PCR擴(kuò)增及電泳 PCR擴(kuò)增使用Identifiler Plus試劑盒，10 μl擴(kuò)增體系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板，擴(kuò)增程序?yàn)椋?5℃，11分鐘；94℃，20 秒，59℃，3分鐘，30個(gè)循環(huán)；60℃，10分鐘；4℃保存；電泳在ABI 3500XL儀器中進(jìn)行；電泳上樣體系為，1 μl PCR產(chǎn)物，9 μl甲酰胺，其中已加Liz。 實(shí)施例3 以玻璃纖維膜提取土壤尿液DNA 1）DNA提取 刮取含有尿液的表層土壤，烘干，取100-200 mg土壤樣品，加入樣品管中，然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k，震蕩混勻后，75℃加熱裂解15分鐘；最大轉(zhuǎn)速離心5分鐘，將上清液轉(zhuǎn)移至新的樣品管中，加入800 ul結(jié)合液，混勻；混合液轉(zhuǎn)移至裝有玻璃纖維的離心柱中，上海關(guān)于土壤DNA提取的哪家靠譜？青浦區(qū)土壤DNA提取試劑盒土壤DNA提取商家

入RAase消化。問題7：A260/A230比值低怎么辦？解決思路：·A230是多肽、芳香基團(tuán)、苯酚和一些碳?xì)浠衔锏奈舛?，A230高表示樣品中存在一些污染物。【1】蛋白去除不干凈：增加蛋白沉淀離心的次數(shù)?！?】雜質(zhì)去除不干凈：洗脫之前，核酸吸附柱中盡可能不要?dú)埩粢后w，可增加空離心次數(shù)和時(shí)間。問題8：提取的DNA出現(xiàn)降解怎么辦？解決思路：·優(yōu)化裂解條件，避免過度裂解，降低物理破碎的力度·操作過程中是否有污染DAase，造成DNA降解靜安區(qū)FastDNA SPIN土壤試劑盒土壤DNA提取代理商買土壤DNA提取哪家專業(yè)？

實(shí)驗(yàn)的時(shí)候，有沒有遇到過實(shí)驗(yàn)結(jié)果不符合預(yù)期的情況，提取DNA的純度過低、濃度達(dá)不到預(yù)期或者是出現(xiàn)彌散現(xiàn)象。***給大家聊一聊一下其他同學(xué)遇到的問題，以及MP技術(shù)人員給出的解決方案，希望可以幫到大家，在以后的實(shí)驗(yàn)中順順利利~問題1：土壤樣品含水量過高怎么辦？解決思路：· 如果土壤樣品過濕，可先將樣本10，000 x g，離心30s，盡可能多的去除液體。問題2：DNA產(chǎn)量低怎么辦？解決思路：· 樣本微生物含量低：【1】增加樣本量【2】

內(nèi)生菌共生于植物內(nèi)部，要獲得內(nèi)生菌首先需要破碎植物組織。植物組織和內(nèi)生菌在形態(tài)、硬度等性質(zhì)上均有差異，想要獲得更多內(nèi)生菌基因組DNA，對裂解介質(zhì)的選擇是難點(diǎn)。2、相對于植物基因組，雖然內(nèi)生菌包括細(xì)菌，***，放線菌等不同類型微生物，但其基因組*占微小部分單獨(dú)提取內(nèi)生菌DNA比較困難，提取到的是混合DNA，通過PCR才能鑒定。內(nèi)生菌DNA提取思路：STEP1破壞植物釋放菌體；STEP2破壞菌體釋放核酸；STEP3提取DNA。有沒有合適的上海益啟生物公司土壤DNA提取的優(yōu)勢。

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