損，動物生存質(zhì)量嚴(yán)重下降，可能需要特殊護(hù)理。
此外，抓力測試、新物體識別實(shí)驗(yàn)和 Morris 水迷宮實(shí)驗(yàn)等也常用于評估大鼠的相關(guān)能力。抓力測試能檢測大鼠的肌肉力量；新物體識別實(shí)驗(yàn)基于大鼠對新奇事物的探索天性，評估其情景記憶能力；Morris 水迷宮實(shí)驗(yàn)則主要用于評估大鼠的空間學(xué)習(xí)和工作記憶能力。
對 TBI 的研究，從模型構(gòu)建到功能評估，每一個(gè)環(huán)節(jié)都凝聚著科研人員的心血。通過對動物模型的深入研究，我們能夠更深入地了解 TBI 的發(fā)病機(jī)制，為開發(fā)更有效的***方法和干預(yù)措施提供理論依據(jù)，從而為 TBI 患者帶來康復(fù)的希望 。未來，隨著研究的不斷深入，相信在 TBI 的***和預(yù)防領(lǐng)域?qū)〉酶嗤黄菩缘倪M(jìn)展。
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